化学去核卵母细胞为受体的小鼠体细胞核移植     

杜卫华  李世杰  郑敏  戴蕴平  李宁 《广西农业生物科学》2006,25(Z1):201-202

卵母细胞的化学去核是采用干扰染色体分离或纺锤体正常功能的化学试剂,使其所有染色质通过纺锤丝牢固结合,并借助极体排出的惯性将所有染色质全部带出胞外,达到去核目的。目前以化学去核处理的MⅡ期卵母细胞为受体,已获得克隆小鼠。然而,第一次减数分裂期的小鼠卵母细胞经化学去核后,进行核移植还未见报道。与传统的机械去核相比,该方法对卵母细胞无机械损伤,完全是极体的自然排放;同时细胞质及其中核重编程相关因子损失量小;而且高效、省时,程序简单,所得的卵胞质或许更适合于供体细胞核的重编程。剪取超排小鼠的卵巢,以注射器刺破有腔卵泡后获得卵母细胞和卵丘细胞复合体,进行体外成熟培养。成熟培养5 h后去除卵丘细胞,挑选生发泡破裂的细胞顺序移入含脱羰秋水仙碱(DC,0.4μg/mL,2 h)和DC(0.4μg/L) 放线菌酮(CHX,50μg/mL)的M16培养液中继续培养,直到第一极体排出。去核卵胞质与胎儿成纤维细胞用植物凝集素(PHA,200μg/mL)粘合后,转入电击槽;施加1个5 V/mm、3μs交流电脉冲和2个92 V/mm、70μs直流电脉冲进行电融合。3 h后,以SrCl2激活6h,于四孔培养皿中制作的“孔中孔”(well of well)体外培养重构胚。试验重复3次,共计698个卵母细胞,获得的重构胚融合率和激活率分别为84.8%和93.6%;胚胎2-细胞发育率为24.7%,4-细胞率为6.74%;2-细胞期克隆胚移植假孕受体后,没有获得怀孕受体。试验分别以“血清饥饿”胎儿成纤维细胞、新鲜细胞和冷冻保存细胞为供体作核移植,结果表明,冷冻保存细胞的融合率(69.3%)与其余两组(80.6%和84.8%)呈显著差异(P<0.05);激活率、2-细胞和4-细胞发育率,则三组间差异不显著(P>0.05)。本研究将化学去核与无透明带技术相结合,完全丢弃了传统核移植的显微操作及其繁琐程序,属手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,同时提高了核移植的生产力,最终提高核移植总效率。  相似文献   

水稻压致变异后代主要农艺性状的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈钊明  翁克难  廖耀平  徐世平  何秀英  肖万生  陈粤汉  律广才  程永盛 《核农学报》2004,18(3):170-173

用高压诱变法处理高收获指数型水稻品种粤香占 ,培育出变异材料粤压 1号、2号和 3号。通过对其主要农艺性状比较研究发现 ,3个变异材料与粤香占在生育期、株高、分蘖数、有效穗数、穗部性状、外观米质、抗病性和抗寒性等方面存在明显差异 ,表明高压诱变可能成为一种新的育种方法。  相似文献   

观赏植物诱变育种的研究现状和展望   总被引：4，自引：2，他引：4  

马爽  李文建  周利斌  余丽霞  董喜存 《核农学报》2007,21(4):378-382

本文综述了观赏植物辐射诱变育种的研究现状,并对花卉辐照诱变的手段、方法、处理材料和适宜辐照剂量、辐照机理与方法及应用作了总结,同时对观赏植物辐射诱变育种存在的问题及发展方向进行了探讨。  相似文献   

兴安落叶松诱导抗性对舞毒蛾幼虫解毒酶活性的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

冯春富  严善春  鲁艺芳  胡晓 《林业科学》2011,47(8)

为了解不同诱导处理与落叶松诱导抗性及广食性昆虫舞毒蛾协同抗性之间的关系,以喷施茉莉酸甲酯、茉莉酮、舞毒蛾幼虫取食和松毛虫幼虫取食4种方法处理落叶松幼苗,检验舞毒蛾幼虫取食不同处理诱导的落叶松后,其中肠酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(AKP)、羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)4种解毒酶活性随时间的变化趋势。结果表明:取食不同处理诱导的落叶松后,舞毒蛾幼虫酸性磷酸酯酶活性均显著低于对照;取食经舞毒蛾幼虫取食诱导的落叶松后,试虫中肠碱性磷酸酯酶活性先升高后降低,除此之外,取食其他3种处理诱导的落叶松后,幼虫中肠碱性磷酸酯酶活性均受到抑制;幼虫羧酸酯酶活性也都受到不同程度抑制,与对照相比差异极显著;幼虫谷胱甘肽S-转移酶的活性,取食茉莉酸甲酯和舞毒蛾幼虫取食处理的幼苗显著低于对照,而取食另外2种处理的幼苗显著高于对照。舞毒蛾幼虫取食诱导的植物抗性,可影响同一种群后续取食者的解毒机制,这是植物抗性和昆虫种内竞争的综合表现。茉莉酸甲酯作为一种外源植物激素,可诱导植物产生抗性,且有效抑制后续取食者的解毒作用,其作用强度与作用时间与舞毒蛾幼虫取食处理极为相似。茉莉酸甲酯可作为有效的植物诱导剂,在害虫...  相似文献   

稻瘟菌细胞壁热解物诱导水稻抗稻瘟病的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

夏惠娟  王振中 《广西农业生物科学》2006,25(2):125-130

以水稻近等基因系和广东省稻瘟病菌优势小种ZC13的细胞壁热解物(HDS)为材料进行诱导抗病性的研究。HDS通过细胞壁121°C 20 m in热解获得。HDS中葡萄糖质量浓度为176.83 m g/mL。HDS在体外对稻瘟病菌的孢子萌发和菌丝生长均无抑制作用,但处理水稻后可以显著提高水稻对稻瘟病菌的抗病性。在亲和性品系中,诱导抗病效果最高可达82.47%,且浓度与活性间存在正相关趋势;在非亲和品系中,热解物处理引起HR反应。HDS处理后,水稻过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活力明显升高。  相似文献   

植物诱导抗病性研究的现状与展望   总被引：3，自引：0，他引：3  

李洪连  王守正  袁红霞  王振跃  梁金兰 《河南农业大学学报》1994,(4)

本文综述了国内外植物诱导抗病性研究的成果，重点评述了植物诱导抗病性的特性、诱导因子和诱抗机制等方面的进展状况，并对植物诱导抗病性研究的前景及应用问题阐明了自己的观点。  相似文献   

苯丙噻重氮(BTH)诱导黄瓜幼苗抗黑星病的研究   总被引：3，自引：1，他引：3  

张茹琴  王生荣  胡彦江 《甘肃农业大学学报》2002,37(1):21-25,30

通过 ０．１２５～２ μｇ／ｍＬ ＢＴＨ对黑星菌孢子萌发率及菌丝生长速率影响的测试，证明 ＢＴＨ对黑星菌孢子萌发及菌丝生长均无直接抑制作用，采用 ０．１２５～２ ｆｉｇ／ｍＬ ＢＴＨ喷洒黄瓜幼苗后均可诱导黄瓜对黑星病产生一定程度的抗性，其中 ＩＰｇ／ｍＬ ＢＴＨ处理长春密刺、津研７号、津春３号后，平均诱导效果分别为 ９１．１７％、８０．９４％、９７．０７％。１μｇ／ｍＬ　ＢＴＨ诱导黄瓜幼苗抗黑星病的效果显著高于 ０．１％水杨酸、０．１％苯酚、０．１％氯化钾。ＢＴＨ处理后，对长春密刺的平均诱导效果可达８３．９０％，而水杨酸、苯酚、氯化钾对其诱导效果分别为１７．１７％、３２．４２％、３３．２４％。  相似文献   

Induced Resistance by the Toxin Filtrate of Bipolaris maydis Race T Cultivation   总被引：8，自引：0，他引：8  

MA Chun-hong  ZHAI Cai-xia  WANG Li-an  CHEN Xia  LI Yun-chao  GUO Xiu-lin  CUI Si-ping  LI Guang-min 《中国农业科学(英文版)》2006,5(9):678-684

Resistance to maize southern leaf spot disease was induced by the low-concentration filtrate of Bipolaris maydis race T cultivation in an experiment. The nuclear neterogeny corn C103 was used as the test material. The lesion area on the leaves was significant difference by connalysis. The lesion areas on pretreated leaves were (0.3 ± 0.05)- (0.9 ± 0.5) mm2, but those on the control were (23.1 ± 8.7) mm2. At the same time, the changes in peroxidase, phenylalanine, ammonialyase, and malondialdehvde activities were determined. During 0-96 h of inspection, phenylalanine and ammonialyase (PAL) activities increased by 64.2%, peroxidase (POD) activities increased by 41.2%, but the malondialdenvde (MDA) content decreased by 29.7% compared with the control. It seems that the low-concentration filtrate of Bipolaris maydis race T cultivation itself can be used as an elicitor to enhance the induced resistance.  相似文献   

用非致病菌诱导黄瓜抗炭疽病的研究     

袁红霞  王守正 《河南农业大学学报》1994,28(1):8-11

从１０种分离自不同寄主植物上的真菌中，筛选出对炭疽病具有较好诱抗效果的６号菌种，该菌能侵染黄瓜但不表现症状。在ＰＤＡ平板上，该菌对黄瓜炭疽病菌无拮抗作用。在黄瓜第１片真叶展开时，用为１０００×１０＾７／Ｌ的６号孢子悬浮液喷雾诱导接种，３ｄ后产生诱导抗病性，７ｄ后诱导抗病性增强，相对防病效果达６４．７％，１５ｄ后诱导抗病性减弱，用２次诱导处理可提高诱抗效果并延长其保持的时间。  相似文献   

利用弱致病菌株诱导黄瓜抗枯萎病研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

吴营昌  王守正 《河南农业大学学报》1991,25(4):433-437

利用从黄瓜枯萎病病株上分离到的尖孢镰刀菌的弱致病菌株（F01、F02）的10^7/ml孢子悬浮液注射接种到黄瓜4叶期的幼苗上，间隔一定时期后，再注射接种强致病菌株（F03），可诱导黄瓜对枯萎病产生抗性。诱导接种后间隔期为5d的防效可达63%-92%，间隔期为10d的防效可达69%-100%，随着时间延长，防效下降。本文还对其它接种方法诱导黄瓜抗枯萎病做了初步的探讨。  相似文献