血红素氧合酶-2基因真核表达载体的构建     

张腾业  ;王珍珍  ;陈仁金  ;袁红花  ;胡安康  ;吴连连  ;朱裕华  ;冀德君  ;朱孝荣 《家畜生态》2014,(6):27-30

为构建血红素氧合酶-2（HO-2）真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。试验利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用双酶切法将此序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP上,构建HO-2的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,重组载体经EcoRI和BamHI双酶切和测序鉴定。电穿孔法转染小鼠脑血管内皮细胞,48h后,实时定量PCR、Western blot检测HO-2在小鼠脑血管内皮细胞中mRNA和蛋白质水平的表达情况。结果表明,pEF1α-HO-2-AcGFP载体构建正确;重组载体转染小鼠脑血管内皮细胞后HO-2在mRNA水平表达量较空载体转染极显著增高（P〈0.01）,在蛋白水平表达量较空载体转染显著增高（P〈0.05）。表明HO-2基因的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP构建成功,为进一步研究其机制和功能奠定了基础。  相似文献   

中国牛属4个物种MSTN基因的遗传变异研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

冀德君  常洪  常春芳  耿荣庆  李永红 《畜牧兽医学报》2008,39(6)

针对牛肌肉生长抑制素基因（MSTN）3个外显子区设计引物,通过PCR扩增及测序,以蒙古牛、雷琼牛、独龙牛、巴音郭楞州牦牛共66个样本为材料检测了中国普通牛、瘤牛、大额牛和牦牛4个牛属该基因外显子区核苷酸序列的变异。结果显示,4个中国牛种的MSTN基因外显子1、2和3分别含375、372、381个碱基对,在所检样本中,发现7个核苷酸多态位点,定义17种单倍型;种内核苷酸歧异度（Pi）在0.000 36-0.001 03间,种间核苷酸歧异度（Dxy）在0.000 76-0.003 22间,说明群体内遗传多样性程度低;以单倍型序列为基础构建的分子进化树表明,牦牛的分化早于黄牛中普通牛和瘤牛的分化;大额牛明显分为2个类群,很可能是由于杂交造成的。  相似文献   

中国4个牛种MSTN基因外显子2多态性分析与其系统发生关系研究     

常春芳  冀德君  常洪  耿荣庆  李永红  马国龙  陈宏宇 《安徽农业科学》2008,36(14):5790-5792

[目的]解决牛亚科动物近缘物种的分类归属问题,了解牛亚科各种群遗传多样性。[方法]采用酚-氯仿抽提法从4个中国牛种中提取基因组DNA,对MSTN基因进行PCR扩增和测序,构建系统发育树,探讨4个牛种间MSTN基因外显子2的系统发生关系。[结果]MSTN基因外显子2编码区为372 bp。蒙古牛、牦牛和独龙牛的MSTN基因外显子2具有丰富的多态性。在所测66个样本中存在3个核苷酸多态位点,定义了6种单倍型。雷琼牛、蒙古牛、独龙牛与巴州牦牛享有共同的单倍型。巴州牦牛独自聚成一支,而雷琼牛与一部分独龙牛、大部分蒙古牛和引用瘤牛聚成一支。[结论]蒙古牛、雷琼牛、独龙牛种间存在着基因交流。牦牛与普通牛、瘤牛的分化较明显,比瘤牛与普通牛的亲缘关系要远。  相似文献   

中国荷斯坦牛乳铁蛋白基因5′侧翼区的遗传多态性与体细胞评分的关联分析     

王小龙  杨章平  陈仁金  毛永江  冀德君 《中国畜牧杂志》2012,48(15):12-14

利用PCR-R FLP技术检测了来自30个公牛家系的610头中国荷斯坦牛乳铁蛋白(LF)基因5′侧翼区的基因多态性,并用最小二乘法分析了不同基因型与乳中体细胞评分的关系。结果表明:扩增片段在LF基因启动子区的-3727(C/G)、-3717(A/G)存在连锁碱基突变,在所检测的样本中发现3种基因型CCAA、CGAG和GGGG,频率分别为0.674、0.300和0.026,等位基因G和A频率分别为0.824和0.176。该位点突变对体细胞评分达到极显著水平(P<0.01),GGGG基因型的体细胞评分数极显著小于CGAG和CCAA基因型(P<0.01),CGAG基因型的体细胞评分数显著小于CCAA基因型(P<0.05)。本研究结果表明,乳铁蛋白基因该突变位点对中国荷斯坦牛乳房炎抗性有很大的遗传效应,可用于中国荷斯坦牛分子标记辅助选择。  相似文献   

中国荷斯坦牛肛阴距离对繁殖性能的影响          下载免费PDF全文

唐程  郭佳禾  王梦琦  倪炜  张慧敏  李明勋  冀德君  杨章平  毛永江 《家畜生态学报》2012,40(11):59-64

  相似文献   

南方地区发酵床奶牛舍四个季节舍内环境卫生指标比较          下载免费PDF全文

甄永康  张振斌  顾亚兰  王珊  霍永久  冀德君  李佩真  王梦芝  贡玉清 《家畜生态学报》2012,41(1):58-61

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气相色谱法检测牛奶中脂肪酸组分方法的改进   总被引：1，自引：0，他引：1  

李云龙  杨章平  常玲玲  冀德君  王小龙  甘宗辉  刘姗  刘贤慧 《中国牛业科学》2012,38(3):18-21

[目的]为了找到并建立一套简单而高效的方法用来测定牛奶中脂肪酸的组分和含量。[方法]应用气相色谱(GC-FID)方法,采用Agilent HP-88专用脂肪酸甲酯毛细管柱和程序升温方法来分离牛奶中的脂肪酸组分,用保留时间定性和峰面积百分比法进行定量。[结果]表明:牛奶中的脂肪酸得到了很好的分离,该检测方法的回收率为99.588%,精密度为2.600,具有较高的准确性和重复度。[结论]本实验方法可以作为牛奶中脂肪酸检测的技术加以推广和应用。  相似文献   

雷琼牛肌肉生长抑制素基因序列研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

常春芳  常洪  冀德君  耿荣庆  李世平  李永红  马国龙  陈宏宇  宋光明 《家畜生态学报》2008,29(1):34-37

通过PCR方法对18头雷琼牛的MSTN基因进行扩增、测序.编码区序列分析结果表明:雷琼牛MSTN基因比外域瘤牛存在较丰富的多态性,共发现4个突变位点(2个转换,2个颠换),定义了6种单倍型,群体单倍型多样性较高(0.810±0.057);分析结果表明:MSTN基因的相关突变的发生可能早于Bos属瘤牛、普通牛、牦牛的分化;在瘤牛种内,我国南方的瘤牛可能是更原始的种群.  相似文献   

《家畜生态学》课程体系引入LCA思想的初探          下载免费PDF全文

冀德君  张威  顾秀秀  王文强  张少卿 《家畜生态学报》2018,39(5):94-96

文章简要介绍了全生命周期评价(LCA)的原理和一般应用步骤,并进一步探讨LCA方法在家畜生态学科研究中的应用领域及可能效果。同时提出在《家畜生态学》课程体系中适当介绍LCA思想和应用方法,可以加强家畜生态学科环境效应相关领域研究的全面性和可转化性。  相似文献   

金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎对中国荷斯坦奶牛乳中脂肪酸组成的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

李蕊  张成龙  耿晓晗  李锐  蒲俊华  毛永江  冀德君  杨章平  吴苏红  徐向前  陆春兵  任湘莲 《动物营养学报》2016,(2):426-435

本文旨在研究金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎对中国荷斯坦奶牛乳中脂肪酸组成及其绝对含量的影响。根据奶牛乳房结构,试验组利用通乳针将金黄色葡萄球菌细菌悬液经乳头管注射入奶牛乳房内,建立诱导型金黄色葡萄球菌型乳腺炎模型,对照组灌注磷酸盐缓冲液,采用气相色谱法测定乳中的脂肪酸绝对含量。结果表明:乳中共检出34种脂肪酸,金黄色葡萄球菌诱导对感染乳区脂肪酸合成产生直接影响。按不饱和度和碳链长度划分的6大类脂肪酸中,试验组在感染后11 h与感染前24 h相比,短链脂肪酸、中链脂肪酸和饱和脂肪酸的绝对含量均显著降低(P0.05);对照组有相同变化趋势,但除短链脂肪酸外均未达到显著水平(P0.05)。感染后23 h试验组6大类脂肪酸的绝对含量均低于对照组。结果提示:金黄色葡萄球菌诱导型乳腺炎影响了奶牛脂肪酸的合成过程,降低了脂肪酸各组分的绝对含量。  相似文献