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猪圆环病毒3型（PCV3）是影响我国养猪业的重要病原之一,目前尚无商品化疫苗用于防控该病。Cap蛋白是PCV3主要的抗原蛋白。为构建高水平表达可溶性PCV3 Cap蛋白的工程菌株,对Cap蛋白NLS序列进行定点突变,构建重组表达载体pPICZαA-PCV3,经转染、酵母细胞表达以及纯化,最终获得可溶性PCV3 Cap蛋白。随后对纯化蛋白进行Western Blot验证及电镜观察。结果显示：获得的PCV Cap蛋白大小约27 kDa;电镜下观察可见均一的病毒样颗粒（VLP）,颗粒直径约18 nm。PCV3 Cap蛋白在酵母细胞中的成功表达为进一步开发Cap蛋白亚单位疫苗奠定了基础。 相似文献
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为研究亚硒酸钠对游离脂肪酸 (free fatty acid,FFA) 致体外培养大鼠肝细胞凋亡和线粒体膜电位降低的保护作用,本试验通过胶原酶两步灌流法分离培养肝细胞,在细胞培养液中添加FFA和亚硒酸钠 (0.1 μmol/L)测定细胞的凋亡情况、细胞功能和线粒体膜电位。结果表明,随着培养液中FFA浓度的升高,细胞凋亡加重,肝细胞功能受到影响,线粒体膜电位降低且FFA的这种作用呈剂量依赖性;亚硒酸钠能抑制由FFA引起的肝细胞的上述变化。 相似文献
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为明确内生真菌嗜线虫镰刀菌（Fusarium nematophilum）NQ8GⅡ4菌株对枸杞根腐病的防效及作用机制,利用平板对峙法测定其对枸杞根腐病原菌（Fusarium oxysporum f. sp. lycium barbarum）菌丝生长的抑制作用,通过盆栽试验测定对枸杞根腐病的防治效果,并采用防御酶活性测定和组织化学染色分析其作用机制。结果表明,预先3 d接种NQ8GⅡ4菌株能显著抑制尖孢镰刀菌菌丝的生长,抑制率高达70.07%。拌土法接种NQ8GⅡ4菌株可显著降低温室中枸杞根腐病的发生,防效为76.38%,与化学药剂多菌灵防效相当。接种NQ8GⅡ4菌株显著促进枸杞生长,株高、侧枝数、叶宽、茎粗和根长分别比对照增加了37.61%、90.56%、52.50%、32.35%和44.69%。在病原菌胁迫下,接种NQ8GⅡ4后21 d与不接种相比POD、SOD、PAL和CAT活性分别增加33.92%、65.64%、57.96%和41.59%,MDA含量减少44.23%。说明接种NQ8GⅡ4菌株可以促进枸杞幼苗生长,激发植株体内防御酶活性,缓解病原菌胁迫导致的膜脂过氧化作用,进而提高... 相似文献
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郭苗苗 《安徽农业大学学报》2019,28(1):131-134
清代时期,辽宁地区高粱种植占有绝对优势.县产诸谷,以高粱为大宗,种类繁多,名称各异.高粱的
广泛种植使其在粮食种植结构中的地位迅速提高,甚至超越大豆,成为当地最主要的农作物.究其
原因,人口激增带来的粮食供给压力,耕地不足造成扩垦土地的需求,高粱习性适合辽宁地区农业种
植条件,满足社会需求等因素,共同促成清代辽宁地区高粱广泛种植的局面. 相似文献
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血凝素(hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的主要抗原之一,原核表达HA是该抗原特性研究和疫苗制备的关键。利用分子生物学方法构建H5N1亚型的禽流感病毒HA基因原核表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta菌株,用不同IPTG浓度和时间诱导HA表达,检测蛋白表达量,分析不同诱导条件对HA表达效率的影响,以确定最佳诱导条件。重组表达载体pET32a-HA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定,获得预期大小的DNA片段,说明HA基因成功插入质粒pET32a。Western blot检测结果表明,IPTG诱导重组菌株成功表达HA蛋白,当诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h时,HA蛋白表达量最高。研究结果为HA抗原制备及禽流感疫苗的研究奠定基础。 相似文献
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以欧洲丁香(Syringa vulgaris)花序和花序轴作为外植体,研究基本培养基类型、植物激素类型和质量浓度对欧洲丁香愈伤组织诱导的影响,并通过正交试验研究锥形瓶容积、初始液体培养基体积、旧培养基保留比例、接种质量及抗氧化剂质量浓度对悬浮培养愈伤组织增殖效果的影响。结果表明：最优花序轴愈伤组织诱导培养基为改良型Blaydes+苯基噻二唑基脲(TDZ)0.10 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)1 mg/L,最优诱导花序愈伤组织的培养基为MS培养基+TDZ 0.10 mg/L+2,4-D 1 mg/L,诱导率均为100%。2,4-D质量浓度显著影响花序和花序轴愈伤组织诱导率(p<0.05),TDZ与2,4-D联合作用显著影响花序轴愈伤组织诱导率(p<0.05)。悬浮培养的最优组合为锥形瓶容积250 mL、初始液体培养基体积150 mL、旧培养基保留1/4、接种质量7.0 g,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)质量浓度100 mg/L,维生素C(Vc)质量浓度75 mg/L。首次以欧洲丁香花序和花序轴为材料建立了愈伤组织诱导和细胞悬浮培养体系,为后续开展工厂化育苗和遗传转化... 相似文献
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