园林植物绿化养护技术     

王尚堃  张松杰  于醒  李剑男 《中国园艺文摘》2009,25(3):33-35

从种植类型着手，主要介绍四种园林植物（草地、绿篱、树木、花卉）的绿化养护技术；其关键是根据这些植物的不同生物特性，于不同阶段抓好肥、水、病、虫、剪五个方面的管理工作。  相似文献   

河南省周口市果树产业发展的思考     

王尚堃  王高峰  刘艳秋  马征  于醒  李剑男 《农业科技通讯》2009,(7):32-34

周口市是河南省的主要果产区之一，适宜栽植的果树种类较多。文章分析了周口市果树产业发展现状及存在的问题。并从加强周口市果树生产技术体系建设、建立完善的果树生产经营管理技术保障、积极开拓国内外市场、制定相应的风险回避政策等方面对周口市果树产业的发展进行了思考。  相似文献   

基于SodC单克隆抗体的胞内劳森菌IPMA抗原检测方法的建立及应用     

李敏雪  李剑男  周红  肖宁  蔺辉星  马喆  范红结 《中国农业科学》2021,54(20):4478-4486

【目的】胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,LI）是引起猪增生性肠炎（porcine proliferative enteritis, PPE）的肠道病原菌,主要表现为动物福利下降,给世界养猪业造成严重的经济损失。研究通过制备鼠抗LI SodC的单克隆抗体,建立一种针对LI的免疫过氧化物酶细胞单层试验（IPMA）抗原检测方法,检验其在临床上的应用性,从而为LI的病原诊断提供一种科学有效的手段。【方法】选取胞内劳森菌弱毒疫苗为研究对象,通过PCR扩增其sodc片段,将其克隆至原核表达载体pGex-6p-1上,成功构建出pGex-6p-1-sodc重组质粒,诱导表达重组蛋白SodC。Western Blot分析重组蛋白的反应原性,一抗使用鼠抗GST标签的抗体。以该重组蛋白为免疫原,免疫4—6周龄BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术、有限稀释法和间接ELISA技术筛选阳性杂交瘤细胞,并制备腹水。通过间接免疫荧光（IFA）鉴定该单抗的特异性。以该单抗为一抗,摸索并建立了LI IPMA抗原检测方法,并评价该方法的特异性、敏感性和重复性。用优化后的IPMA方法对来自江苏周边地区猪场回肠组织样品进行检测,评价该方法的临床价值。【结果】纯化后SodC蛋白浓度较高,与鼠抗GST标签的抗体发生特异性结合,表明该蛋白反应原性较好。经3次亚克隆后最终共筛选获得2株阳性杂交瘤细胞,分别命名为1D6和1F7。单抗亚型鉴定结果显示：1D6亚型为IgA,1F7亚型为IgG3;ELISA检测1D6单抗效价为1﹕1 024 000;1F7单抗效价为1﹕1 024 000;间接免疫荧光（IFA）结果表明2株单抗均与LI菌株发生特异性反应,与猪霍乱沙门氏菌（Salmonella Cholerasuis,S. Cholerasuis）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）等猪常见病原无交叉反应。优化后IPMA反应条件为：一抗稀释倍数为1﹕800,作用45min;二抗稀释倍数为1﹕2 500,作用1h,此时IPMA检测效果最佳。用该方法检测S. Cholerasuis、PEDV、TGEV、伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒2（PCV2）均为阴性;最低检测限为10³个/mL,说明该方法特异性强、敏感性高。临床样品检测结果显示146份病料中共检测出92份阳性样品,3个不同猪场的阳性样品检出率分别为65.6%、68.2%和53.7%,总体阳性率为63.0%。普通PCR方法检测出82份阳性样品,两种方法的阳性符合率为94.6%。【结论】成功制备了鼠抗LI SodC蛋白的单克隆抗体,建立了针对LI抗原的IPMA检测方法,并对临床样品进行了检测。该方法具有良好的特异性和敏感性,并具有一定的临床价值,为实验室LI的分离鉴定、在感染细胞中的定位以及流行病学调查和相关检疫提供一种有效的技术手段。  相似文献   

亚麻酸脂质体的制备工艺及质量标准研究     

刘鑫  李剑男  蔡广知  贡济宇 《人参研究》2017,(6):43-47

目的优选亚麻酸脂质体的制备工艺同时对其质量进行评价与分析。方法采用注入法制备亚麻酸脂质体,以包封率为指标优选最佳的脂质体制备工艺。结果在乙醇加入量8ml,加热温度55℃,磷酸盐缓冲液p H值为7.5的条件下,月见草油(紫苏油)与大豆软磷脂按照1:1混合后其包封率达到最高值。结论采用脂质体制备的亚麻酸工艺稳定、质量可靠。  相似文献   

醋两头尖炮制工艺及作用评价     

付要  赵凌  赫一鸣  蔡广知  李剑男  贡济宇 《特产研究》2019,(2)

优选两头尖醋制最佳炮制工艺,探究醋制对两头尖的作用。通过单因素试验及正交试验的方法,以饮片外观性状及竹节香附素A含量为评价指标,以加醋量、闷润时间、炒制温度、炒制时间为考察因素,对两头尖醋制工艺进行筛选,确定最佳醋制工艺。通过药效学及毒理学试验,探究醋制对两头尖的作用。醋两头尖最佳炮制工艺为加醋量20%、闷润时间2 h、炒制温度120℃、翻炒时间10 min。药理试验结果表明,醋两头尖相对于生品而言,毒性降低,抗炎效果增强。该工艺设计合理、稳定可行。两头尖经醋制后可以达到"增效减毒"的目的。  相似文献