虾夷扇贝EST-SSR标记在栉孔扇贝中的通用性研究          下载免费PDF全文

张广明  孙秀俊  吴彪  杨爱国  刘志鸿  周丽青  刘寒苗  赵庆 《渔业科学进展》2018,39(4):139-146

为研究虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和栉孔扇贝(Chlamys farreri)的群体遗传多样性并分析其亲缘关系,对在虾夷扇贝中开发的60个EST-SSR位点在栉孔扇贝中的通用性进行了研究。结果显示,21个位点可在栉孔扇贝中扩增出特异性条带,通用性比例达35.00%,其中,17个位点具有多态性,多态性比例达28.33%。在虾夷扇贝和栉孔扇贝群体中,平均等位基因数(N_a)分别为2.7647和2.3529;平均有效等位基因数(N_e)分别为1.9487和1.6350;平均观测杂合度(H_o)为0.6314和0.3333;平均期望杂合度(H_e)为0.4569和0.3139;平均多态信息含量(PIC)为0.3726和0.2597;Nei's(1973)基因多样性指数(I)分别为0.4493和0.3087;Shannon信息指数分别为0.7176和0.5041;固定指数(F_(is))检测发现,7个位点偏离了Hardy-Weinberg平衡;遗传分化系数(F_(st))为0.2398。本研究开发的21对通用性EST-SSR标记,为进一步开展虾夷扇贝和栉孔扇贝遗传多样性分析、分子辅助育种、基因发掘和种质资源评价奠定了基础。  相似文献   

栉孔扇贝Dmrt1的分子鉴定及表达模式分析     

李茜茜  秦贞奎  魏茂凯  张志峰 《中国水产科学》2020,27(11):1277-1284

DMRT1是DMRT家族重要成员之一,主要参与动物性别决定和分化调控,但在不同动物中其表达和功能调控作用存在差异。本研究采用生物信息学方法分析了栉孔扇贝（Chlamys farreri）Dmrt1的序列特征,采用半定量RT-PCR技术确定了其mRNA在成体性腺、闭壳肌、外套膜、鳃和肾等组织中的分布,定量RT-PCR和原位杂交技术揭示了Dmrt1 mRNA在性腺中的时空表达特征。结果显示：栉孔扇贝Dmrt1序列中含有DMRT家族保守的DM结构域;其mRNA仅在栉孔扇贝性腺中表达,在精巢中的表达明显高于卵巢,并且以生长期精巢的表达水平最高;原位杂交检测Dmrt1阳性信号主要定位于生殖细胞的细胞质中。研究结果表明,Dmrt1在栉孔扇贝性腺中的表达特征与大部分动物性腺中的表达特征基本一致,推测其可能参与性别分化和精巢发育的功能调节。  相似文献   

Sperm cryopreservation of the noble Scallop Chlamys nobilis by a programmable freezing method: Effect of cryoprotectant     

Xing Zheng  Siqi Lin  Rui Yang  Jianguang Qin  Aimin Wang  Zhifeng Gu  Zhenhua Ma 《Aquaculture Research》2019,50(6):1678-1686

A study on Chlamys nobilis sperm cryopreservation by a programmable freezing method was conducted under laboratory condition. Four cryoprotectant agents (dimethyl sulfoxide [DMSO], methanol [MET], propanediol[PG] and ethylene glycol [EG]) and four concentrations (5%, 10%, 20% and 30%) were evaluated for their ability to retain sperm motility, movement characteristics and fertility. Results showed that cryopreserved sperm total motility produced by DMSO and MET at 5%, 10% and 20% were higher than other cryoprotectant treatment groups (CPA groups), as well as rapid sperm percentage. The curvilinear (VCL) and straight line (VSL) velocity produced by DMSO at 5% significantly higher than other CPA groups (p < 0.05), while no significant differences were found for average path (VAP) velocity. The lateral head displacement (ALH) in all CPA groups was similar and without significant difference (p > 0.05), as well as the beat‐cross frequency (BCF). A significant higher fertilization rate was produced in DMSO than that in MET at same concentration (p < 0.05), and no significant differences were found for differing concentrations of the same cryoprotectant (p > 0.05). Overall, 5%‐20% DMSO was more suitable for Chlamys nobilis sperm programmable cryopreservation when the calcium‐free Hanks’ balanced salt solution was used as the extender, and 10°C/min from 0°C to ?80°C was used as freezing rate. The findings presented in this study will benefit conservation programs for Chlamys nobilis.  相似文献   

栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术          下载免费PDF全文

陈维  魏守祥  李禹含  潘鲁青 《渔业科学进展》2020,41(3):111-118

采用匀浆、差速离心、镜检和标志酶测定等方法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术。结果显示,经Hoechst33258染色,在匀浆2min对照组中,观察到大量栉孔扇贝消化盲囊完整细胞,呈圆形或椭圆形,细胞膜完整,荧光强度较高;在匀浆3、4、5 min实验组中,完整细胞数目逐渐减少,且出现许多形态较小、荧光强度弱、轮廓模糊的细胞碎片。通过血球计数板法得到的细胞破碎结果与上述染色结果一致,随着匀浆时间(2~5 min)的增加,细胞破碎率升高,当匀浆时间达到5 min时,细胞破碎率升至94.24%。利用Hoechst 33258染色栉孔扇贝消化盲囊亚细胞分离组分(S2、C2、C4、S5和C5),镜检发现,C2组分荧光强度最强,荧光颗粒数目多,而其他组分荧光强度弱,且基本观察不到荧光颗粒。由此推测,细胞核主要存在于C2组分中;同时,细胞膜(5’-核苷酸酶)、线粒体(琥珀酸脱氢酶)、细胞质(乳酸脱氢酶)和微粒体(葡萄糖-6-磷酸酶)标志酶活力在其他亚细胞组分中有少量检出,但它们在S2、C4、S5和C5组分中的的标志酶活性比例较高(分别为63.90%、64.89%、77.82%和67.55%)。由此推测,S2、C2、C4、S5和C5分离组分分别为细胞膜、细胞核、细胞质、线粒体和微粒体。本研究成功构建了栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术方法,为贝类生理机制研究提供技术支持。  相似文献   

几种养殖扇贝微卫星标记的研究进展     

胡景杰  战爱斌  胡晓丽  陆维  黄晓婷  包振民 《水产学报》2009,33(2):348-356

我国扇贝养殖规模占世界首位,栉孔扇贝( Chlamys farreri ) 、华贵栉孔扇贝( Chlamys nobilis ) 、虾夷扇贝( Patinopecten yessoensis) 和海湾扇贝( Argopecten irradians ) 是4 种主要养殖扇贝种类。本文主要概述我国4种主要养殖扇贝微卫星标记开发现状以及在遗传多样性分析、遗传图谱构建、物种鉴定等方面取得的研究成果和应用进展,为微卫星标记在扇贝类遗传学研究提供基础资料。  相似文献   

栉孔扇贝神经节结构的显微观察          下载免费PDF全文

孙虎山  王宜艳 《中国水产科学》2007,14(3):390-396

采用甲苯胺蓝、嗜银和铅苏木素3种组织学染色方法分别对栉孔扇贝(Chlamys farreri)神经节进行显微观察。结果表明,甲苯胺蓝染色法效果最好,神经细胞和神经纤维均着色较深,与背景反差较大。神经干及神经索中无神经元胞体,仅有沿神经索方向分布的神经纤维。神经节包括:1对彼此分离的脑侧神经节、1对连接在一起的足神经节和左右2神经节完全愈合而成的脏神经节。各神经节均由表面的神经节被膜、周边的胞体层和中央纤维网构成,胞体层分层现象不明显,神经元胞体根据其大小大致可分为直径15-36μm的大型细胞和5-15μm的小型细胞,胞体发出的突起均进入中央神经纤维网。脑侧神经节胞体层明显分脑神经节(CG)和侧神经节(PG)2区,CG区中神经元胞体主要分布于前端和外侧面,而PG区中神经元胞体则主要分布于外侧面;大型细胞较多,小型细胞很少。足神经节表层神经元胞体无分区分布的现象;大型细胞较少,而小型细胞较多。脏神经节相对较复杂,神经元胞体数目多,胞体层分区明显,分为:2个前叶,1个后叶,2个侧叶和2个嗅检叶;前叶和后叶中大型细胞较多,小型细胞较少;侧叶和嗅检叶中仅有小型细胞,而无大型细胞。  相似文献   

有机-无机复合污染对扇贝积累石油烃的影响     

梁爱萍  姜雪梅  柳瑞翠  刘伟 《安徽农业科学》2012,40(3):1637-1640

[目的]研究有机-无机复合污染对扇贝积累石油烃的影响。[方法]在实验室模拟条件下研究石油烃与Cu、Pb复合污染对栉孔扇贝积累石油烃的影响。[结果]单一石油烃污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累量随暴露时间的延长及石油烃浓度的增大都有明显增大趋势;复合污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累量随暴露时间及污染物种类及浓度的变化发生着动态变化,且不同浓度处理组间差异很大,当石油烃浓度固定为0.6 mg/L时,不同处理浓度组的Cu、Pb及Cu与Pb组合都促进了栉孔扇贝对石油烃的积累,但低处理浓度组的Cu、高处理浓度组的Pb、低处理浓度组的Cu与Pb组合更有利于促进栉孔扇贝对石油烃的积累。[结论]石油烃与Cu、Pb复合污染条件下,石油烃在栉孔扇贝体内的积累状况比单一石油烃污染条件下要复杂得多。  相似文献   

三亚华贵栉孔扇贝套笼养殖方式研究     

鄢朝  顾志峰  章华忠  王嫣  石耀华  王爱民 《热带生物学报》2012,3(1):88-91

使用网目为0．8cm的聚丙烯挤塑网套住吊笼对华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）的幼苗和幼贝进行养殖试验。结果表明：在幼苗期,套网笼组的整体壳高均低于不套网笼组,且成活率远低于不套网笼组;在人工筏式吊笼养殖的幼贝实验方面,套网笼组幼贝的生长速度略低于不套网笼组,但套网笼组的成活率高于不套网笼组。因此,套网笼法不适合幼苗的养殖,但适合幼贝的养殖,此项技术可以在华贵栉孔扇贝幼贝养殖上推广应用。  相似文献   

栉孔扇贝精子的超低温保存研究   总被引：8，自引：1，他引：7  

李纯  李军  薛钦昭 《海洋水产研究》2000,21(1):57-62

于１９９９年５￣６月对栉孔扇贝精子进行超低温保存研究。结果表明,抗冻液为ＤＭＳＯ５％＋蔗糖５％并以２０℃ｍｉｎ的降温速率通过０￣－８０℃时的保存效果最好,冻精的活力、受精率、化率分别为４９．３９％、４２．０６％和１２．１５％。样品体积对超低温存效果产生影响,体积为０．６ｍｌ或１ｍｌ比较适宜。此外,在０℃进行预处理平衡是必须的,但时间不宜太长。冻精用３５℃水浴解冻效果最佳,５０℃次之,２０℃最差。对  相似文献   

虾夷扇贝精子的冷冻保存及其杂交试验应用研究     

杨培民  杨爱国  刘志鸿  周丽青 《上海水产大学学报》2007,16(4):351-356

以精子活力和受精率为参数,就收集精子的方法、抗冻剂的种类和浓度及冷冻程序和平衡时间对虾夷扇贝精子超低温保存效果的影响进行了研究,并进行了冻存精子与栉孔扇贝卵子的杂交实验.结果表明,肾管处收集到的精液与海水配的16%DMSO 1∶3（v/v）混合,在4 ℃冰箱内平衡5～10 min,在液氮面上方20cm、3 cm处分别停留3 min、10 min后浸入液氮保存,冻精活力在40%以上.在液氮中保存1 d、8 d、30 d、90 d后解冻,冷冻精子活力没有显著差异（P＞0.05）,但明显低于新鲜精子的精子活力.虾夷扇贝的冻精可以使栉孔扇贝卵子受精,受精率在20%以上,并能得到正常的D型幼虫.  相似文献