仙台病毒P基因的原核表达及抗原性分析     

蒋良丰  刘家森  司昌德  郭东春  姜骞  曲连东 《中国预防兽医学报》2009,31(3)

根据GenBank公布的仙台病毒(SeV)磷蛋白(P)基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增P基因,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中;重组质粒经酶切、PCR及测序鉴定正确后.转化感受态细胞BL21(DE3)PlysS,经IPTG诱导表达,获得相对分子量为99.6 ku的融合蛋白.经western blot及ELISA分析表明表达的融合蛋白具有良好的抗原性.  相似文献   

仙台病毒F基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达及抗原性分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

曲连东  蒋良丰  刘家森  司昌德  郭东春  姜骞  林欢  韩凌霞  刘娣 《中国预防兽医学报》2010,32(5)

为真核表达仙台病毒(SeV)融合蛋白(F)基因,本研究根据GenBank登录的SeV F基因序列设计合成一对特异性引物,以pMD18-T-F阳性重组质粒为模板扩增F基因,并将其克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac HTa中,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆粒rBacmid-F,经PCR鉴定正确将rBacmid-F转染Sf9细胞,连续传代后,细胞病变明显。经SDS-PAGE分析,成功表达了相对分子量为65ku左右的F蛋白,western blot和ELISA分析表明重组F蛋白具有良好的抗原性。  相似文献