胶体金免疫层析法检测猪PRV gE抗体方法的建立及应用     

边传周  郑鸣  任敏 《中国预防兽医学报》2006,28(2):204-207

利用PCR技术从猪伪狂犬病毒基因组中克隆gE抗原表位基因，并将其插入到载体pET-22b（＋）中，构建成原核表达质粒pET-22b（＋）-gE，使其在E．cobBL21（DE3）中诱导表达，经瘫点杂交证实表达产物具有抗原性。表达产物纯化后作为抗原，结合胶体佥标记技术，运用双抗原夹心法于国内首先建立了猪PRV gE抗体检测的免疫层析试纸务。该方法操作简单灵敏度高、特异性好，适合猪伪狂犬病的临床诊断。  相似文献   

分子生物学教学改革初探     

郑鸣  王永芬 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2008,28(1):60-61

21世纪是生命科学的世纪，分子生物学是生命科学中的重要组成部分，而且是生命科学中发展最为迅速并具有广泛影响的前沿学科。分子生物学是研究蛋白质、核酸等所有生物大分子形态、结构及其规律性和相互关系的科学。现在很多高校都设立了分子生物学课程，但都不同程度地存在满堂灌、注入式等老式教学方法，教学效果不好。这就要求我们授课教师结合“新世纪高等教育教学改革工程”，大胆进行教学改革，主动适应时代的要求，采用启发式、讨论式等先进教学方法，培养具有较强的获取知识和处理知识的能力、创新意识、全面发展的个性和开放的头脑的复合型人才。  相似文献   

如何预防电热器具引起的火灾     

郑鸣 《农村电工》2000,(1):39

近年来,各种家用电器悄然进入寻常百姓家,像电烤箱、电饭煲、电热炉、微波炉、电热毯等一些电热设备.人们在尽情享受现代生活的同时,往往忽视了这些电热器具所潜伏的火灾危险性.据统计,由电热器具引起的火灾呈逐年上升趋势,给国家和人民财产造成巨大经济损失.那么,如何预防这类火灾呢?1从思想上高度重视,克服麻痹思想.使用电热器具时,要有专人看管,离开电热器具时,必须切断电源.  相似文献   

双孢蘑菇出菇管理及病虫害防控技术     

李宇伟  连瑞丽  郑鸣  李先芳 《北方园艺》2011,(24):205-206

双孢蘑菇,又称洋蘑菇、白蘑菇,是世界上商品化栽培规模最大、生产量最多的菇类.在自然季节栽培双孢蘑菇,播种后约需40 d便进入出菇阶段,出菇期约4～5个月[1],此期间是提高产量和品质的关键时期,对该阶段的管理,就显得格外重要,因此要根据气候条件和出菇情况采取合理的调控,才能保证高产和优质.  相似文献   

胶体金免疫层析法检测猪瘟(强弱毒区分)抗体研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李华玮  郑鸣 《广东农业科学》2012,39(7):130-132,封3

以原核表达的重组猪瘟病毒E2蛋白为弱毒抗原,以猪瘟病毒(HCV)强毒株细胞培养物为强毒抗原,利用胶体金标记技术国内首次建立了HCV抗体检测(强弱毒区分)的免疫层析试纸条(双抗原夹心法)。研究结果表明,检测时只需将80μL待检测猪血清加于加样端20 min后观察结果即可。若观察区上端仅1条红色条带,即为HCV抗体阴性;2~3条条带即为HCV抗体阳性;若出现2条条带的位置为观察区上端和中间部位,即为HCV弱毒抗体阳性;若出现2条条带的位置位于观察区上端和下端部位,则为HCV强毒抗体阳性;若出现3条条带则HCV强弱毒抗体均为阳性。本试纸可很好地避免因试验操作造成的假阳性、假阴性,且操作简单、快速、简便、灵敏度高、特异好、不需特殊设备、价格低廉,20 min即可判断结果,且可区分强弱毒感染,适于基层实验室和现场检测。  相似文献   

猪Ⅰ型干扰素融合表达及其抗病毒活性检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

郑鸣  边传周  王老七  王永芬 《中国兽医杂志》2012,48(6):43-46

采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)技术将猪I型干扰素PoIFN-α和PoIFN-β成熟肽基因进行连接,构建表达载体pET30a-PoIFN-α/β进行融合表达,利用细胞病变抑制试验检测融合干扰素rPoIFN-α/β抗病毒活性,并与非融合干扰素rPoIFN-α和rPoIFN-β进行比较分析。结果表明,在PK-15细胞上,融合干扰素rPoIFN-α/β表现出较强的抗病毒活性,其对VSV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV、PASTV、PEDV和TGEV的抗病毒活性明显高于非融合干扰素,体现了一定的叠加效应,可以用于猪病毒性疾病的防治。  相似文献   

DNA疫苗的研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

郑鸣 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2009,29(2):15-18

DNA疫苗（DNA vaccine）又称“裸”DNA疫苗（naked DNA vaccine）、基因疫苗（genetic vaccine）,亦有核酸疫苗（nucleic acid immunization）、多核苷酸疫苗（polynuleotide vaccine）等相关名称,是近年来基因治疗研究中所衍生并发展起来的一个新的研究领域。它是指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。该疫苗既具有减毒疫苗的优点,同时又无逆转的危险,因此越来越受到人们的重视,被看作是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗。  相似文献   

猪源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究   总被引：2，自引：2，他引：0  

宁豫昌  赵绪永  郑鸣 《中国畜牧兽医》2012,39(9):65-68

从自然生长的健康猪肠道中分离到13株芽孢杆菌,通过生理生化试验初步鉴定其中9株为枯草芽孢杆菌,2株为巨大芽孢杆菌,1株为地衣芽孢杆菌,1株为凝结芽孢杆菌;对这13株芽孢杆菌分别进行了耐酸性试验、耐胆盐试验、体外抑菌试验和动物安全性试验。结果表明,其中1株地衣芽孢杆菌B7株和1株枯草芽孢杆菌B9株均有较强的耐酸、耐胆盐能力,对致病性大肠杆菌具有较好的体外抑制能力,且均安全无毒,可作为动物用益生菌制剂的候选菌种。  相似文献   

建立环介导间接PCR同时检测3种主要猪源性病毒     

郑鸣  边传周  王老七 《中国农业科学》2011,44(21):4499-4507

 【目的】建立同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的环介导间接PCR方法,实现3种病毒快速检测。【方法】根据GenBank数据库中猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的核苷酸序列设计3对特异性探针,利用PCR技术分别标记于大豆Lectin基因片段的两端形成3种不同的报告基因,此标记的报告基因与3种待测靶标基因经杂交、缺口补平、环化后,采用1对引物反向PCR扩增报告基因,建立了PCV2、CSFV和PRRSV的环介导间接PCR检测方法,扩增片段大小分别为564 bp、434 bp和338 bp,该方法即可用于单病毒检测又可用于多病毒检测。【结果】灵敏度和特异性试验结果表明,无论是单病毒检测还是多病毒检测,该法都具有高度特异性,与其它病原检测无明显交叉反应;对PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒同时检测的底限分别为0.8、25和6.2 pg•μL-1,和单个病毒的检测灵敏度相同。利用环介导间接PCR和常规PCR对20份临床样本进行比较检测,结果表明,无论单病毒检测还是多病毒检测,其结果均与常规PCR检测结果完全一致。【结论】环介导间接PCR检测技术可用于PCV2、CSFV和PRRSV 3种病毒的同时检测,是一种简便快速、灵敏、特异的病原学诊断工具。  相似文献   

食源性沙门氏菌PCR检测体系的建立及评估     

郑鸣  郑宝亮 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2010,30(1)

为建立食源性沙门氏菌实时定量PCR检测体系,实现快速检测。根据GenBank数据库鼠伤寒沙门氏菌的invA基因序列(AE008832)设计引物,建立沙门氏菌实时定量PCR检测方法,通过标准曲线的建立和对40份牛奶和40份生肉进行检测评估检测体系的灵敏度和特异性。结果显示标准曲线相关系数为0.999,检出底限约8个细菌/反应。40份牛奶和40份生肉检测阳性率分别为2.5%和5%,与传统细菌分离检测结果完全相符。实时定量PCR检测沙门氏菌具快速、灵敏的优点,适宜于食品中沙门氏菌污染的调查及监测。  相似文献