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41.
42.
成功构建能够高效表达抗菌肽Catesbeianin-1的毕赤酵母表达菌株,探究其表达粗提物对产蛋后期鸡的作用效果。结果显示,与对照组相比,饲喂了抗菌肽的产蛋后期鸡产蛋率提高约3.00%,料蛋比下降约2.23%,但差异不显著(P>0.05);蛋壳厚度和蛋壳相对质量分别较对照组显著提高(P<0.05)约5.03%和8.46%;2组器官指数差异不显著(P>0.05);试验分别至15,30d时,试验组总蛋白较对照组显著提高(P<0.05),其他血清生化指标差异不显著(P>0.05);与对照组相比,由ConA诱导的试验组鸡脾淋巴细胞增殖转化率显著提高(P<0.05)。结果表明,抗菌肽Catesbeianin-1粗提物在一定程度上提高了产蛋后期鸡的产蛋率、蛋品质及免疫功能。  相似文献   
43.
鹅源副黏病毒融合蛋白在毕赤酵母细胞中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用特异性引物,从鹅源副黏病毒NA-1株中扩增出F蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pT-F。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pT-F,回收目的基因F片段,并将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαA-F。用PmeⅠ酶切pPICZαA-F使其线性化,电击转化至感受态毕赤酵母GS115菌中。PCR法鉴定阳性重组子,10 mL/L甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Westernblot分析。结果表明,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为63 ku的重组蛋白,该重组蛋白可与NA-1株鹅源副黏病毒多克隆抗体发生特异性血清学反应。  相似文献   
44.
蜜蜂球囊菌荧光PCR快速检测方法的建立及应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
以蜜蜂球囊菌ITS1、ITS2和5.8 S rDNA保守序列(U68313)为参考,设计一对特异性引物和一条TaqMan探针,建立了一种快速检测蜜蜂球囊菌的荧光PCR方法。该方法灵敏度达1 ng/μL的阳性DNA比常规PCR高10倍。检测的特异性高,与蜜蜂幼虫芽胞杆菌、蜂房蜜蜂球菌、蜜蜂败血杆菌无交叉反应,同时可避免常规PCR因电泳造成的污染。应用该方法对蜜蜂及蜂制品的实际样品和模拟样品进行检测,结果显示所建立的荧光PCR检测方法在4 h内即可报告结果,与传统病原菌分离培养、常规PCR相比较,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好等优点,可以用于蜜蜂及其制品中蜜蜂球囊菌的快速检测和进出境检疫。  相似文献   
45.
噬茵体疗法在对抗多重耐药病原茵引起的感染方面具有很大的应用潜力。本研究从污水中分离到一株新的噬茵体,命名为NKP-1,并对噬茵体NKP-1的主要生物学特性进行研究。通过电镜观察确定NKP-1为短尾噬茵体,裂解试验表明该噬茵体为烈性噬茵体,具有很高的增值效率。体外试验表明它能够快速感染超强耐药的肺炎克雷伯菌株BAA-2146(NDM-1)并将其裂解。通过腹腔注射单一剂量的NKP-1(2×10~7 pfu/mL)就可以有效地保护BAA-2146(4×10~9 cfu/mL)感染引起的小鼠茵血症模型。在肺炎克雷伯菌BAA-2146与噬菌体NKP-1体外共同培养的过程中,我们分离到对该噬茵体具有抗性的突变菌株,通过动物试验确定该突变株表现为极低的毒力,且不影响NKP-1的治疗效果。本研究为利用噬菌体治疗多重耐药菌感染提供了理论基础与试验依据。  相似文献   
46.
试验旨在研究抗菌肽对芦花鸡血清激素水平的影响。试验选用900只1日龄健康芦花鸡,随机分成3组,每组3个重复,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组每千克日粮中添加0.1 g鲎素抗菌肽,试验Ⅱ组每千克日粮中添加由0.1 g鲎素抗菌肽和5×107个酵母活菌组成的抗菌肽制剂。试验期为90 d。结果表明:与对照组相比,日粮中添加抗菌肽、抗菌肽制剂极显著地提高了芦花鸡的体重(P<0.01)、平均日增重(P<0.01),极显著地降低了料肉比(P<0.01);与对照组比较,日粮中添加抗菌肽、抗菌肽制剂对血清生长激素水平无显著影响(P>0.05),抗菌肽能显著提高14日龄T4水平(P<0.05)、84日龄IGF-I水平(P<0.05),抗菌肽制剂能极显著提高14日龄T4水平(P<0.01)、显著降低42日龄T3水平(P<0.05)。  相似文献   
47.
本文旨在探讨抗菌肽制剂对芦花鸡胸肌肉质性状、游离氨基酸及微量元素含量的影响.试验采用单因子设计方案,选取1日龄健康芦花鸡450只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复50只鸡(公母各占1/2).Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加抗菌肽及抗菌肽+酵母菌制剂的试验饲粮,试验期90 d.结果表明:1)Ⅱ、Ⅲ组芦花鸡胸肌滴水损失较Ⅰ组有降低趋势,但差异不显著(P>0.05),肌纤维直径均较Ⅰ组极显著降低(P<0.01).Ⅱ组肌纤维密度较Ⅰ组显著提高(P<0.05),Ⅲ组较Ⅰ组极显著提高(P<0.01).2)Ⅱ、Ⅲ组胸肌必需氨基酸含量和游离氨基酸总量与对照组无显著差异(P>0.05).3)Ⅱ、Ⅲ组胸肌硒含量均较Ⅰ组有极显著的提高(P<0.01),Ⅲ组亦显著提高了锰含量(P<0.05),对其他微量元素含量无显著影响(P>0.05).综上所述,抗菌肽+酵母菌制剂对芦花鸡胸肌肉质性状、游离氨基酸及微量元素含量的作用效果较好,且优于单独使用抗菌肽.  相似文献   
48.
【目的】 β-半乳糖苷酶是一类参与细胞壁降解的糖苷酶,在植物的生长发育和果实成熟软化过程中发挥重要作用。通过对猕猴桃2个β-半乳糖苷酶基因的鉴定及其表达模式研究,明确它们在猕猴桃果实软化中的作用,丰富猕猴桃的后熟软化机理研究。【方法】 以‘米良1号’猕猴桃为试材,采用RT-PCR法扩增果实的β-半乳糖苷酶基因,利用在线数据库分析其编码蛋白的特性、功能结构域、系统进化关系、基因结构和调控miRNA,应用qPCR研究其在不同组织部位、果实的不同软化时期、不同贮藏温度和ABA处理后的表达特征,并结合酶活性变化,阐释这2个β-半乳糖苷酶基因在猕猴桃果实软化中的作用。【结果】 克隆得到2个猕猴桃β-半乳糖苷酶基因(Adβgal-1Adβgal-2),登录号分别为MH319788和MH319789。Adβgal-1的开放阅读框为2 280 bp,编码759个氨基酸;Adβgal-2的开放阅读框为2 025 bp,编码674个氨基酸。结构域分析显示,Adβgal-1和Adβgal-2均含有植物糖苷水解酶家族35的功能结构域(Glyco_hydro_35)。基因结构分析表明,Adβgal-1由18个外显子和17个内含子组成,而Adβgal-2由17个外显子和16个内含子组成。进化树分析显示它们位于两个不同的进化分支中,且序列差异较大,可能源自不同的基因祖先。qPCR分析结果表明,Adβgal-1Adβgal-2在猕猴桃的各组织部位(根、茎、叶、花、幼果、成熟果)均有表达,但表达水平不同;它们均在果实软化初期上调表达,随着果实硬度的下降,表达量持续增加;在25℃贮藏过程中,它们均在3 d时上调表达,随着时间的推移,表达量增加;而在4℃贮藏过程中,Adβgal-1的表达受到抑制,Adβgal-2的表达呈波浪式;ABA处理诱导Adβgal-1Adβgal-2的表达。酶活性测定结果显示,β-半乳糖苷酶活性在果实软化初期略有降低,随着果实硬度的下降逐渐升高。【结论】 Adβgal-1Adβgal-2均参与猕猴桃果实的软化进程。不同贮藏温度和ABA处理对猕猴桃果实软化的影响可能是通过改变β-半乳糖苷酶基因的表达而实现的。  相似文献   
49.
基于频率法的斜拉索索力测试研究   总被引:5,自引:1,他引:4  
分析了斜拉索的抗弯刚度、边界条件、垂度、测试系统分析精度和温度等因素对索力测试精度的影响,并提出了一些行之有效的改进措施.通过对广州海印大桥的索力测试及分析过程表明,根据所测频率基于振动原理所获得的索力在通常情况下具有相当的精度,适用于成桥索力测试.  相似文献   
50.
枯草杆菌多重耐药基因bmr的克隆及原核表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据BenBank上已公布的多重耐药基因bmr的编码序列设计1对引物.以枯草杆菌基因组为模板,扩增出1170bp的DNA片段,将所得片段与pMD18T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其扩增片段测序结果与文献报道序列同源性达98.81%。将该片段定向克隆到pET-28a(+)表达质粒中。提取质粒转化到BL21(DE3)中,经1mmol/l。IPTG诱导阳性菌.通过SDS-PAGE检测出bmr基因的表达产物。  相似文献   
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