致仔猪脑膜炎猪链球菌的分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈申申  马家乐  张新锋  曲向阳  潘子豪  姚火春 《畜牧兽医学报》2019,(1):143-150

旨在从脑膜炎症状仔猪的脑组织及其他脏器中分离鉴定病原菌。采集患病仔猪脏器分离病原,通过PCR及血清凝集试验鉴定其种属及血清型;透射电镜观察分离株的超微结构;经多序列位点分型分析,鉴定其ST型;通过测定最小抑菌浓度分析其耐药性;经小鼠攻毒试验分析其毒力。结果:最终从患脑膜炎仔猪的脑组织中分离到一株猪链球菌,血清型为9型,将其命名为WH1609。电镜结果显示WH1609有荚膜结构。多位点序列分型结果表明WH1609属于一个新的ST型。耐药性试验结果表明WH1609对多种抗生素耐药;对万古霉素、青霉素及氨苄西林敏感。BALB/c小鼠毒力试验测得LD50为1.89×10~2 CFU·mL^-1,病理组织学观察结果显示WH1609感染小鼠可出现明显的脑组织病变。本研究从患脑膜炎的仔猪脑组织中分离到一株猪链球菌9型强毒株,其在BALB/c小鼠的半数致死量为已发现的猪链球菌强毒株的10~5倍以上,对猪链球菌致脑膜炎分子机制的研究有重要的意义。  相似文献   

银鲫外周血细胞形态学观察     

冷欣彦  马家乐  尹珺伊  田菁  黄国庆 《畜牧与兽医》2010,42(9)

应用常规瑞氏吉姆萨(G-W)染色和Feulgen反应,对银鲫外周血涂片进行了光镜观察,显微摄影后进行图像测量和分析。进一步用流式细胞仪进行了DNA含量的分析。结果显示,银鲫的红细胞在血液中存在幼稚和衰老现象,红细胞核残影广泛存在,白细胞可以区分出中性粒细胞、单核细胞、血栓细胞和淋巴细胞。嗜酸粒细胞极少,嗜碱粒细胞未被检出。Feulgen反应检测DNA含量为4.71 pg,流式细胞检测DNA含量为5.39 pg。  相似文献   

氨基酸代谢变化引起的c-di-GMP稳态波动对大肠杆菌致病过程中菌毛合成的影响     

孙敏  高兴  任方勋  白乾坤  泮欣铭  马家乐  姚火春 《南京农业大学学报》2022,(1):113-123

[目的]细菌能够合成多种信号分子,调控自身在各种营养状态或应激条件下的生长代谢及毒力发挥。第二信使环二鸟苷酸(c-di-GMP)在致病菌感应氨基酸饥饿(AAS)的过程中发挥重要作用,调控多种生理活动并显著影响其毒力发挥。本文旨在研究c-di-GMP在尿道致病性大肠杆菌(UPEC)尿道定殖及毒力发挥过程中的作用。[方法]采用尿液培养UPEC,结合转座子突变技术筛选氨基酸代谢相关生长缺陷基因,采用基因敲除技术、特定氨基酸回补及小鼠尿道感染模型验证尿液生长及尿道定殖缺陷表型;借助表达谱数据、RT-qPCR及β-半乳糖苷酶活性测定法筛选并鉴定受氨基酸饥饿影响的毒力基因及c-di-GMP相关基因;通过多基因敲除及回补技术、凝胶阻滞试验(EMSA)鉴定c-di-GMP对毒力基因的调控机制。[结果]精氨酸、异亮氨酸及蛋氨酸代谢失衡引起UPEC在尿液中生长缺陷,尿道定殖能力显著下降及局部c-di-GMP稳态破坏;YciR及YcgF相关c-di-GMP体系失衡显著下调菌毛基因簇表达;YciR通过调节子MlrA直接调控P菌毛基因簇表达;YcgF通过下游配对调节子YcgE直接调控P菌毛基因簇表达。[结论]c...  相似文献   

摄铁系统及自分泌毒素对猪源肠外致病性大肠杆菌毒力发挥的影响     

于勇  泮欣铭  章雅婷  任方勋  姚火春  马家乐 《畜牧与兽医》2022,(5):113-120

为了探究猪源肠外致病性大肠杆菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli, ExPEC)的致病机制，本研究通过小鼠感染模型筛选强毒菌株，以PU-1为强毒代表株进行全基因组测序(染色体登录号CP042246,质粒登录号CP042245)及分析，以铁摄取系统及自分泌毒素为关注点探究上述毒力因子在PU-1株中的编码情况，并构建单基因或多基因缺失株，探究摄铁系统及自分泌毒素在猪源ExPEC致病过程中的作用。结果显示：摄铁系统及自分泌毒素基因在血液定殖的细菌中不同程度上调，最高上调可达11倍；铁摄取系统相关基因缺失株fyuA-ybtQFX、ΔiroBCDEN、Δfur及ΔsitABCD^Both对感染小鼠的致病力与野生株相比显著减弱，在感染动物血液载菌量不同程度下降，最高下降至野生株的1/15左右；自分泌毒素相关基因缺失株Δvat及ΔcdtABC对感染小鼠的致病力与野株相比显著减弱，在感染动物血液载菌量下降至野生株的1/2左右。上述结果表明，摄铁系统FyuA-YbtQFX、IroBCDEN、SitABCD及SitABCD-Plas...  相似文献