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研究从丁内酯-I(BL-I)的浓度筛选、作用时间以及作用解除后的成熟培养时间等方面分别进行了试验,以观察其对绵羊卵母细胞核成熟的抑制程度以及对卵母细胞体外成熟及发育能力的影响。结果表明:150μmol/L的BL-I能将62.9%的卵母细胞抑制在GV期。BL-I抑制8、16 h和24 h后绵羊卵母细胞停滞在GV期的比率差异不显著(P>0.05);抑制24 h时卵裂率和囊胚率低于对照组,16 h的囊胚率也低于对照组,抑制8 h的卵裂率和囊胚率与对照组差异不显著(P>0.05)。去除抑制后卵母细胞的成熟能力不受影响。由此可得出,丁内酯-I能可逆性抑制绵羊卵母细胞的核成熟,但未能提高其发育潜力。 相似文献
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奶牛子宫内膜炎引起的母牛不孕,已成为制约我国养牛业发展的瓶颈。子宫内膜炎主要是由子宫内病原微生物感染所引起。为了了解北京地区患临床型子宫内膜炎母牛子宫内容物中的病原菌种类及其比例,此研究选取北京周边地区子宫内膜炎患病奶牛,对其子宫内容物中含有的细菌进行分离鉴定和药物敏感性试验。从77头临床型子宫内膜炎患病牛的子宫内容物中,共分离出13种共145株细菌,以蜡样芽孢杆菌、奥斯陆莫拉菌、大肠埃希菌、链球菌、苏云金芽孢杆菌、产吲哚金黄杆菌以及产碱假单胞菌为主,且均有一定程度的致病性和不同程度的耐药性,提示这些细菌可能会转变为致病菌,引起母牛发生子宫内膜炎。药敏试验结果表明,此次试验中分离得到的13种细菌均对环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考较为敏感,可以考虑作为牛场治疗奶牛子宫内膜炎的首选药物。 相似文献
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为了研究不同培养时间对家猫卵母细胞核成熟的影响,以M 199为基础培养液,并添加FSH、LH,分别培养24、28、32、36和43 h后,观察第一极体排出,然后用地衣红染色,将排出第一极体和染色体处于MⅡ期作为卵母细胞成熟的参考判断标志。结果表明,家猫卵母细胞随着培养时间的延长其成熟率也随之增加。成熟培养43 h,极体排出率极显著高于其他各组（P<0.01）,达到66.89%;而24 h组极体排出率为31.51%,极显著低于其他各组（P<0.01）;28、32、36 h各组间差异不显著（P>0.05）。经地衣红染色后,到达MⅡ期的卵母细胞比例与极体排出率趋势相同。43 h组退化率极显著高于其他各组（P<0.01）,达到22.30%。因此,综合考虑成熟率和退化率两项指标,28～36 h为家猫卵母细胞体外核成熟的最佳培养时间。 相似文献
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冷冻家猫附睾精液效果初探 总被引：1，自引：0，他引：1
为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。 相似文献
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为了检测绵羊卵母细体外成熟前后的线粒体分布变化,将成熟过程不同阶段的卵母细胞用活体细胞线粒体跟踪试剂盒(GENMED kit)对线粒体进行染色,之后用碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)对细胞核进行染色,最后用激光共聚焦显微镜观察线粒体分布情况以及相应的细胞核所处的发育时期.结果:生发泡期(Germinal Vesicle,GV)的卵母细胞线粒体呈周边分布;生发泡破裂期(Germinal Vesicle Breakdown,GVBD)、第一次减数分裂中期(Metaphase Ⅰ,MⅠ中期)的卵母细胞呈半周边分布;第一次减数分裂末期(M Ⅰ Anaphase,MⅠ后期)的卵母细胞线粒体基本呈均匀分布,但是线粒体簇较小,着色较浅;第二次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ期)的卵母细胞线粒体呈均匀分布,而且细胞质中央的线粒体簇变大,着色变深.结论:线粒体分布随着绵羊卵母细胞体外成熟阶段的进展,由细胞周边向均匀、由疏松向致密呈波动变化,这种变化有可能作为一种判定绵羊卵母细胞胞质成熟的有效参考指标. 相似文献
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牛子宫内膜上皮细胞的体外培养及鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
旨在改良牛子宫内膜细胞原代培养方法,并鉴定其特征。分别比较了单纯组织块培养法和先组织块培养后再消化纯化的方法对牛子宫内膜细胞进行培养以及纯化。经免疫荧光染色方法对两种方法获得的牛子宫内膜上皮细胞进行角蛋白表达鉴定。研究结果表明：先组织块培养后再消化纯化的方法获得的牛子宫内膜上皮细胞形态良好,纯度较高。因此,组织块培养后再消化纯化得到的牛子宫内膜上皮细胞是一种操作简单、高效的方法,用该方法得到的细胞可以在体外传至4~5 代,此结果为牛繁殖生理及其机制模型的建立奠定基础。 相似文献
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不孕奶牛血液生理生化指标分析 总被引：2，自引：0，他引：2
为了探究奶牛不孕症的发病特点,有效防治不孕症的发生。本试验对患有久配不孕、子宫增生、子宫内膜炎、卵巢囊肿的奶牛进行血液生理生化指标测定。采用全自动血细胞分析仪和Vet Test生化分析仪对患病奶牛与健康奶牛的全血进行血液常规指标和生化指标检测。发现子宫内膜炎引起白细胞数量显著增多（P<0.05）;而红细胞数、血红蛋白含量、淋巴细胞百分数、单核细胞百分数和中性粒细胞百分数在四种病例中均无显著变化;卵巢囊肿可导致血液总蛋白量（TP）显著增加(P<0.05);丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALKP）和血糖（GLU）在各种病例中均无显著变化（P>0.05）;久配不孕、子宫内膜炎和卵巢囊肿均能显著降低血液中钙离子（Ca）浓度（P<0.05）;并且,久配不孕、子宫内膜炎和卵巢囊肿均能显著增高血液中磷离子（PHOS）浓度（P<0.05）,打破钙磷平衡;同时,在所有分组中发现,血糖浓度均低于正常标准值。由此可见,血液中钙磷平衡可以作为辅助指标预测奶牛不孕症的发生。在早期疾病诊断过程中,保持血液中钙磷比例平衡是防治奶牛不孕症发生的重要手段之一。 相似文献
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试验旨在研究程序化冷冻前后小鼠正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3蛋白的分布及转录水平的差异表达情况,为阐明哺乳动物胚胎在抗冻过程中的相关调控机制提供理论依据。试验选用ICR系雌性小鼠,从妊娠第5天小鼠子宫回收正常孵化囊胚;构建延迟着床模型获取小鼠休眠胚胎,利用激光共聚焦和实时荧光定量PCR技术对各组胚胎进行细胞免疫荧光和C3 mRNA相对表达量的检测。结果发现,程序化冷冻前后的正常孵化囊胚和休眠胚胎中C3在转录和翻译水平均有表达;正常孵化囊胚经冷冻处理后C3 mRNA相对表达量显著上调（P < 0.05）;休眠胚胎冷冻后C3 mRNA相对表达量与冷冻前相比显著下调（P < 0.05）;冷冻前休眠胚胎C3 mRNA相对表达量显著高于冷冻前正常孵化囊胚（P < 0.05）;冷冻后休眠胚胎C3 mRNA相对表达量显著低于冷冻后正常孵化囊胚（P < 0.05）。结果表明,胚胎中C3基因在转录水平的下调表达对胚胎抗冻具有一定的积极作用,C3基因很可能参与了胚胎抗冻过程的相关调控。 相似文献
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试验探讨孕酮和雌二醇对绵羊精子体外获能和顶体反应的影响。将绵羊精子分别加到含不同浓度孕酮(1、10和100μmol/L)和雌二醇(1、10、和100μmol/L)的输卵管合成液(SOF)中,作用不同时间后分别取出部分精子样本进行金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC),通过精子与CTC结合染色的不同类型来评定孕酮和雌二醇对绵羊精子的作用。结果表明:雌二醇对绵羊精子体外获能和顶体反应都没有显著的促进作用(P>0.05);一定浓度的孕酮和雌激素组合抑制绵羊精子体外获能和顶体反应的发生(P<0.05)。 相似文献