不同土壤熏蒸剂对烤烟苗床杂草的药效试验     

黄磊  赵宏伟  万秀清  郭兆奎  李丽杰  乔婵 《中国林副特产》2011,(5):74-76

以烟草品种龙江911为供试材料,对适每地、维博亩和斯美地这3种不同土壤熏蒸剂防除烟草苗床杂草效果进行了试验。结果表明,适每地和斯美地这两种土壤熏蒸剂对苗床杂草均有较好的防除效果。综合防除效果及安全性等因素．以斯美地效果最理想,其次是适每地,均可在黑龙江省烟区推广使用。  相似文献   

低钾胁迫下烟草根系差异表达基因的cDNA-AFLP分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘磊  郭兆奎  万秀清  颜培强  乔婵  刘丹 《分子植物育种》2009,7(3)

烟叶含钾量是评价优质烟叶重要品质指标,大量研究认为钾元素的吸收和积累是由植物基因型所控制,而在烟草转录水平上的低钾胁迫的应答机制方面,尚未见报道.本实验为鉴定烟草低钾胁迫响应基因,应用,cDNA-AFLP技术,对低钾胁迫下烟草NC89根系基因表达进行了mRNA指纹分析,通过240对引物组合的筛选,共得到324个差异表达转录衍生片段.对其中9个TDF进行了克隆、测序和序列分析.结果表明:其中7个TDF涉及逆境响应,氨基酸的转运与代谢,转录调控及钾吸收,2个TDF为功能未知.  相似文献   

TMV和PVY外壳蛋白双基因融合干涉及烟草转化     

刘丹  郭兆奎  万秀清  颜培强  乔婵  刘磊 《广西农业生物科学》2009,(3):450-454

为了降低烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）和马铃薯Y病毒（potato irus Y,PVY）复合侵染对烟草带来的危害,本实验找到TMV—CP和PVY—CP基因部分保守序列,将保守序列进行双基因融合,此双基因即为RNAi的靶序列,用限制性内切酶将双基因从pMD18-T载体上切下,正反向连接到pUCCRNAi载体后,经酶切鉴定后定向连接到含超强启动子的pC2300—35S—OCS表达载体上,利用冻融法将此表达载体导入只含辅助质粒的根癌农杆菌中,构建含靶序列反向重复结构的RNAi双元载体系统,提取转化质粒,经酶切验证鉴定表明TMV和PVY外壳蛋白基因植物表达双元载体构建成功。并转化烟草,获得了3株对TMV和PVY抗性显著提高的转基因烟草。  相似文献   

TMV侵染烟草基因差异表达的cDNA-AFLP分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈荣平  刘磊  万秀清  邱恩建  王春军  宋宝刚  颜培强  杨铁钊 《作物学报》2012,38(1):62-70

以烤烟品种龙江925 [高抗烟草普通花叶病(TMV)]接种TMV的叶片为材料,选用240对引物组合的扩增, 获得约 9 500个转录基因片段, 经过克隆测序最终获得了12个诱导表达片段, 它们与核酸代谢、蛋白质合成与修饰、能量代谢、胁迫响应、细胞内运输、糖代谢等相关, 并利用荧光定量PCR分析一个诱导表达片段TIF2在0~72 h之间5个时间点(0、12、24、48和72 h)的基因差异表达, 证实了所获得的基因序列为真实诱导的表达序列。对此序列进行RACE, 最终获得全长cDNA序列, 全序列857 bp, 预测的编码区在101~613 bp之间, 共编码170个氨基酸。经Blastn、Blastp比对分析, 在烟草中没有获得其同源序列, 确定该基因是在烟草中发现的与抗TMV相关的新基因。  相似文献   

转录因子CBF基因转化烟草抗寒性指标的检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

沙丽娜  郭兆奎  万秀清  程红梅 《中国林副特产》2009,(1):4-7

为了解棉花转录因子CBF基因转化烟草的抗寒性，将苗龄21d的转基因及其野生型T2代烟苗进行0、-1、-2、-3、-4℃低温处理4h，分别进行各处理材料的电解质渗透率、丙二醛含量和可溶性糖含量的检测。结果表明转基因烟草的电导率和丙二醛含量均低于非转基因烟草，而转基因烟草的可溶性糖含量高于非转基因烟草。证实转CBF基因可以提高烟株的抗寒性。  相似文献   

N基因标记基因PCR检测方法的建立及其在遗传育种中的应用     

刘磊  郭兆奎  万秀清  颜培强  乔婵  刘丹 《分子植物育种》2010,8(1):167-171

烟草的N基因是一个较为有效的抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)基因,在抗病育种中发挥着重要的作用。为建立其标记基因PCR检测体系,评估已知目的基因cDNA序列作为分子标记的目的基因辅助育种的可行性,本文依据N基因cDNA序列设计4对扩增范围在150～950bp的不同片段长度引物,并对含有N基因的coker176基因组DNA进行PCR扩增。扩增结果表明,有3对可扩增出特异产物。测序结果表明,有2对引物的扩增产物含有内含子。根据所获得的DNA序列设计出2对用于分子标记辅助育种的引物,并分别对C151、NC89、coker176等11个品种的基因组DNA进行扩增,结果表明在coker176、龙江912、吉烟9号和龙江911品种中有扩增产物,除龙江911外,这一结果与已知的N基因在11个品种的分布相一致,成功建立了N基因PCR检测体系,并证明以cDNA序列设计引物扩增DNA序列的目的基因辅助育种技术完全可行。并对实验中出现的问题进行了研究。  相似文献   

烟草cDNA-AFLP体系中选择性引物筛选     

刘磊  郭兆奎  万秀清  颜培强  乔婵  刘丹 《黑龙江八一农垦大学学报》2010,22(5):9-12

为确定cDNA-AFLP技术在烟草中的最适合的选择性碱基数目,本实验对低钾胁迫下的烟草根系进行了cDNA-AFLP分析,通过240对引物组合的筛选,共得到2100个转录衍生片段,并根据不同选择性碱基的组合对2100个片段进行了分析。结果表明,在扩增产物过多时,应将引物中选择性碱基的数量调整到3个较为合适。  相似文献   

烟草赤星病拮抗生防菌BS06-1的筛选     

唐圣华  万秀清  郭兆奎  颜培强  李丽杰 《安徽农业科学》2008,36(35)

[目的]筛选对烟草赤星病具有明显拮抗作用的细菌。[方法]应用平板对峙培养法对从烟草根际分离到的细菌进行烟草赤星病拮抗性鉴定,对其中对烟草赤星病菌拮抗性较高的一株细菌利用细菌16S rRNA通用鉴定引物进行PCR扩增、测序和田间抗病性试验。[结果]共从烟草根际分离120份细菌,有6份对烟草赤星病病原菌具有一定拮抗作用,其中1份细菌拮抗作用明显,定名为BS06-1。将该细菌的16S rRNA测序结果登录NCBI网站进行Blastn序列比对,结果表明该菌株与枯草芽孢杆菌BSD-2同源性达到96%,与枯草芽孢杆菌BCRC 14718同源性达到95%,证明该菌属于枯草芽孢杆菌。田间试验证明该菌株BS06-1对烟草赤星病具有显著的抑菌效果。[结论]BS06-1细菌对烟草赤星病具有明显拮抗作用。  相似文献   

酿酒酵母NHX1基因克隆与烟草表达分析     

郭兆奎  杨谦  万秀清  颜培强 《分子植物育种》2006,4(6):779-785

提取酿酒酵母DNA，PCR法合成片段长度为1902bp的NHX1基因，构建植物高效表达载体转化烟草，经PCR扩增、GUS酶染色分子鉴定后，应用荧光定量PCR分析转化材料幼根NHX1基因的转录水平，并将各转化材料T1代烟苗移栽至中间试验隔离圃中，化验分析烟叶内在成分。获得抗卡那霉素、NHX1基因PCR扩增和GUS染色阳性的转化子42株，在转化材料幼根中可检测到外源基因NHX1转录的mRNA分子；烟叶内在成分化验结果表明T1代转化材料烟叶含钾量增加30％，总糖含量显著降低，证明NHX1基因除了与Na^＋运输有关还与K^＋的吸收和糖分运输有关。  相似文献   

PF7-5对烟草角斑病的室内及大田防治效果   总被引：3，自引：0，他引：3  

乔婵  陈星  张艳菊  万秀清  黄磊  郭兆奎  李丽杰  颜培强 《中国林副特产》2010,(5):18-20

为验证荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病的生物防治效果,设计了荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病菌的室内和大田抑菌试验。结果表明,室内试验中荧光假单胞杆菌PF7-5代谢产物对烟草角斑病的抑菌效果达到71%,大田试验中PF7-5活菌的50倍稀释液田间防治效果达87.34%,说明荧光假单胞杆菌PF7-5对烟草角斑病有一定的防治效果。  相似文献