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81.
减毒沙门氏菌介导H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究 总被引：1，自引：0，他引：1
构建获得含有H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组真核表达质粒pCAGGS-HA。重组质粒电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,获得重组沙门氏菌SL7207(pCAGGS-HA)。重组菌SL7207(pCAGGS-HA)以5×109cfu的剂量2次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡后,再以油乳剂灭活疫苗加强免疫1次,并设立重组菌单独免疫组、灭活苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。联合免疫组和重组菌单独免疫组的小肠黏膜抗体效价与其他组之间存在显著差异(P<0.05),且两组的攻毒免疫保护水平与空载体组之间差异显著(P<0.05),其中联合免疫组的免疫保护率最高,达100%,而灭活苗免疫组保护率为80%,表明减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用具有良好的免疫协同作用。 相似文献
82.
应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白 (GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。用EcoRⅠ和NcoⅠ将pEGFP质粒中的绿色荧光蛋白基因EGFP切下 ,克隆进表达载体质粒pYA3334的EcoRⅠ和NcoⅠ位点之间 ,构建成重组表达质粒pYAGFP ,然后转化大肠杆菌X6 2 12、中间宿主X3730、终末宿主X45 5 0。X45 5 0于LB培养基上呈绿色 ,在荧光显微镜下观察 ,整个菌体发绿色荧光。构建的表达GFP的重组鼠伤寒沙门氏菌为减毒沙门氏菌活载体基因工程疫苗的研制提供一个良好模型。 相似文献
83.
为表达麻鸭白介素17(duIL-17),本研究提取ConA刺激的麻鸭脾脏淋巴细胞总RNA,RT-PCR扩增duIL-17基因片段,将该片段插入克隆载体pCR2.1中构建重组质粒pCR2.1-duIL17.将duIL-17基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-duIL17,将其转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达.测序结果显示,duIL-17与参考序列(EU366165.1)相比较第174位碱基由C突变为T,并且为沉默突变.SDS-PAGE和western blot分析显示,诱导表达的重组蛋白GST-duIL17主要以包涵体形式存在,分子量大小约为45 ku,duIL-17与抗鸡IL-17抗体具有良好反应性.本研究为制备duIL-17单克隆抗体提供了实验依据. 相似文献
84.
李斯特氏菌属特异单抗试剂的研制与鉴定 总被引：4，自引：1，他引：3
以单核细胞增生症李斯特氏菌制备免疫原，应用常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ试验筛选，得到６株分泌特异性单抗的细胞系，分别命名为Ｃ１１、Ｂ１８、Ｂ５、Ｂ６、Ｄ２、Ｃ５。单抗与标准菌株反应结果显示，Ｃ１１、Ｂ１８、Ｂ５三株单抗能与全部２４株李斯特氏菌发生反应，所试菌株中包括Ｌ．Ｍ．１４株，以及无害李斯特氏菌、伊凡诺夫李斯特氏菌、西里杰氏李斯特氏菌、威斯福尔氏李斯特氏菌和格氏李斯特氏菌 相似文献
85.
对1962～1990年间分离保存的124株鸡沙门氏菌药物敏感性进行了分析。随着时间的推移,这些菌株对14种抗菌药物的敏感性呈现不同程度的下降趋势,以30、90年代的菌株变化明显,且产生了多重耐药现象。试验表明,氟(口派)酸类、庆大霉素、氯霉素、羧苄青霉素、卡那霉素仍属敏感药物,但80、90年代菌株的抑菌圈较之60、70年代的缩小了。 相似文献
86.
应用针对沙门氏菌 O_9抗原的单抗3-47-26酶结合物和鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种单抗竞争 ELISA试验,以检测鸡白痢抗体.试验结果表明,79份鸡白痢阳性血清具有显著抑制作用,而130份鸡白痢阴性血清以及48份 SPF 鸡血清抑制不明显.对94份种鸡血清的检疫结果表明,单抗竞争 ELISA 比 PAT、AGPD、PHA 特异性好、敏感性高,文中进一步讨论了该法的应用前景. 相似文献
87.
88.
应用宜兴赛尔生物化工厂产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基与美国Ｓｉｇｍａ公司产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基分别配制细胞培养液，培养ＳＰ２／０和Ｖｅｒｏ细胞系及原代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），做细胞培养动力学比较试验。比较这两种来源的细胞培养基对细胞生长的形态、分裂速度及鸡马立克氏病毒（Ｍａｒｅｋ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ．ＭＤＶ）疫苗毒株ＨＶＴ－ＦＣ１２６和ＲｉｓｐｅｎｓＣＶＩ９８８在ＣＥＦ单层上增殖量的差异。研究结果表明，四种国产细胞培养基与对应的四种进口培养基对细胞生长及病毒增殖的影响无显著差异 相似文献
89.
1．中国的养殖规模应适度加大：从我国目前形势来看，小规模养殖占比重较高。在未来发展方向来看，中国养殖规模应该适度加大。从畜牧业本身发展考虑，一家一户的养殖模式，太分散，疫病控制较难，参与国际竞争的能力较弱，同时也不利于畜牧业品牌的树立。 相似文献
90.
河豚毒素两种定量检测方法的比较研究 总被引：5，自引：0，他引：5
应用小鼠生物试验和间接竞争抑制酶联免疫吸附试验(ELISA)同步检测17份河豚鱼肝组织和20份河豚鱼肌肉组织中的河豚毒素含量，并对2种方法进行比较。结果表明：ELISA法与小鼠生物试验测得的结果相符合。ELISA法由于其测定程序简便易行，速度快，灵敏度高，在河豚毒素的定量检测以及在预防河豚鱼中毒方面具有广泛的应用前景。 相似文献