超表达OsPR1A增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性反应     

刘玉晴  燕高伟  张彤  兰金苹  郭亚璐  李莉云  刘国振  窦世娟 《中国农业科学》2021,54(23):4933-4942

【背景】前期研究发现,水稻病程相关蛋白质OsPR1A的表达受上游抗病基因Xa21调控,接菌后早期启动Xa21介导的OsPR1A较高水平表达对水稻抵抗白叶枯病菌至关重要。同时OsPR1A也受到水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo）的诱导表达。对于OsPR1A的研究绝大部分是作为抗性反应发生的标志基因佐证其他基因或途径在抗性中的作用,缺乏直接的证据证实OsPR1A本身的生物学功能。【目的】通过获得OsPR1a-OX超表达转基因植株,调查其表型及农艺性状,并明确OsPR1A蛋白质表达与抗性的关系,为鉴定OsPR1A功能提供依据。【方法】通过农杆菌介导法,将构建的OsPR1a-OX转化载体转入到水稻受体4021中,利用PCR和免疫印迹（western blot,WB）技术分别在基因水平和蛋白质水平上筛选并鉴定OsPR1A超表达阳性纯合株系。在成熟期,调查OsPR1A超表达转基因植株的表型及农艺性状（株高、穗长、分蘖数、结实率和籽粒大小等）。在31℃条件下,将生长2周的水稻幼苗TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株接种水稻白叶枯病菌,并在接菌0、2、4、6、8、10和12 d时测量病斑长度。在接菌0、4和6 d时,收集TP309、4021和OsPR1A超表达转基因植株的水稻叶片,提取蛋白质,利用WB技术检测OsPR1A的表达特征。【结果】构建了OsPR1a-OX转化载体,并转入到受体4021中,筛选并鉴定到2个OsPR1A超表达转基因纯合株系（#704和#709）。调查了OsPR1A超表达转基因植株在成熟期的表型及农艺性状,与对照4021相比,#704和#709的株高较矮、穗长较短、分蘖数减少、结实率降低,但籽粒稍大,可能与结实率低有关。在31℃条件下,OsPR1A超表达转基因植株的病斑长度与对照4021相比明显缩短,结果具有显著性差异（P<0.05）。在接菌0、4和6 d的材料中,超表达转基因植株#704和#709中OsPR1A始终有较高水平的表达丰度,从而提高了对白叶枯病菌的抗性。【结论】采用农杆菌介导法,获得OsPR1A超表达转基因植株;超表达OsPR1A影响到水稻的正常发育过程;超表达OsPR1A后增强了Xa21介导的水稻对白叶枯病的抗性。  相似文献   

高品位茧丝蚕品种“川山×蜀水”原种性状及繁育配套技术     

《四川蚕业》2021,(1)

介绍了"川山×蜀水"原种性状。通过加强桑园管理、饲育管理、防微控微、防混防杂、种茧保护等关键环节的配套技术处理,提高"川山×蜀水"原种的繁育质量。  相似文献   

基于公众参与的城市微更新公平性探讨——以宿州市埇桥区为例     

王钰  刘娜  杨文 《河北北方学院学报(自然科学版)》2019,35(9)

目的针对城市微更新中公众参与存在的公平性问题,以问卷调查与走访询问等形式分析总结现状,并提出相应的对策建议,在完善公众参与的基础上提升城市微更新的公平性。公众参与的城市微更新项目中各方作用将更加均衡、信息获取更全面、参与规划师更多元。方法以宿州市埇桥区为研究对象,通过电子与纸质版问卷以及现场走访等形式进行调查,了解公众对公众参与的了解程度以及在城市微更新项目中的参与程度等。结果公众在埇桥区实际项目中仍存在对公众参与了解少、参与程度低、参与有效性差等问题。结论提出加大项目宣传力度、普及公众参与相关知识、均衡公众参与各方作用、保障公众参与过程顺畅、保证公众参与意见有效性、提升法律保障权威性的措施意见,有效提升城市微更新中公众参与的公平性。  相似文献   

微生态制剂对葡萄抗病能力及果实品质的影响     

王宇  善文辉  杨顺林  郭淑萍  杨芳  王琦 《北方园艺》2021,(4):34-40

以云南、四川主栽的4个葡萄品种为试材,在常规用药方式基础上辅以微生态制剂,测定其对葡萄酸腐病和黑曲霉病防控效果及对果实品质的影响,以期为有效防控葡萄酸腐病和黑曲霉病的发生,解决生产实践中的具体问题提供科学参考依据。结果表明:微生态制剂能提高葡萄果粒大小和百粒质量,同时增加糖酸比。在传统用药基础上使用绿康威,对葡萄酸腐病和黑曲霉病的防效最佳,分别达52.3%和42.4%;在传统用药基础上使用绿地康3号,其防效为31.3%和21.9%,均表现出良好的防效;前期使用化学药剂,后期单独使用微生态制剂对酸腐病的防效不太明显。  相似文献   

复合微生态制剂对南方沿海地区奶山羊夏季生产性能的影响     

李焱辉 《当代畜牧》2019,(3)

珠海夏天天气炎热,高温高湿,加上舍饲规模化生产改变了奶山羊的生活习性,对奶山羊的生产性能影响较大。复合微生态制剂能够维持肠道菌群平衡,培育优势菌群,产生大量内生消化酶,提高动物增重和饲料转化效率;调节免疫机能,增强抵抗力,在泌乳期的草食动物中应用有明显效果。笔者从泌乳奶山羊羊群中,选择体型、产奶量、年龄相近的健康奶山羊20只,随机分成2组,每组10只,进行称重并编号,给每只奶山羊每天添加1g复合微生态制剂(上海创博生态工程有限公司富酶利生素)。试验期间,试验组比对照组平均每天产乳量增加0.63 kg/只,体重增加0.45 kg/只。整个饲养过程中无病害发生,采食量改善明显,增产效果明显。  相似文献   

白屈菜CmFAD2基因的克隆及植物转化载体构建     

赵露  李俊  周新芳  苑雪琪  朱雅静  魏云洁  许永华 《分子植物育种》2020,(6):1876-1882

通过对白屈菜低温应答过程的转录组分析发现膜脂不饱和化相关基因的表达在一定过程中发生变化,脂肪酸去饱和酶基因FAD2在随温度的变化趋势为正"V"型,且表达量变化显著。利用NCBI等在线软件对序列进行相关生物学信息分析,并对白屈菜FAD家族成员FAD2基因的完整开放阅读框(ORF)进行克隆,并命名为CmFAD2。选用克隆载体pMD-19-T,转化大肠杆菌DH5α,测序验证序列正确性及完整性。将目的基因与植物表达载体pRI-201-AN连接构建重组DNA pRI-201-AN-Cm FAD2,电击法转化农杆菌LBA4404,利用菌液PCR法验证成功。该基因可作为药用植物抗寒品种创制的候选基因。  相似文献   

高职食品与药品类专业“基础化学”教学改革与实践     

宁波  胡■丹  崔珊珊  张栩  宋笛  耿敏 《农产品加工．学刊》2020,(4):110-111,114

“基础化学”理论和实验教学质量的“高与低”在一定程度上直接关乎高职院校与化学相近专业人才培养的“成与败”。以教学改革为切入点,在“基础化学”教材建设和系列微课的制作及应用2个维度上,探讨提升“基础化学”课程教学质量的具体措施。  相似文献   

动物免疫学实验教学实践与探索     

李海花  邵华  李留安  胡烨  丁巧玲  赵瑞利 《山东畜牧兽医》2021,(4):39-41

动物免疫学实验教学是动物医学和动物药学专业的重要课程,具有临床应用广泛的特点。通过改革动物免疫学实验课程的教学体系,以达到应用型本科人才培养目标要求。根据动物免疫学实验教学目的和要求,设计优化实验项目,把知识点录制成微课程并在课前上传授课班级供学生学习,在线下课堂开展设计性和综合性实验,教师全程在旁答疑、启发、纠错和指导,课后借助思维导图和案例分析题进行知识巩固和拓展。  相似文献   

基于II型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体     

周奕阳  李鹏  谭之磊  邓子新  贾士儒  欧竑宇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2019,45(2)

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。  相似文献   

马疱疹病毒1型主要毒力基因分析及TK基因缺失载体的构建     

范斌  陈卓  刘建华  鲍子磊  胡月  贾钦瑞  王雪竹  冉多良 《中国畜牧兽医》2018,45(10):2681-2690

为了解新疆马疱疹病毒1型（EHV-1）主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株，本研究以EHV-1 XJ2015株DNA为模板，对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析，并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR，构建质粒pUC-TKLR，将扩增后的增强绿色荧光蛋白（EGFP，含有CMV+polyA）插入pUC-TKLR质粒，构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示，XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高，分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%；与EHV-3分离株同源性均最低，分别为72.9%、59.4%和62.1%；遗传进化分析显示，3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支，与EHV-9和EHV-4进化关系较近，但与EHV-3进化关系较远，表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显，没有明显的地域性特征，功能基因保守且进化缓慢，同源基因功能相同或相近；经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定，本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建，为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。  相似文献