重庆地区茶叶农药残留风险研究     

曾婷婷  张伟  付婷婷  余鸿燕  褚能明  黄永川  王娜 《南方农业》2019,(1)

开展重庆茶叶农药残留风险研究,为茶叶消费、茶叶质量安全监控提供科学依据。对重庆巴南、永川、万州等茶叶主产区县进行茶树病虫害防控调查及茶叶农药残留检测,采用危害商进行茶叶农药残留安全性风险评估。结果初步显示,55个绿茶样品中未发现超标样品,农药残留量超过检出限的有35个样品,检出率为63.6%;对重庆茶叶农药残留危害商按0.95分位值进行评估,风险极低。农药残留检出率最高的三种农药依次是唑虫酰胺、噻嗪酮、啶虫脒,应重点关注。  相似文献   

1起火鸡禽霍乱的诊治     

廖素环  韦天超  蹇慧  施李鸣  林广津  曾婷婷  廖忠体 《养禽与禽病防治》2011,(8):36-37

禽霍乱是由禽多杀性巴氏杆菌引起的家禽及野生禽类的一种接触性传染病。2010年9月广西百色市某火鸡养殖场发生了以4月龄以上成年肉火鸡和种火鸡为主的传染病,死亡率达20％。经解剖观察、病原分离培养和鉴定,结合火鸡群发病的临床症状和流行情况等综合诊断,诊断为禽霍乱。根据发病火鸡群的流行情况和分离茵的药敏试验结果,采取了有效的治疗和预防控制措施,取得了较好的防治效果。  相似文献   

禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立     

张艳芳  谢芝勋  邓显文  谢志勤  张民秀  罗思思  谢丽基  范晴  曾婷婷  黄娇玲  刘加波 《中国动物检疫》2019,36(12):58-62

为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法。该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染。  相似文献   

牛支原体和牛病毒性腹泻病毒二重二温式PCR检测方法的建立     

谢志勤  范晴  谢芝勋  张民秀  谢丽基  黄娇玲  张艳芳  曾婷婷  王盛  罗思思  邓显文  李孟  李丹  刘加波 《中国动物检疫》2019,36(1):70-75

为建立一种牛支原体(Mycoplasma bovis,MB)和牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的快速鉴别诊断方法,针对MB的uvr C基因和BVDV的5'端非编码区(5'-UTR)保守基因序列,分别设计两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为二个温度梯度,建立了鉴别MB和BVDV的二重二温式PCR方法。该方法能同时扩增MB和BVDV,扩增产物大小分别为412和170 bp。特异性试验结果显示,该方法对参试的所有毒株只扩增MB和BVDV基因组,对其它牛病原体无扩增;敏感性试验结果显示,该方法最低能同时检测到104拷贝的两种目的核酸;干扰性试验结果显示,该方法能同时检测两个模板不同浓度的组合,试验结果不受模板影响。综上,本研究所建立的二重二温式PCR方法特异、敏感、快速、简便,可应用于MB和BVDV临床鉴别诊断和流行病学调查。  相似文献   

禽呼肠病毒在鸡胚成纤维细胞系中的增殖规律     

沈文康  谢芝勋  王盛  黄莉  谢丽基  黄娇玲  曾婷婷  张艳芳  张民秀  罗思思  范晴  谢志勤  邓显文 《动物医学进展》2018,(1)

为研究禽呼肠病毒(ARV)在鸡胚成纤维细胞(DF1)上的增殖规律,将ARV S1133株接种至DF1细胞,连续传代3次后观察细胞病变(CPE),RT-PCR检测病毒核酸。结果显示,ARV S1133株对DF1细胞有很好的亲嗜性,并出现典型的CPE。按照Reed-Meunch方法测量7个时间点的TCID50,并绘制生长曲线。结果显示,ARV感染DF1细胞后的0h~12h为静止期,12h~48h为快速增长期,并在48h达到最大的病毒效价,TCID_(50)为10~(-8.9)/0.1mL,为进一步研究ARV的致病机理,以及在DF1上研制禽呼肠病毒细胞灭活苗提供参考。  相似文献   

鸡滑液囊支原体和禽呼肠病毒的实时荧光定量PCR快速检测     

黄莉  谢芝勋  王盛  邓显文  谢志勤  谢丽基  曾婷婷  黄娇玲  张艳芳 《动物医学进展》2018,(2)

根据禽呼肠病毒σC和鸡滑液囊支原体vlhA基因的保守序列,分别设计了特异性引物和不同荧光基团标记的TaqMan探针,优化反应条件,建立能同时鉴别诊断鸡滑液囊支原体和禽呼肠病毒(ARV)的检测方法。结果表明,该方法能够特异地鉴别检测ARV和MS,与其他病原体无交叉反应,检测敏感性均可达到2×10拷贝数。此外,该方法抗干扰能力强,具有良好而稳定的准确性,临床样品检出率与传统检测方法相符。因此,该基于TaqMan探针建立的荧光定量PCR具有特异、灵敏、准确、实时、重复性好等优点,不仅可用于鸡群中这两种病原体的鉴别检测和疫病监测,也有利于这两种病原体感染的有效防控。  相似文献   

禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立     

徐倩  谢芝勋  谢丽基  罗思思  黄莉  黄娇玲  曾婷婷  谢志勤  邓显文 《中国畜牧兽医》2014,41(11):58-62

为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313 bp (HA基因)、451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667 bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10^-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。  相似文献   

鸡细小病毒半巢式PCR检测方法的建立及初步应用     

奉彬  谢芝勋  张艳芳  黄娇玲  王盛  范晴  黄莉  谢丽基  曾婷婷  罗思思  邓显文  谢志勤  刘加波  宋中宝  林二克 《中国畜牧兽医》2017,44(5):1295-1301

为建立一种快速、特异、灵敏的检测鸡细小病毒（chicken parvovirus,ChPV）的方法,根据ChPV的保守基因NS1设计了3条特异性引物,建立并优化了能快速检测ChPV的半巢式PCR方法,对其进行特异性和敏感性试验,并用所建立的方法对48份临床样品进行了检测。特异性和敏感性试验结果显示,建立的半巢式PCR只对ChPV敏感,扩增产物为186 bp的特异性条带;其最低能检测到5.62 fg/μL的ChPV DNA;而对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒不敏感。临床检测结果显示,同时对48份临床样品进行检测,检出率为16.67%（8/48）,提示广西区内鸡群存在ChPV感染。本研究建立的ChPV半巢式PCR方法适用于ChPV的临床检测。  相似文献   

过去十年影响世界家禽业的11件大事     

曾婷婷  韦平 《广西畜牧兽医》2010,26(2):95-95

现在非常流行制作年度或十年重要事件回顾,国际资深编辑Chris Wright认为二十一世纪头十年影响世界家禽业最重要的11件大事及技术革新是：  相似文献   

禽呼肠孤病毒σB和σC蛋白在昆虫细胞中的共表达     

王盛  谢芝勋  沈文康  谢丽基  范晴  罗思思  张艳芳  曾婷婷  黄娇玲  张民秀  谢志勤  邓显文 《中国畜牧兽医》2020,47(5):1334-1341

本研究旨在获得具有天然构象和活性良好的禽呼肠孤病毒（ARV）σB和σC蛋白,采用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中共表达σB和σC蛋白,并对其活性进行鉴定。根据NCBI数据库中ARV σB和σC基因序列设计引物,将两个基因克隆至pFast-Dual载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,筛选获得重组穿梭杆粒。通过转染sf9细胞,筛选到含有σB和σC基因的重组病毒。将重组病毒感染sf9细胞,通过优化接毒量和收获时间等参数,确定最佳表达条件,在sf9细胞中高效共表达σB和σC蛋白。Western blotting和间接免疫荧光（IFA）检测结果表明,成功在sf9细胞中共表达了ARV σB和σC蛋白,并具有很好的生物学活性。本试验结果为开发鉴别诊断试剂以及ARV颗粒疫苗的研究奠定了基础。  相似文献