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1.
水稻巯基蛋白酶抑制剂基因在烟草叶绿体中的表达   总被引:4,自引:0,他引:4  
苏宁  冯丽  杨波  孟昆  李轶女  沈桂芳 《作物学报》2002,28(3):301-304
将水稻巯基蛋白酶抑制剂(Oryzacystatin,OC) cDNA基因克隆、测序分析后,与烟草(Nicotiana tabacum L.)叶绿体16S rDNA基因启动子和T393终止子构建表达盒,与抗壮观霉素选择标记基因aadA表达盒相连,以烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和ORF512一起构建成叶绿体转化载体pZOC.通过基因枪轰击烟草幼苗叶片,壮观霉素筛选,获得转化再生  相似文献   
2.
【目的】研究饲粮中添加不同水平地衣芽孢杆菌BCG对肉鸡生长性能和健康的影响,探究其对肉鸡的益生作用效果,为其在实际生产中的应用提供理论依据。【方法】采用单因素试验设计,选取180只体重相近(42.62 g±0.82 g)、健康状况良好的1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。对照组(CT组)饲喂基础饲粮,地衣芽孢杆菌处理组(BCG1和BCG2组)分别在基础饲粮中添加1.0×108和1.0×109 CFU/kg地衣芽孢杆菌。试验鸡分1~21和22~42日龄2个阶段饲养,试验期为42 d。在21和42日龄时以重复为单位对各组肉鸡空腹称重并统计各阶段采食量,计算平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI);每个重复选取2只鸡采集血液,测定血常规、血清生化和免疫指标;42日龄时屠宰并分离肠道,观察小肠形态结构,测定肠绒毛高度(VH)和隐窝深度(CD),计算绒毛高度与隐窝深度比值(VH/CD)。【结果】①与CT组相比,42日龄时,BCG2组肉鸡体重显著提高(P<0.05);在22~42日龄,BCG2组肉鸡ADG和ADFI均显著提高(P<0.05),其ADG显著高于BCG1组(P<0.05);在1~42日龄,BCG1和BCG2组ADG和ADFI均显著提高(P<0.05),且两组间无显著差异(P>0.05)。②21日龄时,与CT组相比,BCG2组肉鸡血清免疫球蛋白A (IgA)、IgM和IgG含量均显著提高(P<0.05),内毒素(ET)活性显著降低(P<0.05),且血清IgA和IgM含量均显著高于BCG1组(P<0.05);在42日龄时,饲粮中添加BCG对血常规指标和IgA、IgM及IgG含量均无显著影响(P>0.05)。③42日龄时,BCG2组空肠VH显著高于CT组(P<0.05),VH/CD显著高于CT和BCG1组(P<0.05)。【结论】地衣芽孢杆菌BCG能够提高肉鸡生长性能,增强肉鸡前期体液免疫和肠道屏障功能,改善肉鸡肠道形态结构,以添加1.0×109 CFU/kg地衣芽孢杆菌的益生效果更佳。  相似文献   
3.
分泌型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)作为高效表达宿主菌已被广泛应用,通过高密度培养工艺用于多种酶制剂(如植酸酶、甘露聚糖酶等)的规模生产。然而,在生产过程中产生的大量菌体利用率低,多数被废弃掩埋,或只能作为廉价的菌体蛋白,造成大量的资源浪费。为提高酵母发酵副产物的利用率,向毕赤酵母宿主菌GS115中导入来源于红发夫酵母(Xanthophyllomyces dendrorhous)β-胡萝卜素合成途径中的关键基因(idi、crtE、crtYB和crtI),获得了胞内高产β-胡萝卜素的工程菌株P. pastoris GS115-CARO,实现工业生产中的菌体蛋白的高附加值利用。同时以来源于嗜热篮状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)的甘露聚糖酶基因Man5T作为参照,验证了宿主菌P. pastoris GS115和P. pastoris GS115-CARO在表达外源蛋白的差异。结果表明:Man5T基因的导入并没有影响,两株宿主菌的甘露聚糖酶表达量(分别为280 U/mL和286 U/mL,P>005),但宿主菌P. pastoris GS115-CARO胞内β-胡萝卜素产量高达到31.27 mg/g(菌体干重dry cell weight,dcw)。构建的工程菌株不仅可以实现外源酶制剂的高效表达,有效地提升酵母菌体资源的利用价值,同时也在一定程度上了解决了发酵菌体对环境的污染问题。  相似文献   
4.
麸皮富含多种营养物质,但同时含有粗纤维和植酸等,限制了其在饲料中的充分应用。微生物发酵技术可降低麸皮的抗营养因子含量,释放多种活性物质,从而大幅提高其在饲料中的应用价值。作者主要综述了有关麸皮的营养成分、发酵菌种、发酵工艺优化、发酵产物营养品质改善及其功能特点等的研究进展。麸皮中含粗蛋白质、粗脂肪、酚酸和膳食纤维等,这些营养物质以复杂的结构与形式存在麸皮中,限制了其在饲料中的有效利用。麸皮发酵常用的菌种主要有芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌、霉菌四大类,这些菌种分泌的多种酶系在麸皮的发酵降解中发挥着不同的作用。采用合理的优化策略获取最优发酵工艺可显著提高目标产物含量,其中响应面法是应用最多的方法。麸皮通过微生物发酵提高了其酚酸类物质、膳食纤维、可溶性总糖和蛋白质的含量,对动物提高抗氧化水平、增强机体免疫力、改善肠道环境及提高生产性能起到促进作用。  相似文献   
5.
为了提高根农杆菌籼稻转化效率,将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck和潮霉素磷酸转移酶基因hpt分别置于紧密相连的2个T-DNA上,构建载体pCDMARUSCK-HPT,电激法将表达载体转化农杆菌LBA4404获得工程菌.比较了提门叮和国产噻孢霉素对工程菌LBA4404的抑制效果,试验得出提门叮在500mg/L以内比噻孢霉素能更有效地去除水稻细胞中的农杆菌,而且低浓度条件下(250mg/L)就能有效地抑制工程菌LBA4404,并且有利于水稻转化细胞成功地再生植株.确立了工程菌LBA4404菌液浓度OD值0.8,浸染时间5min为明恢86合适的转化参数.在此基础上,采用优化的农杆菌介导法转化杂交籼稻优良恢复系明恢86,获得转基因植株127个克隆,转化效率4.5%.  相似文献   
6.
双价抗虫基因共转化烟草叶绿体的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
 分别构建苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因 [BtCryIA(C) ]和水稻巯基蛋白酶基因 (Oryzacystatin ,OC)叶绿体转化载体 ,其中Bt基因叶绿体转化载体以烟草叶绿体基因trnH psbA trnK为同源片段 ,以水稻 (OryzasativaL .)叶绿体 psbA基因启动子和终止子为调控基因 ;OC基因叶绿体表达载体以烟草叶绿体基因片段 psbA ORF5 12为同源片段 ,以烟草叶绿体 16S启动子和终止子为调控基因 ;两载体均以壮观霉素抗性基因 (aadA)为筛选基因。利用基因枪方法 ,共转化烟草叶片 ,获得壮观霉素抗性植株。经Southern、Western检测、表达蛋白活性测定证明 ,双价抗虫基因己整合到烟草叶绿体中并得到表达。转基因植株抗棉铃虫试验表明 ,转基因植株具有显著杀虫活性  相似文献   
7.
由于市场供求需要,牛羊养殖业的迅速发展,盲目投资兴办养殖场的现象较为普遍。由于缺乏科学的养殖观念,通过调查发现散养牛羊寄生虫感染率较高,感染种类也比较多,牛羊分别为6种和8种。通过药物治疗驱虫后,感染率明显下降,提高了牛羊养殖经济效益。  相似文献   
8.
9.
本试验旨在研究甘露聚糖酶转基因玉米对肉鸡生长性能、屠宰性能及血清生理生化指标的影响。试验选择1日龄爱拔益加(AA)肉鸡480只,随机分成4个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。4个组安排如下:组Ⅰ为非转基因玉米的对照组,不添加甘露聚糖酶;组Ⅱ为非转基因玉米添加低剂量微生物来源甘露聚糖酶组,甘露聚糖酶活力500 U/kg;组Ⅲ为低剂量甘露聚糖酶转基因玉米组,甘露聚糖酶活力500 U/kg;组Ⅳ为高剂量甘露聚糖酶转基因玉米组,甘露聚糖酶活力5 000 U/kg。试验期42 d。结果表明:与对照组相比,组Ⅲ和Ⅳ42日龄肉鸡平均日增重有显著提高(P0.05),组Ⅳ料重比显著降低(P0.05)。组Ⅳ42日龄肉鸡屠宰率和全净膛率显著高于组Ⅱ和对照组(P0.05)。组Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ21和42日龄肉鸡的血液生理生化指标与对照组均没有显著差异(P0.05)。由此可见,饲粮中添加甘露聚糖酶转基因玉米能提高受试肉鸡的生长性能和屠宰性能,但对血液生理生化指标没有显著影响。  相似文献   
10.
采用简并PCR和TAIL-PCR技术,从来源于天山冰川土壤的类芽孢杆菌Paenibacillus sp. A1菌株基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因编码序列。序列分析表明,该基因全长960 bp,编码一个新的糖苷水解酶第5家族的β-甘露聚糖酶。将该基因克隆到原核表达载pET-22b(+)中,经过IPTG诱导表达,酶的胞外表达量达0.62 U/mL。酶学特性分析表明其最适pH为6.5,最适温度为55℃,属中性β-甘露聚糖酶,具有较好的底物适应性,适宜用于鱼类等水产动物养殖饲料行业中。  相似文献   
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