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【目的】分析数据非依赖性采集高分辨率色谱—质谱技术（DIA LC-MS）对根尖差异蛋白质样品检测的适用性,为深入研究烟草蛋白质组学提供技术支撑。【方法】以6个烟草品种（系）移栽后74 d的根尖组织为试验材料,采用DIA LC-MS法对裂解的蛋白质肽段进行扫描,从而分析该方法对根样组织的适用性。【结果】采用TCA/丙酮沉淀+SDT裂解法提取根尖总蛋白质,能得到横向条带平行性好,电泳条带清晰的蛋白质样品,样品等级评价均达到A级。构建的DDA数据库包含28042条肽段,共鉴定出7084个蛋白质。DIA数据的色谱峰平均数据点为7,平均的峰容量达260,主要肽段的保留时间（iRT）均被检测出,且整体较稳定,在Q值为0.01标准下的一致性评分（Cscore）为0.948,变异系数（CV）中值为11.5%（小于20.0%）,相关系数大于0.9。DIA全息扫描模式下从6个烟草品种（系）的根尖组织中鉴定出的蛋白质数目为4149~5069个。【结论】DIA LC-MS分析鉴定的蛋白质范围广、数量大、可信度高,具有一定的可靠性和稳定性,各项质控指标均能达到试验分析要求,说明DIA LC-MS适用于烟草根尖蛋白质组样品的检测分析。 相似文献
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叶片数是烟草产量的重要构成因素，对提高烟农种烟收入和保证卷烟原料的供应有重要意义。低温易引起烤烟早花，导致叶片数减少，而韭菜坪2号可在高海拔地区种植，且叶片数不受影响。为揭示韭菜坪2号烤烟叶片数的遗传规律，本研究以叶片数较少的优质烤烟NC82和叶片数较多的烤烟品种韭菜坪2号为亲本，构建六世代(P1、P2、F1、F2、BC1和BC2)遗传群体，采用“主基因+多基因”混合遗传模型对韭菜坪2号的叶片数进行遗传分析。结果表明，最优模型为2MG-ADI,即受2对加性-显性-上位性主基因控制，2对主基因中加性效应起主导作用，且存在互效作用；主基因在F2、BC1、BC2世代的遗传率分别为62.72%、6.87%、45.51%,遗传率不高，可能受环境或其他因素的影响较大。本研究结果为韭菜坪2号叶片数基因的遗传和利用提供参考依据。 相似文献
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