猪YTHDF2蛋白原核表达及多克隆抗体的制备     

黄童  杜柳阳  张宇  顾金燕  周继勇 《畜牧与兽医》2019,(8):90-95

YTH家族蛋白2(YTH domain-containing family protein,YTHDF2)作为一种m~6A修饰的结合蛋白,可对底物mRNA的剪接,翻译,降解等过程进行调控。本研究通过RT-PCR首次获得了猪YTHDF2编码基因序列,全长1 743 bp,编码580个氨基酸,基因进化树分析显示该基因在各物种间保守性较高。将猪YTHDF2编码基因克隆至原核表达载体pET-28a (+)中,重组质粒pET-28a (+)-YTHDF2在大肠杆菌BL-21菌株中进行原核表达,成功获得了大量带His标签的猪YTHDH2重组蛋白,大小约70 kD。以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备猪YTHDF2多抗血清,ELISA结果表明制备的兔抗猪YTHDF2多抗血清效价为1:204 800,间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验均表明该多克隆抗体具有良好的反应性和特异性。猪YTHDF2基因序列的获得及多克隆抗体的制备为进一步研究YTHDF2在猪mRNA m~6A甲基化过程中的生物学功能奠定了基础。  相似文献   

穿心莲内酯超声提取工艺研究     

赵咏梅  齐建红  黄童 《陕西农业科学》2019,65(7):44-46

以穿心莲全草粉末为原料,采用正交试验方法优选出超声提取穿心莲内酯的最佳工艺。结果表明,穿心莲内酯超声提取的最佳提取条件为A3B1C1。即,乙醇浓度为90%,溶剂体积为药材的8倍量,超声提取时间为10min,穿心莲内酯的含量为23.7%。  相似文献   

营养莲子复合粉的研制     

揭小玲  郑婉真  黄童嵊 《现代农业科技》2022,(16)

本试验以五夫莲子为原料制备莲子粉,再搭配薏仁粉、山药粉、茯苓粉和糯米粉,通过单因素试验和正交试验探讨营养莲子复合粉的最佳工艺配方。结果表明,莲子粉制备的工艺参数为：140 ℃烘烤30 min,粉碎后过100目筛;营养莲子复合粉的最佳制备配方用量为：莲子粉15.0 g、薏仁粉5.0 g、山药粉2.0 g、茯苓粉2.0 g、糯米粉1.0 g,所得产品色泽均匀呈杏色,香味协调并带有适宜的莲子清香,口感细腻、冲调性好。  相似文献