中国麻鸭血管紧张素转化酶2(ACE2)的基因克隆及基因结构的序列解析   总被引：1，自引：1，他引：0  

李帅  纪晓霞  杨博  许濛  张源淑 《畜牧兽医学报》2020,51(7):1597-1606

血管紧张素转化酶2（ACE2）被发现以来，其病理生理功能，特别是作为SARS、COVID-19等冠状病毒侵入细胞的功能性受体，显示了巨大的潜能，明确其在不同物种的基因序列及结构可为冠状病毒感染机制研究提供依据。本研究以中国麻鸭为研究对象，利用RT-PCR和Western blot检测ACE2在中国麻鸭各组织中的表达，然后用PCR技术，扩增出中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列，再TA克隆至pMD-19T载体中进行测序，对所得序列进行生物信息学解析。结果证实，ACE2在中国麻鸭心、肝、肺、肾等组织中均有表达。基因克隆结果显示，该中国麻鸭ACE2基因的CDS序列全长为2 435 bp，编码805个氨基酸残基，与人ACE2核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为66.2%和66.4%，且处在不同进化树分支上。通过对与SARS病毒S蛋白结合有关的18个关键氨基酸残基分析发现，中国麻鸭除第330和353位氨基酸外，其余均与人不相同。结构分析发现，中国麻鸭ACE2为Ⅰ型跨膜蛋白，有多处N-糖基化位点。研究首次获得中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列及相关基础资料，所得序列已上传GenBank并被成功收录，研究结果为开展ACE2在鸭上的功能研究提供了理论依据。  相似文献   

斜带石斑鱼PKR基因的克隆表达及亚细胞定位分析     

高品  魏京广  许濛  陈秀丽  秦启伟  周永灿 《热带生物学报》2016,(3):285-289

根据实验室前期获得的斜带石斑鱼PKR基因的全长c DNA,对其原核表达、组织分布及亚细胞定位进行了研究分析。结果表明,斜带石斑鱼PKR基因c DNA全长为2 151 bp,其中ORF区为1 863 bp,编码621个氨基酸,表达蛋白的分子质量大小为70 157.15 Da,PI为5.72。通过NCBI网站上BLAST软件比对发现,斜带石斑鱼PKR与其他物种的PKR高度同源。通过构建原核表达载体PKR-p ET-32a,获得了斜带石斑鱼PKR的融合蛋白,经纯化后制备了斜带石斑鱼PKR鼠抗血清。利用荧光定量PCR对斜带石斑鱼PKR基因组织分布研究表明,该基因在所有检测组织中均有表达,其中肠的表达量最高,头肾次之。以荧光显微镜对其亚细胞定位进行了分析,该基因为全细胞分布,但主要分布于细胞质中。  相似文献