副溶血性弧菌系统性毒力基因及七个毒力岛的分析     

王芳  巢国祥  黄金林  焦新安 《动物医学进展》2010,31(Z1)

为了解不同来源的副溶血性弧菌的毒力岛与毒力基因的分布及相互关系,对来自临床和食物源的180株副溶血性弧菌分离株,检测已知的毒力因子(tdh,trh)、系统性毒力基因(toxRS/new和orf8)和7个毒力岛(VPaI-1～VPaI-7)。结果表明,共检测到108株大流行株(食源株16株,人源株92株),有6株缺乏orf8。18株tdh阳性的菌株均含有全部或部分的VPaI-7基因。大流行株均含有VPaI-1,有107株大流行株含有VPaI-5。12株临床致病株均含有VPaI-7,但缺乏VPaI-1和VPaI-5。几乎所有大流行株含有全部或部分的VPaI-2和VPaI-3基因,多数致病株和非致病株还有部分的VPaI-2和VPaI-3基因;4株trh阳性的菌株均只有VPaI-3的VP1094阅读框。VPaI-4基因只存在于大流行株菌株中。所有菌株都有全部或部分的VPaI-6基因。食物链中出现大流行克隆是导致食物中毒的主要危害因子。  相似文献   

禽源大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因的检测   总被引：1，自引：1，他引：0  

张维秋  潘渭涓  陈祥  耿士忠  黄金林  潘志明  焦新安 《动物医学进展》2010,31(Z1)

从我国部分地区病、死家禽中分离到大肠埃希菌403株。按照CLSI(clinical and laboratory standards institute)推荐的K-B药敏纸片法对其中的344株分离株进行药敏纸片试验;根据GenBank上发表的序列,设计并合成了五对引物,对所有分离细菌进行质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因的扩增:qnrA、qnrB、qnrS、aac(6′)-ib-cr和qepA。1993年-1996年禽源大肠埃希菌分离株仅对萘啶酸的耐药率超过60%;2001年-2008年禽源大肠埃希菌分离株对1-3代7种喹诺酮类药物的耐药率均超过58%。在403株禽源大肠埃希菌中共检出3(0.7%)株qnrB阳性菌株,2(0.5%)株qnrS阳性菌株,5(1.2%)株aac(6′)-ib-cr阳性菌株以及5(1.2%)株qepA阳性菌株,未检测到qnrA阳性菌株。结果显示,近20年来,我国禽源大肠埃希菌对喹诺酮类药物的耐药性不断上升,同时,质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因在禽源大肠埃希菌中呈不断上升的流行趋势。  相似文献   

C3d对减毒沙门氏菌介导的NDV DNA疫苗诱导的特异性体液免疫应答的增强作用   总被引：2，自引：0，他引：2  

潘志明  袁舟  刘蓓蓓  游猛  蔡雯婷  刘萌  焦新安 《农业生物技术学报》2009,17(5):745-749

采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F扩增出新城疫病毒F48E8株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入含有3 拷贝C3d 编码基因的pTR-C3d3质粒中,获得重组质粒pTR-F-C3d3。将F-C3d3基因片段从pTR-F-C3d3中切出,克隆入真核表达质粒pVAX1中,获得重组真核表达质粒pVAX1-F-C3d3。将pVAX1-F-C3d3转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F-C3d3)。重组菌分别以1×109 CFU的剂量两次口服免疫1日龄SPF鸡,结果显示,SL7207(pVAX1-F-C3d3)激发产生的血清抗体效价与SL7207 (pVAX1-F)免疫组之间存在显著性差异(P < 0.05)。SL7207(pVAX1-F-C3d3)免疫组的小肠黏膜抗体效价高于SL7207(pVAX1-F)免疫组,但两者间差异不显著(P > 0.05)。提示C3d可增强减毒沙门氏菌介导的NDV DNA疫苗诱导的特异性体液免疫应答水平,这为提高基于减毒沙门氏菌的NDV基因工程疫苗的免疫效果提供了新的途径。  相似文献   

沙门氏菌感染的免疫应答     

潘志明  黄金林  唐丽华  焦新安 《动物医学进展》2005,26(4):41-44

巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞等吞噬性细胞在对沙门氏菌感染的天然免疫应答过程中发挥着重要作用。在细菌感染的早期,这些细胞的数量增多,控制细菌的繁殖,并分泌产生细胞因子和趋化因子。感染沙门氏菌后,自然杀伤细胞、自然杀伤T细胞和TCRαβT细胞也会对感染发生迅速反应,且是γ干扰素的早期细胞来源。文章着重探讨了沙门氏菌感染天然免疫应答的细胞分子机理,为沙门氏菌病的预防控制提供新认识。  相似文献   

一种细胞因子检测新方法--ELISPOT技术   总被引：2，自引：0，他引：2  

张辉  潘志明  焦新安 《动物医学进展》2004,25(6):29-31

抗原特异性细胞毒T细胞在控制病毒感染和某些肿瘤中具有重要作用 ,如何准确地定量、定性抗原特异的T细胞反应及评价其作用 ,是细胞免疫学中的一项重要课题。ELISPOT技术是近年来正为众多研究者所认可的一项通过检测细胞因子 ,评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法。与其他细胞免疫学方法相比较 ,该方法特异性强、灵敏度高、能够直接检测分泌细胞因子细胞 ,而无需体外扩增。ELISPOT技术对病毒性疾病和肿瘤的发病机制以及体内细胞免疫功能的了解具有重要的意义 ,也为这些疾病的细胞免疫治疗提供了理论依据。目前 ,有研究显示该方法不仅应用于肿瘤免疫及其治疗中 ,而且在细胞内感染微生物、自身免疫性疾病发病机制、治疗等方面均有巨大的发展潜力  相似文献   

鸡白痢沙门氏菌耐药性的变化趋势   总被引：14，自引：0，他引：14  

潘志明  焦新安 《中国预防兽医学报》1999,21(4):305-307

对１９６２－１９９８年间分离保存的３２５株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明,随着时间的推移,菌株对１６种抗菌药物的耐药性呈现不同程度的上升趋势,其中对氨苄青霉素,复方磺胺,甲氧苄胺嘧啶,链霉素,四环素,壮观霉素的耐药率明显上升。  相似文献   

表达新城疫病毒融合蛋白F基因的重组减毒沙门氏菌的构建和鉴定   总被引：8，自引：0，他引：8  

倪振亚  焦新安  吴艳涛  潘志明  刘文博  文其乙  张如宽  刘秀梵 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1999,(3)

新城疫是鸡的一种烈性传染病,其病原新城疫病毒（ＮＤＶ）是副粘病毒科副粘病毒属的代表种,为一种单股负链ＲＮＡ病毒。ＮＤＶ的血凝素－神经氨酸酶（ＨＮ蛋白）和融合蛋白（Ｆ）在新城疫（ＮＤ）发病过程中起着重要作用,两者均是ＮＤＶ的保护性抗原,因此ＨＮ基因和Ｆ基因常被用作研制ＮＤ基因工程疫苗的目的基因。近年来减毒沙门氏菌作为外源抗原载体,已成为新型疫苗研制的重要途径之一。由于减毒沙门氏菌仍具有侵袭性,通过其粘附、侵袭、定居肠相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）,并经肠系膜淋巴结到达肝、脾,有效地刺激机体产生局部粘膜免…  相似文献   

肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因快速克隆和鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

焦新安  倪振亚 《江苏农业研究》1998,19(3):43-47

以提纯的肠炎沙门氏菌染色体ＤＮＡ为材料,在一对含有ＣＵＡＣＵＡＣＵＡＣＵＡ的特殊引物引导下,应用ＰＣＲ扩增出鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ．ｍ,允１．８ｋｂ左右大小,然后以ＵＤＧ法快速克隆到质粒,ｐＡＭＰ１０中,转化第１宿主大肠杆菌ＴＧ１或大肠杆菌ＤＨ５ａ,在氨苄青霉素平板上筛选转化子,小量制备重组质粒ＤＮＡ,再转入第２宿主大肠杆菌ＬＣ－２ａ（ｈａｇ－,ｒｅｃＡ－）,所有转化子均出现动力。其中的一个克隆ｐ  相似文献   

肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因快速克隆和鉴定     

焦新安  倪振亚  张如宽  刘秀梵 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1998,(3)

以提纯的肠炎沙门氏菌染色体ＤＮＡ为材料,在一对含有ＣＵＡＣＵＡＣＵＡＣＵＡ的特殊引物引导下,应用ＰＣＲ扩增出鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ,ｍ,约１．８ｋｂ左右大小,然后以ＵＤＧ法快速克隆到质粒ｐＡＭＰ１０中,转化第１宿主大肠杆菌ＴＧ１或大肠杆菌ＤＨ５α,在氨苄青霉素平板上筛选转化子,小量制备重组质粒ＤＮＡ,再转入第２宿主大肠杆菌ＬＣ－２ａ（ｈａｇ－,ｒｅｃＡ－）,所有转化子均出现动力。其中的一个克隆ｐＡＭＰ·ＧＭ经动力和动力抑制试验、血清学试验、鞭毛电镜观察及部分序列测定,均证实ｐＡＭＰ·ＧＭ中载有肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白基因ｆｌｉＣｇ,ｍ。ｆｉｌＣｇ,ｍ克隆成功为寻求肠炎沙门氏菌防制新方法奠定了基础,研究中建立的快速克隆策略为广泛、深入地开展ｆｌｉＣ研究提供了便捷的新途径。  相似文献   

李斯特氏菌属特异单抗试剂的研制与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

焦新安  刘秀梵  张如宽 《中国预防兽医学报》1994,(6)

以单核细胞增生．症李斯特氏菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ．Ｌ．Ｍ．）制备免疫原，应用常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ试验筛选，得到６株分泌特异性单抗的细胞系，分别命名为Ｃ１１、Ｂ１８、Ｂ５、Ｂ６、Ｄ２、Ｃ５单抗与标准菌株反应结果显示，Ｃ１１、Ｂ１８、Ｂ５三株单抗能与全部２４株李斯特氏菌发生反应，所试菌株中包括ＬＭ．１４株，以及无害李斯特氏菌（Ｌ．ｉｎｎｏｃｕａ）、伊凡诺夫李斯特氏菌（Ｌ．ｉｖａｎｏｖｉｉ）、西里杰氏李斯特氏菌（Ｌ．ｓｅｅｌｉｇｅｒｉ）、威斯福尔氏李斯特氏菌（Ｌ．ｗｅｌｓｈｉｍｅｒｉ）和格氏李斯特氏菌（Ｌ．ｇｒａｙｉ）各２株．但这三株单抗均不与其他细菌发生反应．表现出它们的高度属特异性，说明它们所识别的抗原决定簇分布于整个菌属内。另三株单抗的反应谱不尽相同。由此可见，这组单抗为李斯持氏菌检验提供了优良候选试剂，同时．上述单抗在该菌的共同抗原和免疫保护的研究方面具有重要意义。  相似文献