稀释液渗透压对绵羊精液冷冻效果的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

曾培坚  王立铭 《中国畜牧杂志》1992,28(4):17-19

本试验对绵羊冻精采用两次稀释时,从调整Ⅱ液中葡萄糖含量和降低甘油浓度两方面,改变稀释液的渗透压,测定冻精效果。先增减糖的比例,配制9-2(对照), 84-1和84-2等试验组,其稀释Ⅱ液渗透压1191,1026、1499mmol/kg,获冻精情期产羔母羊率61.69, 63.31, 54.55(P<0.05)。随后, 以84-1为对照,降低甘油浓度,设3个试验组,即87-2,88-1和88-1a,渗透压相应为747,456,463mmol/kg,冻精情期受胎率1987年84-1,87-2为65.37,67.37;1988年87-2,88-1,88-1a为63.16,62.50,46.55(P<0.05)。试验说明,绵羊冻精采取2次稀释法,第Ⅱ液以4％甘油,渗透压为747mmol/kg时,冻精效果最佳。  相似文献   

不同发育时期菊芋块茎DNA提取效果比较研究     

宋向阳  赵孟良  王丽慧  李莉 《种子》2017,(7)

为筛选菊芋块茎DNA提取的适宜生育时期,以“青芋1号”菊芋品种为试材,用改良CTAB法对不同发育时期菊芋块茎DNA进行提取,经琼脂糖凝胶电泳及全波长分光光度计检测总DNA的纯度、浓度及质量,选用4条ISSR引物进行PCR验证.结果表明:不同发育时期提取菊芋块茎DNA效果较好,DNA浓度呈现单峰曲线变化,峰值出现在第9周,与琼脂糖凝胶电泳检测呈现的亮度结果一致,PCR验证结果显示,提取的DNA能够满足后续相关分子生物学的要求.  相似文献   

番石榴ISSR-PCR最适反应体系的建立与验证     

宁琳 《中国果业信息》2017,46(4)

为更好的将ISSR标记应用于番石榴种质研究,本研究以“维邦2号”番石榴DNA为筛选体系试验材料,采用单因子试验对ISSR反应中Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度、DNA浓度进行了优化。实验结果表明,番石榴20µl最适反应体系为：2.0µl 10×Buffer,1.0mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,0.8mmol/L引物,0.2U Taq酶,10ng的DNA。利用该反应体系,选用引物UBC810对9份番石榴种质进行PCR反应,再选取“南宁本地番石榴实生2号”DNA作为模板对8条ISSR引物进行PCR反应,对所确立的扩增体系进行验证。结果显示扩增产物条带多态性丰富,且特异性强、重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于番石榴的ISSR分子标记。  相似文献   

利用RAPD-PCR与ISSR-PCR标记技术分析长江口刀鲚的群体遗传结构   总被引：1，自引：0，他引：1  

张媛  胡则辉  周志刚  陈亚瞿 《上海海洋大学学报》2006,(4):390-397

利用RAPD-PCR及ISSR-PCR两种分子标记技术对长江出海口两年3个群体的52条刀鲚（Goiliaectenes）进行群体遗传结构的分析。在3个群体中，利用RAPD-PCR标记技术，15个10bp随机引物共检测到110条带，多态性为0．490～0．657，Shannon多样性指数为18．63～22．38，Nei平均遗传距离为0．1195～0．1454；而利用11个ISSR引物所获得的相应结果分别为67、0．576～0．682、11．56～13．66以及0．117～0．147。相关性分析表明这两种技术所获得的上述数据呈正相关（r=0．95，P〈0．05）。AMOVA结果显示，3个群体按采集时间划分成的两年之间的遗传变异不超过总变异的1．1％，同一年内群体间的遗传变异也分别只占总变异的6．99％（RAPD）和2．75％（ISSR-PCR），群体内各个体之间的遗传变异占总变异的96％（P〈0．0001），说明两年内所采集的3个群体之间基本上没有产生遗传分化。基于样品之间的Nei遗传距离所构建的Neighborjohing聚类图也清楚地显示出没有按采样的时间产生群体的遗传分化。对各样品之间的Nei遗传距离及Neighbor-joining聚类图分别经Mantel检测及支序分析，发现ISSR-PCR技术所获得的结果与RAPD-PCR技术的结果不存在明显的正相关，但ISSR-PCR标记技术具有在待测样品中能检测到高多态性等优点。  相似文献   

龙眼ISSR-PCR反应体系的优化及指纹图谱初探   总被引：2，自引：1，他引：2  

姜帆  高慧颖  陈秀萍  李韬  杨凌  郑少泉 《福建农业学报》2007,22(3):256-260

以立冬本龙眼DNA为模板研究了龙眼ISSR-PCR反应体系的主要成分对ISSR扩增结果的影响,并探讨了构建龙眼指纹图谱的可行性。结果表明:在25μL的PCR反应体系中Mg2 的最适浓度为2.0 mmol.L-1;dNTP最适浓度为0.2 mmol.L-1;引物的最适浓度为0.7μmol.L-1;模板20 ng;Taq DNA聚合酶用量为1.5 U。利用优化后的反应体系对福建不同地区龙眼基因型进行了ISSR扩增,扩增产物在250 bp~2 kb;利用丰富的多态性DNA谱带构建了12个基因型龙眼的指纹图谱。  相似文献   

利用ISSR标记对12种五针松亲缘关系的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

刘桂丰  董京祥  姜莹  吕艳芳  姜静  赵光仪 《林业研究》2005,16(3)

采用ISSR 标记技术,对12 种五针松的亲缘关系进行分析。利用筛选出的12 个ISSR 引物共检测到117 个位点,多态条带比率(PPB)在9.40%～33.33 %之间,遗传分化最高的是偃松,最低的是柔枝松。12 种五针松的基因多样性(Ht)为26.21%,其中种内基因多样性(Hs)为7.66%,种间基因多样性(Dst)为18.55%,五针松种间变异占总变异的70.78%。遗传距离聚类,将12 种五针松分为2 个类群,第一类群包括乔松、华山松、海南五针松、华南五针松、北美乔松、山白松和云南五针松;第二类群包括美国白皮松、偃松、、柔枝松、西伯利亚红松和红松。图1 表3 参6。  相似文献   

龙荔基因组DNA的提取及ISSR-PCR体系的建立与优化   总被引：5，自引：1，他引：5  

潘丽梅  朱建华  秦献泉  彭宏祥  卢美英 《西南农业学报》2009,22(1)

应用改良的CTAB法提取龙荔基因组DNA,探讨龙荔ISSR-PCR扩增反应体系的建立和优化。结果表明,经过改良的CTAB法提取龙荔基因组DNA效果良好,所提取的DNA纯度较高,符合ISSR-PCR反应的要求;龙荔ISSR-PCR最佳反应体系（反应总体积20μl）：1&#215;Buffer缓冲液（含适量Mg^2＋）,1 UTaqDNA聚合酶,0.20 mmol/L dNTP,0.25μmol/L引物,DNA模板70-80 ng/μl,退火温度53-54℃。  相似文献   

漾濞泡核桃ISSR-PCR反应体系的建立和优化     

周林涛  陆斌  周军 《林业调查规划》2014,(1):14-17

以漾濞泡核桃优株为研究对象,研究其ISSR-PCR反应体系中的5个影响因子(模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度)对PCR扩增效果的影响,从而建立起漾濞泡核桃的最佳ISSR-PCR反应体系。结果表明:模板DNA最佳浓度为50 ng/(25μL),Taq聚合酶浓度为0.75U/(25μL),引物浓度为0.7mmol/L,dNTPs浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.0mmol/L,利用该最佳体系对试验中所选取的样本进行扩增反应。建立了适宜于漾濞泡核桃的ISSR-PCR扩增的最佳体系,该体系的建立为利用ISSR分子标记技术对漾濞泡核桃进行种质资源研究奠定了基础。  相似文献   

早期断奶对母猪繁殖性能影响的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

张建生  李齐贤 《中国畜牧杂志》1993,29(6):6-7

按母猪泌乳期(28天、35天和45天)设3组,选二花脸经产母猪20头,大约克经产母猪35头,断奶至发情、配种和下次繁殖的繁殖周期:二花脸母猪Ⅰ组分别为5.75天、8天和149.25天,Ⅱ组分别为5.1天、7.3天和156.5天,Ⅲ组分别为4.9天,7.0天和166天;大约克母猪Ⅰ组分别为5.2天、7.2天和149.2天,Ⅱ组分别为4.7天、6.7天和156.2天,Ⅲ组分别为4.2天、6.2和165.5天。各品种各组合的情期受胎率均为100％;同品种内各断奶日龄组间的产仔数、产活仔数和初生窝重均无明显差异(P>0.05)。  相似文献   

战骨ISSR-PCR反应条件的筛选与优化     

史艳财  邹蓉  孔德鑫  王雄军  韦记青 《种子》2011,30(7)

采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立并优化战骨ISSR-PCR反应体系和程序,即25μl的体系中合Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,引物0.8μmol/L,模板DNA 50 ng,10×Buffer 2.5μl.退火温度、循环次数分别为52℃、45次.结论:结合正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系.该体系稳定、可靠,可用于战骨遗传多样性分析.  相似文献