粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响     

王蒙蒙  张莉  李慧  汪骁轩  魏殿华  高静雯  高建鹏  张华雷  齐亚银 《中国畜牧兽医》2018,45(4):1041-1049

为测定致羔羊脑炎粪肠球菌（Enterococcus faecalis）的生长曲线，寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量，并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响，试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法（D_λ值法）测定粪肠球菌的生长曲线，探究该菌在合适时间段内的吸光值（D_{600 nm}）与平板菌落计数法测定的活菌数（CFU）的关系。用粪肠球菌感染小鼠，观察记录小鼠的死亡情况，最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量（LD₅₀）。用LD₅₀的剂量感染小鼠，及时采集死亡小鼠脑组织，未死亡的小鼠72 h后全部剖杀取脑组织，一部分做涂片染色，制作病理切片，观察病理变化；一部分进行培养，用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示，用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致，在2~8 h生长迅速，为对数生长期，8~14 h生长缓慢，为稳定期，14 h之后死亡数增加，进入衰亡期；对12 h粪肠球菌D_{600 nm}与CFU的关系进行探讨，成功建立回归方程：y=20.769x-1.3422，R²=0.997；其感染小鼠的LD₅₀为7.77×10¹¹个活菌。以此剂量感染小鼠，脑组织涂片染色和培养染色，均能看到革兰氏阳性球菌；PCR结果显示，均出现了大小为112 bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓，脑膜充血。通过生长曲线和其D_{600 nm}与CFU关系的建立，可实时监测粪肠球菌数量，为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。  相似文献   

屎肠球菌廉价培养基的研制     

李英英  陈曦  宋铁英 《安徽农业科学》2018,46(32)

  相似文献   

一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法     

宋建  薛俊  孙海波  王姝  金凤媚 《植物保护》2020,46(4):168-170

番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性。结果表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带。扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测。  相似文献   

硅谷天堂的“PE+上市之路”     

王小梦 《农村经济与科技》2018,(4)

随着资本市场的不断发展,在各种并购重组模式中,"PE+上市公司"模式脱颖而出,并引导了潮流。虽然给PE和上市公司双方都带来了巨大的利润,但是也出现了各种扰乱市场的问题,比如内幕交易、市场操纵、抬高股价等破坏市场秩序等消极影响。本文对"PE+上市公司"模式进行了探讨,具体分析了这种模式的利与弊,并给出了硅谷天堂的应对措施。  相似文献   

鸡Prnp基因原核表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达     

李仙春  芦艳  毛耀芳  杨海峰  余海山  马永华  万学瑞 《浙江农业学报》2020,32(12):2138

试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L^-1,16 ℃,220 r·min^-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。  相似文献   

鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因在杆状病毒表达系统中的表达     

鄢明华  赵晓岩  刘长军  王笑梅  王端  李刚  秦运安  邓国华 《中国预防兽医学报》2003,25(6):426-429

将鸡传染性贫血病毒M9905株VP1、VP2基因分别或同时克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDUAL中，然后转化到DHIOBAC感受态细胞中与Bacmid杆状病毒穿梭载体进行转座重组，最后将重组子转染Sf9昆虫细胞，得到分别或同时含VP1、VP2基因的重组杆状病毒rBacVP1、rBacVP2及rBacVP1—2。PCR扩增结果证实VP1、VP2基因重组到杆状病毒基因组中；SDS-PAGE电泳分析和间接免疫荧光试验结果表明VP1、VP2基因在重组病毒中得到了表达。  相似文献   

仔猪的肠吻合手术     

木立新 《云南畜牧兽医》2003,(2):32-32

20 0 0年 3月 4日一位村民的 1头仔猪阉割手术后 ,伤口一直不能愈合 ,不吃不喝 ,伤口流脓。经检查 ,体温 4 1℃ ,精神沉郁 ,伤口有缝线 ,未愈合 ,创口周围有脓汁结痂 ,中央有脓汁流出。检查完后 ,消毒皮肤 ,拆除缝线时发现一段缝线把小肠及皮肤缝合在一起 ,扩创后发现在小肠缝合点两侧有约 15cm坏死 ,且有比较严重的粘连现象 ,碍于该处创口太小 ,不能有效实施手术 ,所以采用正中线切开术。方法 :将小猪背卧 ,四肢向外侧固定 ,清洗消毒后放置创巾 ,在手术部位施行局部普鲁卡因浸润麻醉后切开皮肤 ,钝性分离结缔组织 ,及时止血、扩创 ,切开腹…  相似文献   

耕牛后结症治验     

吴周水 《中兽医学杂志》2004,(2):42-42

耕牛后结症又名肠闭结,此种疾病多因直肠干燥或麻痹,亦或寒冷天气、阴雨连绵时不能牧放而关存栏舍中饲养,牛只过多吃食了干燥含水份很少的稻草之类食物,或病牛原患有肠炎等类疾病似好未好转归而来,也可诱引耕牛后结病症的发生.  相似文献   

疫苗免疫在防制禽流感中的应用     

沈银书 《中国禽业导刊》2004,21(3):40-41

口蹄疫、猪瘟与禽流感(AI)被世界动物卫生组织(OIE)列为A类烈性动物传染病，一旦爆发，往往导致成千上万只动物被淘汰宰杀，特别是在畜牧养殖业发达国家或地区，其损失更是无法估量。  相似文献   

治疗图书馆顽症:流程重组   总被引：3，自引：0，他引：3  

沙淑欣 《农业图书情报学刊》2004,16(10):50-52

本文将流程重组理论引入图书馆管理，分析了图书馆流程重组的必要性，同时具体阐述了图书馆流程重组的三种方式。  相似文献