猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区在大肠杆菌中的表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

张永国  刘湘涛  韩雪清  胡建和  张彦明  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2004,35(2):182-185

采用PCR技术扩增出猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区并克隆于PGEM-T easy载体上，测序结果表明插入的为猪瘟病毒E2基因抗原结构域，切出目的基因，将目的基因克隆到表达质粒pProEX—HTb中，获得重组质粒经PCR、酶切和序列分析鉴定E2基因抗原结构域插入的位置、大小和读码框均正确，SDS—PAGE检测表明受体菌经IPTG诱导后能表达E2基因抗原结构域蛋白，Westernblot检测表明受体菌诱导表达E2基因抗原结构域蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性反应。  相似文献   

猪瘟病毒及其全长cDNA在猪肾细胞中增殖表达特性的比较研究   总被引：1，自引：2，他引：1  

田宏  张彦明  林彤  刘湘涛  胡建和  吴锦艳  张淼涛  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1038-1042

以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料，以免疫荧光技术为主；结合ELISA和RT-PCR检测技术，对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究。同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞，探索其增殖表达规律，以便为猪瘟病毒反向遗传操作提供技术方法和可操作的条件。  相似文献   

中农控股:控风险抓机会,团结协作再出发 中农控股磷复肥及差异化板块春耕市场总结及夏秋市场工作交流会在山东临沂召开     

冯霞 《中国农资》2019,(19)

<正>5月7日,中农控股磷复肥及差异化板块春耕市场总结及夏秋市场工作交流会在山东临沂召开,公司总经理助理王秦燕主持会议,磷复肥事业部及差异化板块、农业服务事业部,天津中农,山东中农,新疆中农及公司本部的财务部、业管部、企发部等相关部门参加会议。  相似文献   

基于EPC总包模式下的园林专业现代学徒制的岗位导向实践教学研究     

刘建新  何司彦  冯霞  乐足 《现代园艺》2018,(11)

EPC模式即是Engineering(设计)、Procurement(采购)、Construction(施工)的组合,是指工程总承包企业按照合同约定,承担工程项目的设计、采购、施工、试运行服务等工作,并对承包工程的质量、安全、工期、造价全面负责,最终是向业主提交一个满足使用功能、具备使用条件的工程项目,是我国目前推行总承包模式最主要的一种。基于EPC的模式特点,本文主要探究现代学徒制实践教学在该模式下的如何开展,以培养出更契合企业发展的复合型人才。  相似文献   

条件性敲除D1133L基因的重组非洲猪瘟病毒的构建及增殖特性     

张婷  冯涛  杨金柯  郝雨  杨行  张大俊  史喜绢  闫文倩  陈玲玲  刘湘涛  郑海学  张克山 《畜牧兽医学报》2023,54(2):706-714

前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示：本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重...  相似文献   

O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测     

魏孔福  祁淑芸林密 冯霞张峰  马军武 《中国兽医科技》2007,37(9):787-790

分别按一次免疫、首免后第15d加强免疫和首免后第60d加强免疫程序，对3组试验牛（每组牛20头）用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA（LPB-ELISA）测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果，首免后第15d加强免疫牛和第60d加强免疫牛抗体水平较高，50％保护牛所占比例分别为56．3％和63．1％，完全受保护的牛所占比例分别为34．3％和29．5％。第60d加强免疫牛的保护率要高于第15d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明，首免后第60d加强免疫是最理想的免疫程序。  相似文献   

猪瘟病毒及其致病机制研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

田宏刘湘涛  张彦明林彤吴锦艳  谢庆阁 《动物医学进展》2007,28(B08):27-30

猪瘟（CSF）是猪的一种高度接触性传染病，该传染病可分为急性、亚急性、慢性、非典型性和不明显型。急性CSF由强毒株引发，一般导致高发病率和死亡率，而弱毒病毒感染则表现不明显。由于疫苗的广泛应用，有效地控制了猪瘟的大流行，减少了急性死亡。但从20世纪80年代以后，临床症状不典型且病程变长的非典型性猪瘟（或慢性猪瘟）成为该病的主要发生形式，持续感染普遍存在，疫苗的预防效果明显下降，使猪瘟防制遇到了新的困难。以目前人类对猪瘟的认识水平，尚难以从分子水平解释这一新变化的成因，这是因为对猪瘟病毒致病机理及其分子基础的认识深度不够。就此，文章综述了猪瘟及猪瘟病毒研究进展，主要涉及CSFV生物学特性、致病机制及其防控，希望能为猪瘟防控提供新的思路和对策。  相似文献   

猪水疱病病毒致病和免疫的分子基础     

孙世琪  郭慧琛  刘湘涛  谢庆阁 《畜牧市场》2009,(11):23-25

猪水泡病病毒（Swinevesiculardiseasevirus，SVDV）属于小RNA病毒科（Picornaviriclae）肠道病毒属（Enterovirus），其抗原特性与柯萨奇病毒B5（CoxsackievirusB5，CVB5）关系密切，被认为是CVB5的一个猪变种或亚种。SVDV只有一个血清型，但对其分离株进行系统发生分析可进一步分为4个抗原群或基因群。  相似文献   

多年生黑麦草核型分析与组织培养再生植株染色体变异研究   总被引：11，自引：0，他引：11       下载免费PDF全文

冯霞  孙振元  刘建锋  彭镇华  杜小娟 《林业科学研究》2005,18(3):321-324

对多年生黑麦草核型及组织培养再生植株细胞染色体变异进行了观察研究。结果表明：多年生黑麦草为二倍体，属中等染色体，由中部着丝点染色体和亚中部着丝点染色体组成，属“1A”型，其核型公式为2n=2x=14=2sm 12m(2SAT)。组培再生苗根尖细胞有40％发生了染色体数目变异，其中以非整倍体变异居多；同时存在一定数量的染色体倒位、断裂、凝聚、双着丝点等染色体结构变异及染色体桥、落后染色体、染色体不均等分裂等染色体有丝分裂异常现象。  相似文献   

猪瘟病毒NS3蛋白在真核细胞中的表达与定位     

宋江伟  田宏  吴锦艳  陈妍  尚佑军  刘湘涛 《西北农业学报》2014,23(8):16-19

为研究与猪瘟病毒NS3蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,采用PCR方法获得NS3基因,将其定向克隆至pCMV-Myc真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pMycNS3。采用脂质体介导法将pMyc-NS3转染至PK-15细胞和293T细胞,Western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达。结果表明,成功构建重组表达质粒pMyc-NS3,Western blot表明,NS3蛋白在PK-15细胞和293T细胞中均得到表达,NS3在PK-15和293T细胞质中呈弥散性分布。说明,成功构建的猪瘟病毒NS3基因与Myc融合表达质粒,为验证NS3蛋白与宿主细胞蛋白相互作用奠定基础。  相似文献