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应用cDNA微阵列芯片技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用cDNA微阵列芯片技术,从所构建的猪蛔虫雌、雄成虫cDNA消减文库分别挑取1044和1119个克隆,PCR扩增其插入片段,经纯化后点样于预先处理好的基片上(双点杂交),制备成cDNA微阵列芯片。将分别标记荧光素Cy3-dUTP和Cy5-dUTP的雌虫和雄虫cDNA探针,与制备好的cDNA芯片杂交(平行进行反标杂交试验)。根据每个点杂交后的Ratio值,筛选出双点杂交和正反标中都同时具有表达差异的基因克隆共1559个。将表达差异最明显的前831个克隆进行测序,获得720个有效序列,经生物信息学分析发现,雄虫特异表达的主要精于蛋白和雌虫特异表达的卵巢信息蛋白的基因序列多数与新杆属线虫存在同源性,有31个可能是新的ESTs。性别差异表达基因及其相关生物信息的获得为下一步研究基因功能奠定了基础。 相似文献
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为筛选与线虫感染性相关的基因,本研究以猪蛔虫为对象,构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库,为研究线虫期特异性发育的分子机制奠定基础。分别提取感染期幼虫和其它各期幼虫及成虫的总RNA,纯化mRNA后,采用Clontech公司PCR-selectTM试剂盒进行反转录合成cDNA并进行抑制消减杂交(SSH),构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库,并采用Southern斑点杂交进行消减效率的检测。随机从文库中抽取45个克隆进行测序及在线BLAST分析。试验结果表明,感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库具有较强的特异性;在得到的41个表达序列标签(ESTs)中,有40个ESTs与已报道的基因有较高的相似性,主要代表猪蛔虫第三期幼虫基因和成虫头部基因,有1个cDNA片段可能代表新基因。猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究幼虫发育差异表达基因的功能奠定了基础。 相似文献
3.
首次报道了国内圈养斑纹角马肝片吸虫病确诊病例。诊断依据:(1)提示性临床症状:贫、消瘦、营养不良;(2)尸体剖检特征性病理变化:胆管显著扩张和胆管内挤排出大量肝片吸虫成虫的虫体;(3)肝片吸虫感染强度测定:运用麦克马斯特法测定了病死角马肝片吸虫感染强度为1 600个/g;(4)中间宿主调查:角马的饲养区内发现大量椎实螺,椎实螺体内含有大量的肝片吸虫尾蚴;(5)组织病理学检查:细支气管和肺泡腔内见有童虫的虫体结构。首次证实了角马肝片吸虫感染时,童虫在移行过程中可误移至肺,导致肺的病理变化。该病的发生与环境潮湿多水、环境中存在大量椎实螺而未被重视有关。肝片吸虫宿主范围广,应重视易感动物的生活环境,定期粪检确定感染率和感染强度,以及选择有效的药物防治,这是科学预防该病的关键。 相似文献
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竹螟林间防治技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过不同药剂不同施药方法对竹螟进行林间防治,得出用40%氧化乐果乳油或5%锐动特悬浮剂或8%绿色威雷微胶囊水悬剂喷雾或向竹杆基部注入40%氧化乐果乳油或40%久效磷可溶性浓剂,防治效果均达70%以上。在毛竹根区埋施3%呋喃丹颗粒剂防治效果最高,但防治成本较高。利用白僵菌喷雾、打粉炮对竹螟有一定的防治效果,能增加林间带茵量达到可持续控制的目的。 相似文献
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教师是教育发展的第一资源。针对目前高职院校普遍存在的"双师型"师资数量不足问题,根据2019年新出台的《国家职业教育改革实施方案》对"双师型"师资提出了明确的界定:即"同时具备理论教学和实践教学能力的教师",以福建林业职业技术学院为例,基于现代林业职教集团的"双师型"师资队伍培养模式构建与实践,探索以现代林业职教集团为纽带,从学校和行业企业两个层面,分别构筑课堂教学、研修访学、校内实训基地、校企合作产教融合、社会服务等五大平台,通过校内与校外、理论与实践等多管齐下、多措并举,有效促进教师的理论教学能力和实践教学能力提升,为推进"双师型"师资队伍培养探索贡献智慧和方案。 相似文献
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波纹杂毛虫(Cyclophragma undans)在闽北地区1 a发生2代,以3~4龄的幼虫在树干基部杂草中、枯枝落叶层下越冬,翌年3月下旬至4月上旬越冬幼虫开始出蛰活动取食。幼虫老熟后,下树到地面的枯枝落叶层下、杂草丛中以及土缝中结茧化蛹。雌雄成虫一生仅交尾一次。成虫具有强趋光性,卵主要是产于马尾松的中、下部二年生枝条松针上,卵呈卵块或念珠状,少数散生。第二代幼虫于7月上旬开始危害。波纹杂毛虫多发生在海拔300~500 m丘陵地的向阳山坡、立地条件较差的林地。 相似文献
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为研究肠炎沙门菌异柠檬酸脱氢酶(IDH)的功能,本研究利用λ-Red重组技术构建了肠炎沙门菌IDH编码基因icdA缺失突变株c50336ΔicdA,对其进行生长和生化特性检测,并通过体外模拟应激试验、药敏试验、生物被膜检测、抗蛋清杀伤、胞内存活和动物感染实验,分析icdA基因在肠炎沙门菌致病机制中的重要作用。研究结果显示,icdA基因缺失不影响肠炎沙门菌的生长特性和生化特性,在热应激(42℃)、酸应激(pH3.5)和高渗应激(NaCl2.4mol/L)条件下其存活率也未出现显著变化,但icdA基因缺失能够显著降低肠炎沙门菌对碱、低渗透压和过氧化氢应激的抵御能力,降低肠炎沙门菌对多粘菌素B的耐药性和生物被膜的形成能力;同时,该基因缺失能够降低肠炎沙门菌对蛋清杀伤的防御能力、在巨噬细胞内的存活能力和其对小鼠的毒力。研究结果表明icdA基因参与肠炎沙门菌的抗应激能力、耐药性、生物被膜形成和抗蛋清杀伤能力,从而影响细菌的毒力。本研究为肠炎沙门菌疫苗的研究奠定了重要基础。 相似文献
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为了比较国内弓形虫抗体检测试剂盒的质量差异,购买三种国产的弓形虫IgG抗体检测试剂盒,采用酶联免疫吸附试验对80份猪血清样本进行平行检测。结果表明:A、B、C三种弓形虫IgG抗体试剂盒检测的阳性率分别为87.5%、77.5%、83.8%;试剂盒A和B的符合率为87.5%,试剂盒A和C的符合率为93.8%,试剂盒B和C的符合率为88.8%;通过Kappa一致性检验,A和B、A和C、B和C试剂盒的Kappa系数分别为0.57,0.75,0.64,其中试剂盒A和B检测结果一致性强度为中度,试剂盒A和C与试剂盒B和C检测结果一致性强度都为高度。说明在这三种试剂盒中A和C检测效果较为一致,B试剂盒检测效果相对于A和C检测效果较差,但三种试剂盒的检测结果差异不显著(P0.05),三种国产试剂盒在对弓形虫IgG抗体的检测上没有很大差别。 相似文献
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猪蛔虫性别特异基因在第三、四期幼虫的表达谱研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究猪蛔虫性别特异基因在第三期、第四期幼虫的表达情况,本研究采用表达谱基因芯片技术,从所构建的猪蛔虫雌、雄成虫cDNA消减文库中分别挑取克隆,制备成cDNA微阵列芯片、标记有荧光素Cy5-dUTP和Cy3-dUTP的各组探针(L3+♀;L3+♂;L4+♀;L4+♂)分别与制备好的芯片进行杂交、扫描,原始信号值经均一化处理后,获取每个点的Ratio值(Ratio=Cy5/Cy3).根据该值筛选出表达差异最明显的841个克隆,进行测序分析,在获得的707个有效序列中有61个是猪蛔虫新的ESTs、将在第三、四期幼虫以及成虫中显著表达的克隆进行排列组合比较,获得各期特有和各期之间共有的表达克隆一在第三期幼虫中,雌、雄性别特异基因分别有21和9个,编码的主要蛋白有卵黄原前导蛋白、睾丸幼胚蛋白等;在第四期幼虫中特异表达的雌、雄性别基因分别有22和6个,其中免疫抑制卵巢信息蛋白、主要精子纤维蛋白(MFP)等表达明显本项研究结果不仅初步阐明了猪蛔虫性别特异基因在第三、四期幼虫的表达情况,而且亦为筛选控制猪蛔虫病的“关键”基因并阐明其功能奠定了基础。 相似文献