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用真核表达引物从pGEM-yakIFN-β重组质粒中扩增出牦牛IFN-β基因,将目的基因和真核表达载体pPIC9K连接转入E.coli的JM109中,得到pPIC9K-yakIFN-β重组表达质粒.通过电击法将经SalⅠ线性化的pPIC9K-yakIFN-β质粒转化到巴斯德毕赤酵母GS115感受态细胞中,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,利用甲醇诱导表达,分泌表达产物用MTT法检测其生物学活性.经SDS-PAGE电泳分析表明:表达出约22ku大小分泌于胞外的牦牛IFN-β蛋白分子量,比理论值稍大;MTT结果表明:纯化的重组yak-IFN-β蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性. 相似文献
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猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621 bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8B蛋白的氨基酸同源性分别为75.7%、67.9%和33.3%.根据大肠杆菌密码子偏嗜性改造目的基因,构建了pET28a/PCD8 β原核表达系统,并经诱导获得高效表达的分子量为24 ku的重组蛋白(rPCD8 β),表达量占菌体蛋白总量的30%.利用生物信息学和分子生物学软件对猪CD8 β基因编码的蛋白进行结构预测,表明猪CD8 β成熟蛋白为跨膜蛋白,其中172aa在胞外区,22aa在跨膜区,10aa在胞内区;蛋白骨架内含有较多的柔性区域,而且分布不均匀.能形成结构松散的球状蛋白;猪CD8 β分子V区三维结构与鼠的具有非常相似的空间结构,与人的差别较大,这为猪CD8B蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础. 相似文献
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秦皇岛市海洋渔场特征及增殖型渔业发展方向的探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
<正> 目前,增殖渔业资源已成为我国海洋渔业发展的关键。发展增殖型渔业已经被提到各级水产管理部门的议事日程,并正在逐步实施。因此,掌握渔场环境特征,探讨增殖型渔业的发展方向,是十分必要的。一、秦皇岛渔场的环境特征及资源状况 1、环境特征: 秦皇岛渔场位于辽东湾西部,总面积达1万平方公里(1520亩),其大陆岸线达126.4公里。主要环境特征如下: 相似文献
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在林业产业发展过程中,因养护不到位而导致资源浪费的问题十分突出,甚至存在珍稀林木被破坏的现象,对于林业复合经济的发展十分不利。只有做好养护工作才能保障林业的发展。本文主要围绕林业复合经济与养护工作展开讨论。 相似文献
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本研究应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中,克隆了猪Toll样受体9基因(pTLR9).基因序列分析表明,克隆的pTLR9基因ORF为3 093 bp,编码1 030个氨基酸,含18.5%的亮氨酸,含有24个氨基酸的信号肤序列,属于Ⅰ型跨膜受体,具有富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域;与GenBank上登载的pTLR9参考序列(AY859728)的同源性为99.3%,与牛、马、羊和人的同源性较高,与家鼠、褐鼠的次之,TLR9的演化关系与亲缘关系密切. 相似文献
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<正> 八三年九月国务院曾批转农牧渔业部《关于发展海洋渔业若干问题的报告》中指出,“从指导思想上扭转片面强调捕捞,忽视保护和增殖资源的偏向,”并指出:“改造渔场环境,人工放流苗种,增殖近海资源,是发展海洋渔业的一项战略措施。”本文想就秦皇岛近海水域中投放人工鱼礁,改造生态环境,恢复渔业资源的必要性及有利条件,谈一点粗浅的看法,以抛砖引玉。 相似文献
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利用高光谱技术对河套灌区土壤铵态氮含量检测过程中,为降低高光谱数据中存在的冗余变量信息对模型预测精度的影响。本文针对河套灌区土壤铵态氮含量提出了一种竞争性自适应重加权算法(CARS)和模拟退火算法(SAA)相结合的特征变量筛选方法,并建立偏最小二乘回归(PLSR)和随机森林回归(RF)相结合的预测模型(PLSR-RF、RF-PLSR)。结果表明,CARS-SAA能有效筛选变量个数和减小计算量,并稳定模型预测精度。其中,CARS-SAA-PLSR-RF模型的预测精度最佳,验证集的决定系数R2为0.902、均方根误差RMSE为1.583mg·kg-1、相对分析误差RPD为3.198。具有很好的预测效果,可知CARS-SAA是一种有效的高光谱特征变量筛选方法,在提高预测精度的同时简化了模型的运算。该模型结合高光谱技术可以对河套灌区土壤铵态氮含量进行快速有效的无损检测。 相似文献
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随着社会的不断发展,我国国营苗圃得到了快速发展,在改革开放以后,经济模式由计划经济向市场经济转变,对苗圃发展产生影响,为了满足时代发展对国营苗圃提出的新要求,必须要加强苗木成本核算,其对提高国营苗圃经济效益具有重要作用。结合青海湟源县实际情况,主要针对国营苗圃强化苗木成本核算问题展开讨论。 相似文献