| 应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒ORF2蛋白建立一种ELISA诊断方法 |
| |
| 引用本文： | 琚春梅,陈焕春,刘正飞,曹胜波,何启盖.应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒ORF2蛋白建立一种ELISA诊断方法[J].畜牧兽医学报,2004,35(6):689-693. |
| |
| 作者姓名： | 琚春梅 陈焕春 刘正飞 曹胜波 何启盖 |
| |
| 作者单位： | 华中农业大学动物医学院动物病毒室,武汉,430070 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30170701) |
| |
| 摘 要： | 根据GenBank中猪2型圆环病毒(PCV2)序列(AY035820)，设计1对引物，并以包含PCV2全基因组的重组质粒pT-PCV为模板，扩增出含ORF2全基因的片段(709bp)，回收PCR产物，将其克隆入pMDl8-T载体，获得重组质粒pTORF2，并对其进行序列测定。重组质粒经Bal I和Sal I双酶切，回收ORF2基因，将其插入pGEX-KG的Sma I和Sal I位点间，构建原核表达质粒pGEXORF2，阳性重组质粒转化E．coli BL21(DE3)，进行原核表达。用此表达产物包被酶标板，建立EUISA诊断方法，并对临床676份送检血清进行了检测，结果表明其总阳性率为62．7％(424／676)，仔猪阳性率为38．9％(74／190)，肥猪阳性率为63．2％(84／133)，母猪阳性率为74．6％(249／334)，公猪阳性率为89．5％(17／19)。
|
| 关 键 词： | 阳性率 重组质粒 诊断方法 ELISA 表达 蛋白 基因 ORF2 圆环病毒 PCV2 |
| 文章编号： | 0366-6964(2004)06-0689-05 |
The Establishment of an ELISA Assay with the ORF2 Protein of Porcine Circovirus type 2 Expressed in E.coli |
| |
| JU Chun-mei,CHEN Huan-chun,LIU Zheng-fei,CAO Sheng-bo,HE Qi-gai.The Establishment of an ELISA Assay with the ORF2 Protein of Porcine Circovirus type 2 Expressed in E.coli[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2004,35(6):689-693. |
| |
| Authors: | JU Chun-mei CHEN Huan-chun LIU Zheng-fei CAO Sheng-bo HE Qi-gai |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | porcine circovirus type 2 ORF2 clone expression ELISA |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
