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1.
试验通过对鸭胚注射芳香化酶抑制剂(AI)和β-雌二醇(E2)构建性反转模型,观察其性腺外观形态变化,并荧光定量检测雌性基因P450arom、FOXL2、SF-1和雄性基因DMRT1、SOX9、AMH等6个基因在性反转和正常鸭胚中的表达情况。结果显示:芳香化酶抑制剂能促进公鸭性腺发育,母鸭表现雄化;雌二醇能促进母鸭性腺分化,公鸭表现雌化。DMRT1、SOX9、AMH表达趋势相似,AI促进基因表达使胚胎雄化;E2抑制基因表达使胚胎雌化。P450arom、FOXL2、SF-1在AI组中被抑制使胚胎雄化,在E2组中得到促进发生雌化。该研究结果为研究鸭胚性反转机制奠定理论基础。 相似文献
2.
1引言家禽性别控制研究包括性别决定、性别分化、性别鉴定、性别诱导和性别控制等方面。性别决定与分化本质的发现是家禽性别研究的重要基础,对鸡胚性别的早期鉴定是对性腺基因研究的重要内容。鸡的睾丸和卵巢是由共同的原始生殖细胞(primordialgermcellsPGCs)发育而来。种蛋孵化67h(性腺分化期)中肾开始参与性腺的形成。鸡胚发育的开始阶段,约至5d左右,生殖脊还是中性的性腺,此时雄性和雌性的生殖器官在形态上未发生分化。无性阶段之后(5d之后),雄性和雌性性腺逐渐发生分化。至6～7d,雄性性腺开始睾丸的分化,雌性性腺也开始出现卵巢的分… 相似文献
3.
采用显微注射法，分别将人生长激素(hGH)基因和人组织激肽释放酶基因(KLK1)直接注射到孵化24h的鸡胚中，继续孵化。在注射的320枚鸡胚中，孵化前7d死亡194枚，8～18d死亡108枚，孵出雏鸡18只，孵出率为5.6％(18/320)。8只雏鸡分别于出壳后的第1、2、3、5天死亡。7只于3月龄死亡。3只鸡(1公2母)存活至今，并开始产蛋。死亡雏鸡具有脚瘫、体弱、斜颈、站立不稳等异常表现，存活鸡无外观异常，但有产蛋紊乱现象。从孵化4d后死亡的150放鸡胚和18只出壳雏鸡的组织提取基因组DNA，并用DNA杂交试验进行基因整合检测，结果发现其中的3枚鸡胚和3只雏鸡为人生长激素基因整合阳性，基因整合率为12.5％(6/48)；18枚鸡胚和6枚雏鸡为KLK1整合阳性，整合率为22.2％(24/108)。结果表明：鸡胚盘内细胞通过显微注射法可以转染外源基因。 相似文献
4.
试验旨在克隆蛋鸡CYP19A1基因,对其遗传结构进行生物信息学分析并探究其在太行鸡不同组织中及不同产蛋量个体中的表达情况。以河北省太行鸡为研究对象,通过设计引物对CYP19A1基因CDS区进行克隆测序,运用生物信息学软件对其功能结构进行预测。结果显示,CYP19A1基因含有一个1 509 bp的开放阅读框（ORF）,编码502个氨基酸。同源性比对和系统发生树分析结果表明,太行鸡CYP19A1基因与鸭的同源性较高（90.7%）,并且在不同物种间高度保守。对CYP19A1蛋白理化性质进行预测分析发现,该蛋白为亲水蛋白,蛋白分子式为C2602H4103N675O719S36,分子质量为57.51 ku,理论等电点为5.99,其中含量最高的是亮氨酸（为14.0%）。蛋白质二级结构由α-螺旋、延伸链、β-折叠及无规则卷曲4种结构组成,所占比例分别为58.95%、2.18%、3.93%和34.93%。组织表达谱分析发现,CYP19A1基因在不同组织中均有表达,但其在卵巢中表达量最高。实时荧光定量PCR结果显示,CYP19A1基因在太行鸡高产组卵巢中的表达量显著高于低产组（P<0.05）。上述结果为研究太行鸡CYP19A1基因提供了重要的研究数据,为进一步挖掘太行鸡高产基因提供了参考。 相似文献
5.
【目的】 构建糖基翻转酶gtcA基因缺失株，并阐明其对单增李斯特致病性的影响。【方法】 利用同源重组技术构建gtcA基因缺失株；进一步分析亲本株EGDe-prfA*、缺失株ΔgtcA和回补株CΔgtcA的生长能力；通过Western blotting分析gtcA基因缺失对InlA和InlB在细菌表面锚定的影响；通过DF1细胞黏附侵袭试验、RAW264.7细胞吞噬增殖试验和鸡胚毒力试验评估gtcA基因缺失对单增李斯特菌细胞侵染能力及对鸡胚致病性的影响。【结果】 生长曲线显示，gtcA基因缺失并不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力。Western blotting结果显示，内化素InlB在ΔgtcA表面的锚定量极显著低于EGDe-prfA*和CΔgtcA（P<0.01），但其表面InlA的锚定量与EGDe-prfA*并无显著差异（P>0.05）。细胞黏附侵袭试验结果显示，ΔgtcA对成纤维细胞DF1的平均黏附率和侵袭率显著低于EGDe-prfA*和CΔgtcA（P<0.05）。吞噬试验结果显示，巨噬细胞RAW264.7对ΔgtcA的平均吞噬率显著低于EGDe-prfA*和CΔgtcA（P<0.05），但ΔgtcA与EGDe-prfA*、CΔgtcA在RAW264.7中的3 h内增殖倍数并无显著差异（P>0.05）。鸡胚毒力试验结果显示，ΔgtcA感染鸡胚肝脏和脾脏中的平均细菌载量分别为6.86×103和3.69×102 CFU，极显著低于EGDe-prfA*和CΔgtcA感染鸡胚（P<0.01）；同时，ΔgtcA感染鸡胚存活率及存活时间均高于EGDe-prfA*和CΔgtcA感染鸡胚。【结论】 糖基转移酶gtcA基因缺失不影响单增李斯特菌1/2a血清型菌株EGDe-prfA*的生长能力，但能显著降低该菌表面InlB的锚定丰度，减弱该菌的细胞侵染能力及对鸡胚的致病性。本研究结果为深入探索糖基翻转酶基因gtcA介导单增李斯特菌致病机制提供参考。 相似文献
6.
本试验旨在研究胚胎期大鼠性腺生长与分化的情况。选取12.5~15.5 dpc SD大鼠胚胎为研究对象,运用PCR技术进行大鼠胚胎性别鉴定,采用H-E技术对大鼠性腺分化形态进行观察。结果表明:12.5 d的鼠胚肾管已经开始形成,生殖嵴已经建立,此时仍无明显的性别分化形态;13.5 d的鼠胚开始出现性别分化的迹象,雄性的原始性索开始形成,雌性性腺分化比雄性稍晚,此期仍不易辨别出典型的卵巢特征结构;14.5 d的鼠胚性腺形态初步成型,此期性别明显分化,雄性的原始性索开始分化为实心原始生精小管,雌性胚胎中性腺分为两层,初步形成卵巢特征;15.5 d的鼠胚,雄性胚胎性腺中已经具有明显的曲精小管的雏形,雌性胚胎卵巢特征也开始明显。大鼠胚胎性腺从13.5 d胚龄时开始分化,15.5 d胚龄性腺特征明显。 相似文献
7.
【目的】 克隆鸡Msh同源框2(Msh-homeobox 2，MSX2)基因，并对其进行生物信息学和胚胎期表达模式分析，为进一步研究MSX2基因的结构和功能提供支持。【方法】 对80枚琅琊鸡种蛋进行孵化，分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18天采集样品(1~6胚龄采集整胚，9、12、15、18胚龄分别采集心脏和肝脏)，提取总RNA，利用RT-PCR方法扩增并克隆MSX2基因，对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术分析MSX2基因在琅琊鸡鸡胚和组织中的表达水平。【结果】 成功克隆了琅琊鸡胚MSX2基因，序列长度为818 bp，开放阅读框为780 bp，编码259个氨基酸。琅琊鸡MSX2氨基酸序列与日本鹌鹑、秃鹰和仓鸮的相似性最高，均为99.23%，与山羊的相似性最低，为74.54%;系统进化树分析结果显示，琅琊鸡与日本鹌鹑聚为一类。生物信息学分析表明，MSX2蛋白分子质量为28 235.18 u，等电点(pI)为9.71，没有信号肽和跨膜域，为不稳定的亲水性蛋白，主要分布在细胞核(60.9%);存在37个磷酸化位点、8个O-糖基化位点和1个N-糖基化位点;二级结构主要由无规则卷曲(63.32%)和α-螺旋(28.19%)组成。实时荧光定量PCR分析表明，MSX2基因在整胚(1~6胚龄)中的表达水平呈现先上升后下降趋势，且在4胚龄时表达水平最高，极显著高于1、2、3胚龄(P<0.01);MSX2基因在12胚龄鸡心脏中的表达水平极显著低于9胚龄(P<0.01);在9~18胚龄鸡肝脏中的表达量呈逐渐下降趋势，且在9胚龄鸡肝脏中表达水平最高(P<0.05)。【结论】 试验成功克隆了琅琊鸡MSX2基因序列，其表达模式在不同胚龄和同一胚龄不同组织间存在差异，为进一步探索琅琊鸡MSX2基因的结构和功能奠定了基础。 相似文献
8.
《中国家禽》2016,(17)
FOXL2是影响鸡卵巢发育的重要候选基因。为了研究FOXL2基因的功能,研究构建了鸡FOXL2基因真核表达载体并在细胞水平进行初步验证。利用RT-PCR的方法扩增并克隆FOXL2基因,再将FOXL2亚克隆到慢病毒表达载体p LV-CMV-mcs-3xflag-EF1-GFP(简写为p LV),通过脂质体转染p LV-FOXL2转至DF-1细胞,36 h后荧光显微镜下观察细胞是否表达绿色荧光蛋白。结果显示,成功构建了鸡FOXL2基因过表达载体p LV-FOXL2,在荧光显微镜下可观察到DF-1细胞有绿色荧光蛋白的表达。研究结果为进一步研究FOXL2基因在鸡卵巢发育过程中的功能奠定基础。 相似文献
9.
《中国家禽》2021,(9)
性别决定(Sex determination)是指有性生物个体在性别决定基因的作用下,经过一系列生物发育过程后,原始性腺发育成卵巢或睾丸并使生物体发育为雌性或雄性的过程。在胚胎发育过程中,性别分化由少数的关键基因决定,当一个或多个关键基因出现功能失调时,可能会导致性腺发育异常甚至发生性别逆转的现象。近年来,大量数据证明,DMRT1和FOXL2在多个物种中被证实为与性别决定相关的关键基因,然而两者在性别调控过程中的具体作用尚不十分清楚。因此,文章对DMRT1和FOXL2基因在多个物种性别决定中的研究进展进行综述与展望,为进一步探索与研究家禽性别的分化提供新思路。 相似文献
10.
【目的】旨在通过分析细胞色素P450家族成员11A1（CYP11A1）的生物信息功能及其在新西兰白兔卵巢颗粒细胞中对繁殖性能相关基因的调控作用，为探究其在卵泡发育过程中调控功能奠定基础。【方法】根据GenBank上兔CYP11A1基因的序列，设计特异性引物，以新西兰白兔卵巢组织cDNA为模板，PCR扩增并克隆CYP11A1基因序列，构建pcDNA3.1-CYP11A1过表达重组载体；用Mega 5.1在线软件构建系统进化树，并通过生物信息学软件对CYP11A1蛋白的氨基酸组成、理化性质、磷酸化位点、保守结构域、二级结构、三级结构、亚细胞定位、蛋白互作进行预测分析。分离新西兰白兔卵巢颗粒细胞，并通过免疫荧光法鉴定颗粒细胞特异性抗体卵泡刺激素受体（FSHR）的表达。设计3条干扰CYP11A1基因表达的引物（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3），筛选出干扰效率最高的1条，并将其与pcDNA3.1-CYP11A1过表达重组载体转染到卵巢颗粒细胞中，用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞中羟基类固醇17-β脱氢酶1（HSD17B1）、骨形态发生蛋白15（BMP15）和促卵泡刺激素受体（FSHR）等繁殖相关基因mRNA表达水平。【结果】成功克隆新西兰白兔CYP11A1基因，其CDS全长序列为1 557 bp，编码518个氨基酸，其中亮氨酸含量（10.6%）最高，精氨酸（7.6%）、缬氨酸（7.4%）和丙氨酸（7.2%）次之。进化树分析显示，CYP11A1蛋白序列与家鼠、人和猩猩的距离最近。生物信息学分析显示，CYP11A1蛋白理论等电点为7.4，正负电荷残基数各占50个，脂肪族氨基酸指数为82.16，不稳定性指数39.54，其中氨基酸序列中亲水性残基数量多于疏水性残基；CYP11A1蛋白具有40个潜在的磷酸化位点，其中以苏氨酸、丝氨酸和酪氨酸最为丰富；CYP11A1蛋白二级结构由α-螺旋（48.31%）、无规则卷曲（40.22%）、延伸链（7.42%）和β-转角（4.04%）组成，三级结构为弯曲螺旋状。亚细胞定位预测结果显示，CYP11A1蛋白主要分布于线粒体（52.2%）、细胞质（17.4%）和细胞核（13.0%）中，还具有1个p450家族的结构域，并与多个繁殖性能相关的蛋白（STAR、CYP21A2、CYP17A1和FDX1）相互作用。分离的兔颗粒细胞表达FSHR，可以用于后续试验；CYP11A1基因在颗粒细胞中过表达后，HSD17B1和FSHR基因表达量极显著上调（P＜0.05），BMP15基因表达量显著上调（P＜0.01）；干扰CYP11A1基因表达后，BMP15和FSHR基因的表达量极显著下调（P＜0.01），HSD17B1基因表达量显著下调（P＜0.05）。【结论】CYP11A1是一个稳定、亲水、相对保守且具有抗氧化和类固醇激素合成功能的蛋白。CYP11A1基因可调控卵巢颗粒细胞中与繁殖性能相关的基因HSD17B1、BMP15、FSHR的表达，说明CYP11A1基因在母兔繁殖过程中发挥一定作用。 相似文献
11.
The aim of this study was to investigate the effect of FOXL2 gene on gonadal differentiation in chicken embryos.This test was divided into the experiment groups 1,2 and blank control group(chicken embryos were 260,100 and 20,respectively).In the experimental group,pLV-FOXL2 lentivirus recombinant plasmids and pLV empty plasmids were injected into the chicken embryo on the second day of the embryonic stage by subpaneoidal injection.The blank control group was not treated and incubated with the experimental groups until the chick was hatched.CHD1 gene genetic sex identification method was used to detect the sex of chicks,the changes of gonadal anatomy and histological structure were analyzed,and the expression levels of FOXL2 and CYP19A1 proteins were detected by immunohistochemistry.The results showed that in the experiment group 1,there were 23 male and 18 female of genetic sex,21 male and 18 female of phenotypic sex,and two of them had atypical phenotypic gender,with changes in the left gonadal gland toward ovarian structure.The phenotypic sex was consistent with the genetic sex in experiment group 2,with 9 male and 12 female.Positive PCR results showed that 10 positive individuals were obtained in the experiment group 1,with a positive rate of 24.4% (10/41),and 8 positive individuals were obtained in the experiment group 2,with a positive rate of 38.1% (8/21).The anatomical structure of the gonad showed that the volume of the left gonad was significantly larger than that of the right gonad in the positive plV-FOXL2 male embryos.The results of tissue sections showed that the gonad of male chicken embryo had typical structure of ovarian cortex and medulla.There was no significant change in the development of gonad in female embryos with positive pLV-FOXL2.Immunohistochemical results showed that the expression levels of FOXL2 and CYP19A1 proteins in the left and right testicle of experiment group 1 were similar to that in the hen ovary of the blank control group,and were significantly higher than that in experiment group 2 (P<0.05).These results suggested that FOXL2 gene might promote the sexual inversion of chicken gonads and played an important role in the differentiation and development of chicken gonads. 相似文献
12.
Yuki NAKAJIMA Tetsuya HATTORI Atsushi ASANO Naoto ISHIKAWA Atsushi TAJIMA 《The Journal of reproduction and development》2014,60(6):406-410
A series of experiments was conducted to investigate migration, proliferation and differentiation of gonadal germ cells (GGCs) collected from the gonads of 7-day-old chick embryos under cross-sex germline chimera conditions. The migratory and proliferative abilities of exogenous GGCs were examined by transferring 50 fluorescently labeled GGCs collected from White Leghorn (WL) embryos into the blood of 2-day-old Rhode Island Red (RIR) embryos. No significant difference was
observed in the number of fluorescently labeled GGCs in the gonads of recipient embryos among any of the four possible donor and recipient sex combinations. Cross-sex germline chimeras were produced to examine the differentiation of GGCs by transferring 100 GGCs from WL embryos into 2-day-old RIR embryos. Exogenous-GGC-derived progeny were obtained from both male and female recipients, except when female GGCs were transferred into male recipients. The migratory ability of GGCs
recovered from the 7-day-old embryonic gonad was not influenced by cross-sex germ cell transfer conditions, whereas the differentiation of the GGCs was affected by the sex combinations of GGCs donors and recipients. 相似文献
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抑制芳香化酶活性对母鸡性腺分化和性行为的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
为研究雌激素在鸡性腺和性行为分化过程中的作用,本试验在受精蛋孵化第3天气室注入100μL生理盐水或芳香化酶抑制剂(AI),出雏后常规饲养到8月龄性成熟,观察其性行为的表现,检测性腺结构和血清性激素水平.结果发现,AI处理获得的性反转母鸡出现雄性第二性征和雄性交配行为,性腺形态和组织学检查结果表明其性腺得到了不同程度的反转(1)完全反转母鸡右侧性腺发育成为睾丸,而左侧性腺出现不同程度的反转.两侧性腺均出现精细管结构,管径较正常窄,发育不完整,精细管内大量分布生殖细胞,右侧性腺的间质较左侧发达;(2)不完全反转母鸡的右侧性腺退化,左侧仍为完整卵巢.血清中雌二醇(E2)含量为不完全反转母鸡＞正常母鸡＞完全反转母鸡＞正常公鸡;睾酮(T)含量为完全反转母鸡＞不完全反转母鸡＞正常公鸡＞正常母鸡,雄性交配频率与血清T/E2的比值呈正相关.以上结果表明,在性分化前用AI阻断雌激素的合成可引起雌性性腺结构和激素分泌功能及性行为雄性化,而血清T和E2含量及其比值决定了性反转母鸡雄性交配行为的频率和强度. 相似文献
14.
旨在建立一种可检测牛早期胚胎性别的复合探针体系,减少常规PCR方法电泳所带来的污染,提高鉴定准确率,降低鉴定成本。本研究以SRY为牛胚胎性别鉴定的目标基因,以进口YCD-PCR性别鉴定试剂盒为对照组（n=9 543）,荧光定量PCR的单引物分别扩增体系（荧光单扩,FSPSA,n=6 570）和双引物混合扩增体系（荧光双扩,FDPMA,n=22 238）分别做试验组,从性别鉴定效率、无反应率、雌雄胚胎百分率和比值、移植妊娠率、雌性胚胎母犊率、不同细胞取样数下的性别鉴定结果和鉴定成本等方面进行各组间比较。结果表明,荧光单扩组的雌性胚胎百分率和性别鉴定效率极显著高于其他两组（P<0.01）,无反应率极显著低于其他两组（P<0.01）,雌雄胚胎比值与其他两组差异较大（1.03∶1 vs 1∶1.03和1∶1.02）,雌性胚胎母犊率极显著低于荧光双扩组和对照组（P<0.01）;荧光双扩组的雌性胚胎百分率、雄性胚胎百分率和雌性胚胎母犊率均与对照组无显著差异（P>0.05）,雌雄胚胎比值与对照组相似（1∶1.03和1∶1.02）,无反应率极显著低于对照组（P<0.01）,性别鉴定效率极显著高于对照组（P<0.01）。取样细胞4~6组和7~10组的性别鉴定效率极显著高于1~3组和SD（separated & died cells）组（P<0.01）,而1~3组和SD组之间及4~6组和7~10组之间差异不显著（P>0.05）。移植妊娠率4~6细胞组最高（49.68%）,但各取样组间无显著差异（P>0.05）。荧光双扩法与对照组相比,鉴定成本下降了46.76%。结果显示,荧光双扩方法产母犊准确率最高,鉴定成本较低,取样4~6细胞时的移植妊娠率最高,是一种更可行的牛胚胎性别鉴定技术,更有利于产业化推广和应用。 相似文献
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JJCWM Buijtels J de Gier T van Haeften HS Kooistra B Spee EJB Veldhuis Kroeze C Zijlstra AC Okkens 《Reproduction in domestic animals》2009,44(5):751-756
Normal mammalian sex differentiation takes place in three genetically controlled steps: chromosomal sex determination (XX or XY), gonadal differentiation and development of the phenotypic sex. Animals are considered to be sex reversed if chromosomal sex determination and gonadal development are not in agreement. In this report, sex reversal is described in a 1.5-year-old Podenco dog that was referred because of suspected recurrent growth of a previously removed os clitoridis in the vulva. With that exception the dog was phenotypically female, but had never been in oestrus and exhibited male behaviour. Abdominal ultrasonography showed a small tubular structure dorsal to the bladder, consistent with a uterus. An ovoid structure resembling a gonad was visible between the right kidney and inguinal canal. Plasma testosterone concentrations before and after GnRH administration indicated the presence of functional testicular tissue. Two testes, each with its epididymis and ductus deferens, and a complete bicornuate uterus were removed surgically. Cytogenetic analysis of peripheral blood lymphocytes showed a normal female karyotype (78, XX). These findings are consistent with the diagnosis of an XX male. PCR analysis of genomic DNA revealed that the SRY gene was absent. In summary, this report describes the first SRY-negative XX male Podenco dog with an almost complete female phenotype despite high basal and stimulated plasma testosterone concentrations. It is hypothesized that the clinical observations in this dog may have been caused by reduced and delayed Müllerian-inhibiting substance secretion and the absence of conversion of testosterone to dihydrotestosterone due to 5α-reductase deficiency. 相似文献
16.
旨在探讨肾复康颗粒对鸡肾肿的抗炎机制。将90只健康雏鸡分为空白组（15只）和试验组（75只）,试验组通过饲喂自制高钙高蛋白饲料人工复制鸡肾肿模型,造模成功后,随机分为模型组、阳性药物组、肾复康颗粒高、中、低剂量组,每组15只,肾复康颗粒高、中、低剂量组分别饮水给药肾复康颗粒2.0、1.0、0.5 g·L-1,阳性药物组饮水给药苍蓝口服液1.0 mL·L-1,模型组饮水给予生理盐水1.0 mL·L-1,2次·d-1,连用5 d。分别于造模前、后以及末次给药后2 d进行翅下静脉采血,分离血清,采用ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、MCP-1、TGF-β1的含量变化;采用RT-PCR法检测肾IL-1R、IκBα、NF-κBp65 mRNA的转录。结果显示：与空白组相比,模型组雏鸡血清IL-1、TNF-α、MCP-1、TGF-β1含量显著升高（P<0.05）,肾中IL-1R、NF-κBp65 mRNA转录量极显著升高（P<0.01）,肾中IκBα mRNA转录量极显著降低（P<0.01）。饮水给药治疗后,肾复康颗粒高、低剂量组和阳性药物组雏鸡血清IL-1、TNF-α、MCP-1、TGF-β1含量显著降低（P<0.05）;肾复康颗粒中剂量组肾中IL-1R、NF-κBp65 mRNA转录量极显著降低（P<0.01）,肾中IκBα mRNA转录量极显著增加（P<0.01）。肾复康颗粒通过降低肾肿鸡血清中IL-1、TNF-α、MCP-1、TGF-β1中含量,抑制IL-1R/NF-κB信号通路,从而发挥抗炎作用。 相似文献
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【目的】探究牛体内雌性和雄性囊胚在mRNA水平上的特异性差异,挖掘雌性和雄性囊胚发育差异相关候选基因。【方法】参考GenBank中牛牙釉质基因（AMEL）序列（AMELX基因,登录号：NM_001014984.1;AMELY基因,登录号：NM_174240.2）设计引物,以胚胎内细胞DNA为模板,采用巢式PCR扩增技术鉴定单个牛体内囊胚的性别。选用确定性别的单个雌性和雄性囊胚为试验材料,采用Smart-Seq2扩增技术构建单个胚胎测序文库,应用Illumina HiSeq Xten高通量测序平台对单个胚胎进行单细胞转录组测序（scRNA-Seq）,并进行了基因差异表达、GO功能和KEGG通路分析。【结果】通过巢式PCR扩增胚胎内细胞中的AMEL基因,确定了胚胎性别;基因表达分析筛选出两组之间差异表达基因（DEGs）6 160个,其中雌性特异性基因675个,雄性特异性基因305个;GO功能注释发现雌性特异性基因显著注释在核苷酸结合、信号转导调控、多细胞生物发育、细胞骨架等条目,雄性特异性基因显著注释在氧化磷酸化、线粒体、线粒体内膜、核糖体等条目;KEGG通路富集分析发现7条与雌性和雄性囊胚发育差异相关的通路,分别为代谢途径、糖酵解、磷酸戊糖途径、细胞衰老、氧化磷酸化、调节干细胞多能性的信号通路和Wnt信号通路;并利用GO和KEGG结果筛选出5个在牛体内囊胚期胚胎发育过程中具有直接或间接作用的基因：FBP1、GADD45G、FHL2、FOSB和WNT2B。【结论】牛体内雌性和雄性囊胚之间存在广泛的转录差异,性别特异性基因FBP1、GADD45G、FHL2、FOSB和WNT2B可能是直接或间接影响胚胎发育的关键基因。 相似文献
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【目的】 探究促性腺激素抑制激素（GnIH）对SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢的影响,以及SD大鼠性腺生殖功能和糖代谢之间的相关性。【方法】 将36只SD大鼠随机均分为对照组（0.9％生理盐水）、1 μg/100 μL GnIH组（Ⅰ组）、10 μg/100 μL GnIH （Ⅱ组）,每组12只（雌雄各半）。每天07：00和19：00注射生理盐水或GnIH （200 μL/次）,连续注射14 d后测量大鼠体重,计算肥胖程度,麻醉处死后采集卵巢和睾丸,称重并计算卵体比和睾体比;运用阴道涂片法观察雌性大鼠发情周期的变化;显微镜下观察并计算雄性大鼠精子活力;HE染色观察卵巢和睾丸组织变化;用实时荧光定量PCR法检测卵巢和睾丸中糖代谢基因胰岛素受体（IR）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）和炎症相关因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）的表达水平,并用SPSS 22.0软件分析生殖功能和糖代谢之间的相关性。【结果】 与对照组相比,Ⅰ组雌性SD大鼠和Ⅱ组雄性SD大鼠肥胖程度均显著升高（P<0.05）;Ⅱ组卵巢大小/重量、卵体比显著升高,睾丸重量、睾体比显著下降（P<0.05）。HE染色结果显示,与对照组相比,Ⅱ组雌性大鼠卵泡呈囊性扩张,颗粒细胞层减少,卵泡腔变大;Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠的生精小管均出现空泡样改变,生精细胞排列紊乱、层次减少。与对照组相比,Ⅱ组大鼠发情前期的持续时间显著延长（P<0.05）、精子活力显著下降（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ组雌性大鼠GLUT4基因的表达量极显著下降（P<0.01）、Ⅱ组中IR基因的表达量显著降低（P<0.05）,Ⅰ、Ⅱ组雄性大鼠GLUT4基因的表达量均极显著降低（P<0.01）;Ⅰ组雌性大鼠TNF-α、IL-1β基因和雄性大鼠IL-1β基因的表达量均显著升高（P<0.05）,Ⅱ组雌、雄大鼠TNF-α基因的表达量均极显著升高（P<0.01）。相关性分析结果显示,腹腔注射GnIH后,雌性大鼠的卵体比与GLUT4基因表达水平呈极显著正相关（P<0.01）,与IR基因的表达水平呈显著正相关（P<0.05）;雌性大鼠的发情周期与GLUT4基因表达水平呈极显著负相关（P<0.01）;雄性大鼠睾体比与GLUT4基因表达水平均呈显著正相关（P<0.05）,而精子活力与GLUT4基因表达水平均呈极显著正相关（P<0.01）。【结论】 腹腔注射GnIH能够抑制大鼠的生殖功能和导致糖代谢功能紊乱,而且GnIH可能参与性腺能量代谢与生殖功能的交叉对话,是能量代谢与生殖功能的新型联络因子。 相似文献
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芳香化酶抑制剂Fadrozole能诱导雌性鸡胚雄性化,而不影响出生时雄性鸡胚的性别,但Fadrozole是否影响公鸡出雏后的生长发育和繁殖能力尚不清楚。在性别分化前(E3.0),向农大3号矮小商品代鸡胚注入PBS和不同剂量的Fadrozole(0.、10.3、0.5、1.0mg和1.3mg分别为1F、F2、F3、F4和F5),以出雏后的公鸡作为试验材料,探索Fadrozole对出雏后公鸡的生长发育、精清中的性激素和生长轴激素的影响。结果表明:高剂量组F4和F5分别为33.33%和13.33%,出雏率显著低于对照组P(<0.05),而低剂量组F1、F2和F3与对照组相比,出雏率无显著变化(P>0.05);各剂量Fadrozole处理组和对照组的体重和胫长在8周龄和20周龄时无显著差异P(>0.05);性成熟后(30周龄),F5精清中的睾酮(T)和雌二醇(E2)显著高于对照组和其他各处理组(P<0.05),但ln(T/E2)在各处理组和对照组差异均不显著(P>0.05);本试验说明Fadrozole不影响雄性胚胎的性腺分化,但高浓度的Fadrozole不利于鸡胚的发育;Fadrozole不影响出生后公鸡的生长发育、精清中的生长轴激素激分泌和精清中睾酮与雌二醇的比值。 相似文献