家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化   总被引：4，自引：0，他引：4  

施振旦  邵西兵  方梅霞  于迎春  刘颖  陈楠 《中国兽医学报》2004,24(3):258-260

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右  相似文献   

重组猪抑制素蛋白质中毒素残留检测及其理化稳定性     

李辉  翟颖超  窦晓  张甜  果双双  施振旦 《江苏农业学报》2015,31(2)

为探索纯化的重组猪抑制素蛋白质毒素残留情况以及重组猪抑制素蛋白质稳定性,本研究利用鲎试剂、气相色谱和SDS-PAGE方法对重组猪抑制素蛋白质中的细菌内毒素、β-巯基乙醇的残留量及其蛋白质在不同温度、极端p H值和反复冻融条件下的稳定性进行检测。结果显示,经过3次等电点沉淀洗涤后,重组猪抑制素蛋白质中细菌内毒素和β-巯基乙醇的残留量大幅减少。通过在不同温度下的处理发现,重组猪抑制素蛋白质在4℃环境下较稳定,可以长期保存;但在37℃时,稳定性快速下降,随着温度上升而降解加速。通过极端p H值和反复冻融试验发现,重组猪抑制素蛋白质对极端p H值和反复冻融具有较好的耐受性。  相似文献   

抑制载鸭水体有害细菌和内毒素污染对肉鸭生长性能的影响研究          下载免费PDF全文

刘丽  李炎明  许爱红  应诗家  赵伟  施振旦 《家畜生态学报》2015,36(5):59-65

试验旨在研究降低载鸭水体革兰氏阴性菌和内毒素污染对肉鸭肠道发育和生长性能的影响。将480只1日龄鸭随机分成4组,包括对照组、对照组+低聚半乳糖、对照组+光合细菌以及对照组+低聚半乳糖+光合细菌。每组4个重复,每个重复30只。在50d的试验期间采用"高床+水池"模式养殖至出栏。结果表明,日粮添加低聚半乳糖和向载鸭水体应用光合细菌均抑制水体大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌数量(P0.05),降低鸭血液内毒素浓度(P0.05),增加肠黏膜绒毛长度(P0.05),提高肉鸭日增重(P0.05),降低料重比和死亡率(P0.05)。表明低聚半乳糖和光合细菌通过降低养殖水体革兰氏阴性菌和内毒素水平促进肠道吸收能力,提高肉鸭生长性能。  相似文献   

用免疫抑制素提高水牛超排效果的初步研究     

覃广胜  李德如  韦英明  覃永长  蒋钦杨  蒋和生  施振旦 《畜牧与兽医》2012,44(6):35-37

为了探讨免疫抑制素对水牛超排的作用,进一步揭示水牛超排机理,选取17头具有正常发情周期的母水牛,随机分为试验组(10头),对照组(7头),试验组首次免疫重组猪抑制素亚基融合蛋白1 mg/头,首免后第28和第56天分别进行加强免疫,剂量为0.5 mg/头,对照组牛同期注射矿物油与生理盐水混合佐剂。试验组牛在首免、二免和三免当天分别用B超仪进行卵泡大小监测和计数,在超排后第6天用B超仪进行卵泡和黄体数进行统计。用免疫抑制素组水牛平均卵泡数在加强免疫后,卵泡数量从8.8增加到15.0个,但与对照组相比差异不显著(P>0.05)。超排后,试验组的平均成熟卵泡数、黄体数和排卵率分别是12.2±0.79,9.0±1.06和73.77%,与对照组相比差异显著。胚胎回收总数和可用胚胎数差异不显著。结果表明,利用免疫抑制素免疫水牛,可提高水牛的超排效果。  相似文献   

南方养鸭模式及鸭舍建造要点     

施振旦  麦燕隆  赵伟 《农村养殖技术》2012,(24):19

(一)"鸭-鱼"联合生产南方许多省份,过去多采用天然水源进行鸭养殖,近二十年,则更多地将养鱼与养鸭结合,形成了较有特色的"鸭鱼"联合生产模式,进行种鸭、肉鸭和蛋鸭的生产。该生产模式中,鸭舍建设相对简单,一般是在鱼塘、河湖或水库岸边建造一个结构较为简单的开放式或半开放式鸭舍,在鸭舍与水面之间建一运动场,并在水上围出一定区域作为水上运动场。对于种鸭和蛋鸭舍,舍内需要加上产蛋箱,并安装灯具以提供人  相似文献   

推广鹅反季节繁殖技术 推进新农村建设     

施振旦  孙爱东  梁少东 《中国禽业导刊》2007,(21)

发展现代农业,促进农村经济可持续发展,农民创业是关键,技术、资金、市场信息是助力。首先必须因地制宜,根据各地农民的自身资源优势和经济实力,发展适合自身情况的特色产业,从而提高农业的竞争力和生产力。其次必须提升农民的自我发展能力,使之成为“有文化、懂技术、会经营“的新型农民,促进农民的自主创业,开展产业化农牧业生产,促进现代农业的持续发展。  相似文献   

广东地方鹅产蛋-就巢周期调控模式的探讨     

黄运茂  施振旦 《黑龙江畜牧兽医》2007,(7):57-58

马岗鹅原产于广东省开平市,是广东省的优良地方鹅种之一,具有体型大小适中、屠宰率高、肉质鲜嫩、生长快和耐粗易养等优点,深受广大消费者的欢迎,目前在广东省各地几乎都有分布,而且全省近年的饲养量增长迅猛.  相似文献   

动物生产性状免疫调控技术的研究进展和应用前景   总被引：1，自引：0，他引：1  

黎敏义  施振旦  刘颖  王贵平 《畜牧与兽医》2006,38(3):56-59

免疫调控技术是一项以自身激素或细胞蛋白调控对象为主的动物生产性能调控技术,在促进动物生长、提高动物繁殖性能和应用于免疫去势等畜牧业生产实践中显示出广阔的应用前景。本文就提高繁殖性能的免疫类固醇激素和抑制素,抑制繁殖活动的免疫促性腺素释放激素;促生长的免疫生长抑素、肌肉生成抑制因子、瘦素、儿茶酚胺、脂肪细胞膜蛋白等免疫调控技术作用作一综述,并评价其在动物生产中的应用前景和未来的研究方向。  相似文献   

激活素的分子生物学特性及其在动物繁殖生理中的作用     

黄运茂  王连想  施振旦 《广东畜牧兽医科技》2007,32(1):16-18,29

激活素是一种主要由性腺分泌的二聚体糖蛋白,与抑制素在组成结构和功能上有着密切的复杂关系,两者与卵泡抑素所组成的INH-ACT-卵泡抑素轴系统在动物繁殖生理中占有重要作用.本文就激活素的生物学特性及其在动物繁殖生理中的作用进行综述,为其更深入的研究提供参考.  相似文献   

提高畜禽生产力的新技术研究     

黄运茂  李孝伟  施振旦 《安徽农业科学》2007,35(5):1532-1533

综述了提高畜禽生产力的新技术.分别为:改变循环系统或组织中生长激素浓度;改变生长激素生物效能促进动物生长和泌乳;基因"敲除"技术和动物克隆技术.  相似文献