| 产气荚膜梭菌α-β2-ε毒素融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 宫旭颖,葛俊伟,乔薪瑗,唐丽杰,姜艳平,崔文,李一经.产气荚膜梭菌α-β2-ε毒素融合蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫原性研究[J].中国预防兽医学报,2015(2):128-131. |
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| 作者姓名： | 宫旭颖 葛俊伟 乔薪瑗 唐丽杰 姜艳平 崔文 李一经 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物医学学院 |
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| 基金项目： | 国家“十二五”农村领域国家科技计划(2011AA10A213) |
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| 摘 要： | 为研究产气荚膜梭菌α、β、ε3种主要外毒素的免疫原性,构建基因亚单位多价疫苗,本研究通过PCR分别扩增α-β2及ε3种毒素基因,分别克隆于p Pro HTa载体中构建重组表达质粒p Pro-α-β2-ε,并转化大肠杆菌进行这3个目的基因的融合表达。SDS-PAGE分析显示,表达的α-β2-ε毒素融合蛋白大小约90 ku,主要以包涵体形式存在。将其免疫BALB/c小鼠后,分别利用A型和B型产气荚膜梭菌强毒素对免疫鼠进行攻毒,并测定免疫鼠血清中抗体对毒素的中和活性。结果表明,免疫鼠对A型和B型产气荚膜梭菌毒素1 LD100和2 LD100的攻毒保护率分别为100%和60%以及100%和80%。体外中和试验显示,免疫鼠血清稀释为1∶20时,对1 LD100A型和B型产气荚膜梭菌毒素的中和效率均可达到100%。以上结果表明,本研究制备的α-β2-ε融合蛋白具有良好的免疫原性,能够有效刺激机体产生中和抗体,可以作为基因工程疫苗的有效组分,为产气荚膜梭菌多价候选亚单位疫苗的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 产气荚膜梭菌 α-β2-ε毒素 大肠杆菌 融合表达 免疫原性 |
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