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21.
22.
将O、A型FMDVRNA分离纯化,用RT-PCR法扩增其聚合酶编码基因,可检测到A型10-6倍稀释、O型10-4倍稀释乳鼠肌肉毒。Nested-PCR扩增该基因内部片段,进一步说明该方法准确可靠。RT-PCR一步完成使整个检测时间不超过12小时,可在本病的诊断和检疫中推广此法  相似文献   
23.
以PPVVP2基因为模板设计、合成了1对引物,成功地从PPV兔体传代的组织及其细胞培养物中扩增出了312bp的特异性片段。敏感性试验表明,PCR扩增可以检测10^-4TCID50的病毒含量。利用该方法对12份PPV兔体传代的组织上清进行检测,查出了10份阳性;同时利用病毒分离、HA检测,查出了7份阳性。这些结果表明,本试验建立的PCR检测方法具有敏感性好、特异性强等特点,完全可以用于PPV感染的临床检测。  相似文献   
24.
对从发病鸡场分离到的一株超强马立克氏病毒株,用PCR扩增该分离毒株的meq致瘤基因并测定了其序列,发现其与超强病毒株SD2012-1的核苷酸同源性为99%。该分离毒株的meq基因序列在第575~577位比疫苗株CVI988/Rispens的meq基因序列多插入3个碱基(CAC),与SD2012-1相同。使用该分离毒株进行疫苗免疫攻毒实验,未免组的发病率为80.0%,常规剂量HVT组和10×常规剂量HVT组的发病率分别为73.0%和76.6%,HVT不能提供有效免疫保护。常规剂量CVI988组和10×常规剂量CVI988组的发病率分别为30.0%和30.0%,常规剂量HVT+CVI988组和10×常规剂量HVT+CVI988组的发病率分别为26.6%和26.7%,免疫CVI988疫苗组鸡和HVT+CVI988联苗组鸡的发病率比免疫HVT疫苗组鸡低。说明,野外毒株的不断变异已经突破现有疫苗的免疫保护,会给养鸡业带来严重的损失。  相似文献   
25.
26.
采用高效液相色谱法和苯酚硫酸法分别检测北冬虫夏草和冬虫夏草中虫草素和虫草多糖含量。HPLC色谱条件为:色谱柱为Waters NOVA—PAK C18(3,9mm×300mm,4μm);流动相为水:甲醇=90:10;流速1.00mL·min^-1,检测波长260nm;虫草多糖检测条件为:在待测样品中加入硫酸10mL,显色1min后,在酶标仪上用490nm波长测定样品的吸光值。结果表明:高效液相色谱法的检测虫草素的回归方程为Y=-7.066×10^6+3.206×10^6X,R=0.9999(n=3),虫草素的平均含量为北冬虫夏草子实体1.137%,菌丝体0,7162%.冬虫夏草中0.000523%,苯酚硫酸法检测虫草多糖的回归方程为Y=0.09889+1.161X,R=0.9964(n=7),虫草多糖在不同材料中的含量分别为北虫草子实体3.35%,菌丝体3.05%,冬虫夏草7.83%。该研究为进一步研究冬虫夏草替代品奠定了基础。  相似文献   
27.
近年来,疫苗在畜牧业上的广泛应用为预防和控制疫病发挥了重要作用,疫苗的研究和开发也出现了前所未有的繁荣。本文对疫苗及其免疫方法和免疫注意的问题进行总结,希望对大家能有所帮助。  相似文献   
28.
1974年,Tischer[32]发现,在多株连续传代的PK-15细胞中存在一种形态类似小RNA病毒的圆型小颗粒病毒,该病毒可以持续感染PK-15细胞,不会引起细胞病变。Tischer[33]证实,PK-15细胞中存在的这种病毒来源于当初制备PK-15细胞的猪肾组织,病毒的基因组由一个单股呈圆环状的DNA链组成,是一种新发现的病毒,称为猪圆环病毒(PCV)。血清学调查表明,PCV在柏林附近猪群中的阳性感染率高达77%-95%[34],之后加拿大[11]、新西兰[18]、英国[12]、北爱尔兰[1…  相似文献   
29.
根据猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的S基因核苷酸序列,设计合成了2对引物,以猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒细胞培养物为模板,进行PCR特异性片段扩增,猪传染性胃肠炎病毒扩增片段大小为886bp,猪呼吸道冠状病毒扩增片段大小为214bp。建立的套式PCR经过特异性、敏感性试验及对临床送检样品检测,证明本法具有快速、特异和高度敏感的特点。  相似文献   
30.
根据国外发表的水泡性口炎病毒(VSV)基因组核苷酸序列,设计了2对特异性引物,通过RT-PCR方法得到N基因。将此基因与pGEM-T Easy Vector相连,通过蓝白斑筛选出阳性克隆,碱裂解法小剂量提取质粒。经测定,N基因与参考序列同源性高达99%。同时根据克隆产物进行亚克隆,建立了VSV的PCR检测方法。  相似文献   
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