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1.
为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)美洲经典株国家核酸标准物质,将美洲经典株代表PRRSV VR2332接种Marc145细胞,出现细胞病变后,反复冻融并收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、数字PCR法定值和临床试用。结果表明制备的标准物质的定值为(2. 06±0. 31)×104copies/μL;样品均匀;-20℃稳定保存12个月以上、4℃稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会评审,该制备物达到了国家二级标准物质的要求,可以作为核酸扩增检测的PRRSV美洲经典株核酸标准物质。 相似文献
2.
为建立一种简便、快速、特异的猪伪狂犬病毒(PRV)gB抗原检测方法,利用单克隆抗体技术和侧向层析(LFA)技术,采用柠檬酸三钠还原法,制备颗粒大小为31.5 nm胶体金,再用胶体金标记纯化的抗PRV gB单克隆抗体10D4,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处,分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体6E9,组装成LFA方法通用胶体金层析试纸条。经测试,该试纸条最低能检测出1:640倍稀释的,TCID_(50)为1×10~(8.6)/0.1 mL的灭活PRV抗原,并与古典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)均无交叉反应,特异性良好;室温干燥密闭的条件下,该试纸条至少可保存10个月。结果表明,本研究建立的试纸条方法操作简单、快速、敏感、特异,易于判定,适合基层PRV的大面积普查和现场检测。 相似文献
3.
为了探索适宜于北京春茬露地生菜的灌溉方式,以生菜品种"雷达"为研究对象,设置3个灌溉处理,以常规灌溉为对照,研究不同灌溉方式对生菜生长、品质和产量的影响。结果表明:常规灌溉处理的株高和叶片数显著低于微喷带和边缝式滴灌带处理;边缝式滴灌带处理的单方水产出最高,且其植株硝酸盐显著低于微喷带处理,维生素C含量要显著高于微喷带处理和常规灌溉处理,果实营养价值和安全性相对较高。综合考虑植株生长、品质、产量和单方水产出率等要素,边缝式滴灌带相对适宜春茬露地生菜的生产,其产量667m~2达到了2 797kg,单方水产出率达到31.3kg·m~(-3),单方水产出率比微喷带处理和常规处理分别高20.8%和233.0%。试验还得出了春茬露地生菜各生育时期的作物系数,能够为实现春茬露地生菜的高效生产提供一定的参考依据。 相似文献
5.
近年来,随着养猪规模化程度的提高及一些免疫抑制病的影响,猪病感染多呈混合感染,其流行症状和病变多呈非典型的趋势,流行势态日趋复杂和多样化,因此单凭临床诊断已经非常困难。鉴于以上原因,河南省动物疫病预防控制中心在进行猪病诊断时除进行常规的流行病学调查、临床症状、病理剖检诊断外,还着重加强了猪病的病原学PCR快速诊断。猪病病原学PCR诊断数据对于复杂猪病的快速确诊、流行规律与趋势、疫苗防疫效果分析等起到了重要作用。现根据本中心2006年全年猪病病原学和血清学检测及临床常规诊断结果对2006年猪病的发病特点、病因及防控… 相似文献
6.
为了构建珍珠鸡MHCⅠ轻链β2m成熟肽基因的原核表达载体并在大肠杆菌中实现可溶性的表达,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法从鸡脾脏中提取总RNA,以总RNA为模板,5’-ATC TAG AGG TAC CGG ATC C-(T)15-3’为反转录引物,采用T aK aR a AM V反转录酶合成F irst-strand cDNA(fcDNA)。根据G enB ank中登录的鸡的β2m基因序列,设计了分别含E coRⅠ和H indⅢ酶切位点的一对引物,分别扩增鸡β2m的成熟肽基因。PCR产物经纯化回收后,插入到含L acZ基因的原核克隆载体pGEM-T E asy中,转化至大肠杆菌JM 109感受态细胞,经E coRⅠ和H indⅢ双酶切及PCR鉴定,筛选出阳性克隆。再把所克隆的片断亚克隆到表达载体pM AL-p2X,构建重组表达质粒p2Xβ-2m。将重组表达质粒转化入大肠杆菌E.coli TB 1感受态细胞,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明,本研究克隆了鸡β2m成熟肽基因序列,全长约297bp,编码约98个氨基酸,并可溶性表达了鸡β2m成熟肽蛋白质分子。采用淀粉树脂柱亲和层析和DEAE凝胶过滤方法对表达产物进行了纯化,并对纯化的表达产物进行了W estern b lot鉴定。本研究为进一步利用BF 2的胞外区在体外共同构建MHCⅠ类分子结合筛选抗原表位肽平台奠定了基础。 相似文献
7.
禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究 总被引：2，自引：2，他引：2
应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。 相似文献
8.
鹦鹉大肠杆菌、链球菌混合感染的诊治 总被引：2，自引：0，他引：2
2003年12月初,河南某市一家鹦鹉场的小鹦鹉突然发病,出现以精神不好、拉稀、体温升高、站立不起、死亡较快等为主要特征的传染病,经发病情况调查、剖检、实验室诊断等,最后确诊为大肠杆菌、链球菌混合感染。1发病情况调查该户2001年3月份从山东某场引进虎皮鹦鹉700对,雌雄配对入笼,每笼一对精心饲喂,现已扩大到2000对,并孵育雏鸟上千只,取得了较好的经济效益。今年11月下旬,该场5～10日龄的小鹦鹉突然出现死亡,数量较多,紧接着个别大鹦鹉也开始出现症状,主要是精神不好,体温升高,拉稀,站立不起,眼睛肿胀,个别小鸟有神经症状。急性病例从发病… 相似文献
9.
铝胁迫对西瓜幼苗生长及生理特性的影响 总被引：2，自引：1，他引：1
以超甜地雷王(DL)、早佳84-24(ZJ)、早蜜王(ZM)、早春红玉(HY)4个西瓜品种为供试材料,研究了不同浓度铝(0、250、500、1000、1500μmol·L-1)处理对西瓜幼苗生长及生理特性的影响。结果表明,铝处理使ZM根长、根系活力及干重下降最为明显,对HY影响不显著或有一定促进作用,ZJ、DL所受影响介于二者之间,HY耐铝性较强,ZM对铝敏感。进一步分析比较铝处理下耐铝性差异较大的两个西瓜品种ZM和HY生理特性的变化可知:铝处理均可使ZM、HY两个西瓜品种叶片质膜透性增大,丙二醛含量增加,其中HY在Al3+≤1000μmol·L-1处理下随处理时间的延长膜系统伤害可以得到一定程度的恢复,MDA含量有所下降;HY叶片Pro含量和SOD、POD酶活性均增加,在高浓度、长时间的铝处理下此三指标的变化均优于ZM;CAT活性变化均较小。由试验结果可以看出,ZM和HY对铝胁迫的生理反应存在一定的差异性,HY内部响应铝胁迫的生理机制较ZM更加完善,其中Pro含量及SOD、POD活性与西瓜耐铝能力关系密切。 相似文献
10.
1发病情况2003年8月中旬 ,河南省某县一个体养牛户从外地引进14头奶牛 ,其中2头为当年小牛 ,4头黑白花奶牛 ,8头夏洛来奶牛 ,平均年龄在3～4岁左右 ,买来时经临床检疫 ,健康无病。后又从本县某农场购进1头奶牛 ,第二天突然死亡。紧接着先前购进的14头奶牛也突然发病 ,出现呼吸急促 ,食欲废绝 ,体温升高 ,口吐白沫等症状。因发病突然 ,怀疑为鼠药中毒 ,先后用解毒一针消25000mL ,5 %糖盐水1000mL ,10%糖水1500mL ,安纳加2支 ,胃洗液10支 (10mL/支 )等注射 ,并用芒硝500～700g/头灌服 ,均不见效。1小时后 ,2头小牛先死亡 ,接着其它牛也陆续… 相似文献