罗斯河病毒RT-LAMP检测方法的建立     

袁向芬  冯春燕  吕继洲  吴绍强 《中国动物检疫》2018,35(12):75-79

根据Gen Bank中收录的罗斯河病毒(RRV)基因序列,以其保守的E2基因为靶序列,设计并筛选出一套特异性LAMP引物;通过优化反应条件,最终建立了RRV RT-LAMP检测方法,并对其灵敏度、特异性进行了验证。结果显示:本方法对RNA样本的最低检测限可达10拷贝/25μL,而荧光RT-PCR方法和常规RT-PCR方法的灵敏度分别为10拷贝/25μL、100拷贝/25μL;其特异性良好,不与同属或相似病毒发生交叉反应。结果表明,本方法灵敏、特异、快速、便捷,可应用于我国虫媒病高发区的RRV筛查预警。  相似文献   

BPA不影响卵母细胞减数分裂相关基因Dazl的甲基化   总被引：1，自引：0，他引：1  

章寒琼  张西锋  潘博  沈伟  李兰 《青岛农业大学学报(自然科学版)》2011,(2):83-87

为了探讨环境雌激素BPA对小鼠卵母细胞减数分裂相关基因Dazl甲基化的影响,本研究通过给孕鼠饮用含有BPA的水方式使胎鼠在发育过程中接触BPA,利用重亚硫酸盐测序法,分析了胎鼠生殖嵴卵母细胞不同发育时期Dazl甲基化水平的变化。结果显示:Dazl在减数分裂期间处于低甲基化水平,无论对照组或处理组均低于10%,说明Dazl的低甲基化对维持减数分裂的正常进行有重要作用;对照组与处理组的甲基化水平相当,差异不显著,说明本研究的BPA浓度不影响卵母细胞Dazl的甲基化水平。  相似文献   

《中国兽医学报》2011年第31卷总目次     

《中国兽医学报》2011,31(12)

  相似文献   

大鲵蛙病毒LAMP检测方法的建立     

《中国兽医学报》2015,(4):558-564

根据大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)主要核衣壳蛋白MCP编码基因的序列设计合成4条特异性引物,以重组pMD19-T-MCP质粒为模板,通过反应条件与反应体系优化,建立CGSRV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对CGSRV的最低检测限,并与巢式PCR和普通PCR进行比较。结果表明,该LAMP方法最佳反应温度为62℃,反应时间为40min,对CGSRV最低检测限5copies/μL,而巢氏PCR和常规PCR的检测限为50和5×103copies/μL,表明该LAMP方法的灵敏度显著高于巢氏PCR和常规PCR;且与淋巴囊肿病毒、鲫鱼出血病疱疹病毒2型、云斑尖塘鳢虹彩病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒、迟钝爱德华菌、嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌等均无交叉反应;反应结束后加入荧光染料EtBr可肉眼判定粉色为阳性,而棕色则为阴性。因此,该方法对CGSRV的检测较巢氏PCR和常规PCR更为简便、快速、灵敏、特异,且不需昂贵仪器设备,更适合养殖现场检测,为CGSRV早期感染的快速检测提供了新方法。  相似文献   

毒死蜱对桔小实蝇体内代谢酶的影响     

沈登荣  田学军  袁盛勇  宋文菲  李珣 《中国果业信息》2014,43(2)

为了解毒死蜱对桔小实蝇体内代谢酶的影响，采用不同浓度的毒死蜱对桔小实蝇敏感种群进行连续处理，测定其体内的羧酸酯酶（CarE）、谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）的活性。结果表明：随着毒死蜱浓度的增加，桔小实蝇的敏感性出现逐渐下降的趋势，体内的CarE活性得到显著提升（F=43.21，p=0.024），抗性倍数为1.74，GSTs活性也显著上升（F=47.73，p=0.018），抗性倍数为1.98，但对CAT、POD的提升作用较小，表明毒死蜱对桔小实蝇体内的CarE、GSTs活力具有一定的诱导作用。  相似文献   

北京水系中腐霉和疫腐霉种类调查     

曹欣然  朱小琼  国立耘 《中国农业大学学报》2019,24(9):56-70

为研究北京地区水系中腐霉和疫腐霉种类分布,采用叶饵法从北京水系中诱集菌株,共分离到腐霉、疫腐霉182株,利用Single-strand conformation polymorphism (SSCP)进行分析,筛选出不同基因型的代表菌株,并依据形态学特征及ITS序列对这些菌株进行种类鉴定。结果共发现6个已知种和3个可能的新种,其中:湖滨疫腐霉Phytopythium litorale和果胶裂解腐霉Pythium pectinolyticum为国内新记录种;旋柄疫腐霉Pp.helicoides、异丝腐霉P.diclinum、簇囊腐霉P.torulosum和袋囊腐霉P.marsipium为北京地区新记录种。研究结果可为未来监测北京地区水系中病原菌的分布情况提供基础数据。  相似文献   

如何根据药物敏感试验结果选用渔用药物(上)     

孟思妤  孟长明  陈昌福 《科学养鱼》2015,(3):87

<正>药物敏感试验是水生动物执业兽医师进行渔用药物合理应用的重要参考指标之一,对于其正确理解,不能单纯依据报告上敏感、耐药或中介的字眼,还应结合患病水生动物机体因素、药物的药动学和药效学特点、致病菌耐药机制、给药途径对药物流失程度的影响等因素,综合分析后方可做出正确的判断。水生动物执业兽医师在应用药物敏感试验结果指导渔用药物选择时,常出现不熟悉渔用药物的抗菌谱等药学特性、不了解致病菌的天然耐药性、不考虑给药途径对药物流失程度影响等情况。为此,这里进行  相似文献   

“中化”牌农用钾     

《当代农业》2011,(22):24-25

“中化”农用钾产于加拿大，一般包装为50公斤／袋或25公斤／袋：产自天然钾矿，外观为浅红色或白色，结晶状颗粒或粉末，易溶解，吸收好，含钾量达60％以上。该产品适用于水稻、小麦、玉米、棉花、白菜、茄子等对氯中度敏感或不敏感作物，烟草及盐碱土应少施或不施：可与氮磷肥配合作基肥或早期追肥，不能作种肥。  相似文献   

江苏沿江地区不同水稻品种对纹枯病的敏感差异性     

刘嘉德  孙雪梅  易红娟 《江苏农业科学》2014,(12)

通过分品种小区种植、系统调查纹枯病发生情况。结果表明,不同水稻品种对纹枯病敏感度差异较大,纹枯病始见期以南粳41、南粳42等2个品种较早,宁粳5号,盐粳5号2个品种始见期较晚。盐粳6号、南粳44号、镇稻14、南粳42发展蔓延较迅速,属高感纹枯病品种;南粳5055、宁粳6号、常农粳4号发展缓慢,属抗病品种。  相似文献   

基于RT-RAA的禽流感H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法的建立     

杨芷翊  王新凯  史玉婷  付思源  张钰炘  曹琛福  贾伟新 《畜牧兽医学报》2023,(9):3803-3811

采用逆转录-重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)和成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)检测系统，建立一种快速、高灵敏度和高特异性的禽流感病毒(AIV)H5亚型核酸检测新方法。通过分析342条禽流感病毒H5亚型的HA基因序列，选取保守性区域设计具有强特异性的CRISPR RNA(crRNA)序列以及RT-RAA引物，并对检测体系中的主要成分LwaCas13a蛋白、crRNA、TaqMan探针、T7 RNA Polymerase、NTP Buffer Mix含量进行优化，建立了基于RT-RAA的AIV H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法。取10⁵～1 copies·μL^-1含有目的基因的质粒标准品和其他亚型禽流感病毒以及其他禽病病毒分别验证和评价该方法的灵敏性和特异性。结果表明，本文设计的RT-RAA引物与crRNA特异且灵敏，其最佳反应体系中主要成分用量分别为LwaCas13a蛋白(60μg·mL^-1)2.0μL、crRNA(100μmol·L^-1)3.2μL、TaqMan...  相似文献