广东果树上17种拟茎点霉的RAPD分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

姜子德  梅曼彤  戚佩坤 《植物病理学报》2003,33(1):35-39

 自320个随机引物中筛选出适于拟茎点霉属真菌种间亲缘关系分析的15个随机引物,并优化了RAPD分析的扩增体系,在此基础上,对广东果树上17种拟茎点霉进行了RAPD分析。各菌株间的Nei相似系数UPGMA法聚类结果表明:来源于不同地区的2个Phomopsis mangiferae Ahmad菌株和2个P.macadami Z.D.Jiang et P.K.Chi菌株都分别以0.636和0.589的相似系数两两首先聚在一起,而不同的种则只在小于0.54的相似系数范围内聚类,体现了种间及种内的亲缘关系差异程度;聚类群与寄主植物不具相关性,同种植物上的不同拟茎点霉,即使是分自相同寄生部位也不能聚在一类;支持形态学上将生于柑桔枝和黄皮茎、沙梨叶和果、杨梅叶和枝以及同是生于龙眼叶的共8个拟茎点霉分别鉴定为不同的种,而不支持将P. cytosporella Penz.et Sacc.与P. mangiferae合并为一个种的观点;RAPD技术可作为拟茎点霉属真菌种间的亲缘关系分析的重要手段。  相似文献   

耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

《四川畜牧兽医》2003,30(B09):28-28

  相似文献   

随机扩增多态DNA技术在食用菌研究中的应用     

《作物育种信息》2005,(6):2-2

RAPD(Bandom Amplified Polymorphic DNA)，即随机扩增多态DNA，是1990年由威兰斯(Willams)和韦尔什(Welsh)两个研究小组几乎同时建立和发展起来的一种新型遗传标记技术。由于其具有独特的检测DNA多态性的方式及快速、简捷、高效等优点，因而在短短的时间内RAPD技术已渗透到有关基因研究的各个领域。本文简单介绍RAPD技术在食用菌研究中的应用。  相似文献   

捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

杜爱芳  李孝军  侯玉慧  王素华 《畜牧兽医学报》2005,36(4):387-390

参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物，以H．contortuss ZJ株的总RNA为模板，进行RT—PCR扩增，成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后，转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。序列分析表明，其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99．5％。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列，推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。  相似文献   

藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

杨晓军  赵有璋 《中国草食动物》2003,23(2):3-6

以高原型藏羊的基因组DNA为模板，通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验，建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系：在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中，模板DNA的量为60－120ng，引物量为4－8pmol，Mg^2 浓度为2.0mM，Taq DNA聚合酶为1－2.5U,dNTP浓度为150－200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为：94℃1分钟，36℃1分钟，72℃2.5分钟，最后72℃延伸10分钟，利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析，其结果的重复性和可靠性大为提高。  相似文献   

姬松茸与双孢蘑菇不同菌株的RAPD扩增研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

李三暑  林新坚  陈惠成  雷锦桂  林勇  江枝和 《食用菌学报》2002,9(3):1-4

以4个姬松茸菌株和2个双孢蘑菇菌株为材料，用20个随机引物对它们进行RAPD扩增，通过对供试菌株遗传相似系数的估算和系统聚类分析，构建姬松茸和双孢蘑菇遗传相关树状聚类图谱，结果表明，进行RAPD扩增的20个随机引物中，有12个能产生三种带型，当遗传相似系数升至0.8713时，这6个菌株被分为3类，第一类为菌株18和26，第二类为菌株13和12，第三类为菌株33和45。  相似文献   

刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化   总被引：13，自引：2，他引：13  

文晓鹏  邓秀新 《果树学报》2003,20(1):35-39

以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验。结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2mmol/LdNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2UTaqDNA多聚酶。经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用“Touchdown”扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0mg/L)和TaqDNA多聚酶(3.0U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础。  相似文献   

小菜蛾对溴氢菊酯抗药性的随机扩增多态性DNA分析          下载免费PDF全文

程罗根  陈之浩  李凤良  李忠英  韩招久 《植物保护学报》2003,30(1):81-85

利用室内选育119代的抗溴氰菊酯小菜蛾Plutella xylostella品系和敏感品系，通过反复回交和自交建立近等基因系。用Operon公司合成的20个引物对近等基因系基因组DNA进行PCR扩增。3个引物在抗性品系中分别产生1条特异扩增带，4个引物在敏感品系中分别产生了1～5条特异扩增带。由于在近等基因系中，除了与抗性相关的基因区外，其它的遗传背景是相同的，因此可以认为这些特异带与小菜蛾对溴氰菊酯的抗性有关。  相似文献   

扩增片段长度多态性（AFLP）在动物遗传育种中的应用进展     

赵静  单雪松 《家畜生态》2004,25(4):177-178,182

AFLP是一种新的分子遗传标记技术，它结合了RFLP和PCR技术的优点，具有RFLP的稳定性和PCR的高效性，被称为“最有威力的分子遗传标记”或“下一代分子标记”。相对于国外而言，我国在这方面的研究还比较少。本文综述了扩增片段长度多态性(AFLP)这种遗传标记的原理、技术特点、技术发展及其在动物遗传多样性、种质鉴定、遗传图谱构建、基因定位和标记辅助育种等研究中的应用。  相似文献   

应用聚合酶链式反应鉴定新疆棉花落叶型黄萎病菌   总被引：9，自引：0，他引：9  

张莉  段维军  李国英  宋蓓 《植物检疫》2004,18(5):266-268

用一对棉花落叶型黄萎病菌的特异性引物D1和D2进行PCR扩增,对于落叶型黄萎病菌,该对引物可特异性地扩增产生一段550bp的产物,而非落叶型黄萎病菌则不能被扩增.供试的35个新疆黄萎菌系中,有3个菌系扩增出550bp大小的落叶型黄萎病菌特异性片段,表明目前新疆已存在落叶型黄萎病菌,用此技术可快速、准确地检疫和鉴定落叶型黄萎病菌.  相似文献