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应用反转录聚合酶链式反应检测鸡Th1样淋巴因子mRNA表？… 总被引：7，自引：3，他引：4
应用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和限制性酶切分析技术对鸡脾细胞体外受到有丝分裂原ＣonＡ刺激的情况下,其Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ的表达水平进行了研究。实验结 果表明,ＣonＡ诱导培养３个小时的鸡脾细胞表达α－干扰素（ＣhＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＣhＩＦＮ－γ）和白细胞介素－２（ＣhＩＬ－２）等鸡的Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ 。未诱导但培养了３小时的鸡脾细胞可表达ＣhＩＦＮ－α和ＣhＩＦＮ－γmＲＮＡ,而未 相似文献
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本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＤＮＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体－Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐ ｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后，即成ＤＮＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＤＮＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ，而不与ＩＢＤＶ－ｄｓＲＮＡ，ＡＩＢＶ－ｓｓＲＮＡ，ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ０ｄｓＤＮＡ、Ｆ 相似文献
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本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＮＤＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体──Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后,即成ＮＤＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＮＤＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ,而不与ＩＢＤｖ－ｄｓＲＮＡ、ＡＩＢｖ－ｓｓＲＮＡ、ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ－ｄｓＤＮＡ,ＦＰＶ－ｄｓＲＮＡ及ＡＩＬＶ－ｄｓＤＮＡ发生交叉杂交反应。试验结果表明：尽管该探钎含有编码Ｆｏ蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把ＮＤＶ的强、弱毒株区分开。这说明ＮＤＶ强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对ＮＤＶ来说具有特异性,这就为ＮＤＶ的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。 相似文献
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猫类Ｔ淋巴细胞系（Ｆｅｌ－０３９）感染猫免疫缺陷病毒（Ｆｅｌｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ，ＦＩＶ）培养物上清液听以转录酶活笥升高，同时伴随凋亡而致的细胞死亡。加入人类重组ＩＬ－１２能够显著抑制病毒复制和化，而且ＩＬ－１２的抗病毒活性与感染ＦＩＶ的Ｆｅｌ－０３９细胞表达ＩＦＮ－γ有关。 相似文献
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中药复方禽瘟王对机体免疫功能的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，京白蛋用鸡为对象，以白细胞介素－２（ＩＬ－２）干扰素（ＩＦＮ）和自然杀伤细胞（ＮＫＣ）为指标，观察了中药复方制剂禽瘟王对机体ＩＬ－２，ＩＦＮ，ＮＫＣ细胞的影响，结果表明，禽瘟王既能显著增强小鼠ＩＬ－２的活力，又能强化小鼠ＮＫＣ的杀伤活性，同时还可提高鸡体ＩＦＮ的效价水平，提示分充发挥ＩＬ－２，ＩＦＮ，ＮＫＣ网络的正向调节效应，可能是中药复方禽瘟王的药效学基础。 相似文献
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对小白鼠经不同途径注射抗原后脾单个核细胞的细胞因子IL—1βIL—2？… 总被引：4，自引：0，他引：4
应用ＲＴ－ＰＣＲ结合激光密度扫描定量分析方法，观察了不同途径免疫小白鼠的脾单个核细胞的细胞因子ＩＬ－１β，ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ的ｍＲＮＡ动态表达水平。结果显示，穴位免疫组细胞因子ＩＬ－１β和ＩＬ－２的ｍＲＮＡ表达峰值和持续时间均大于非穴位免疫对照组。穴位免疫组与对照组比较，ＩＦＮ－γ的ｍＲＮＡ表达水平无统计学差异。这一结果在ｍＲＮＡ水平上证明经后海穴途径免疫可增强机体的免疫功能。提示在穴位免疫激活 相似文献
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禽流感RT—PCR诊断法的建立 总被引：34，自引：1，他引：33
根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物,并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ,建立了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法,应用此法对鸡胚培养ＡＩＶ尿囊液,ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩莠试验和电镜技术作了对比,特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）,传染性氏囊病病毒（ＩＢＤ 相似文献
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鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理：Ⅰ.细胞因子的变化 总被引：4，自引：0，他引：4
１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７，１４，２８免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活发性明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫 相似文献
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雏鸡感染CIAV后细胞因子与免疫功能变化 总被引：5，自引：0，他引：5
本实验研究了１日龄雏鸡感染ＣＩＡＶ后免疫器官Ｔ细胞的ＩＬ－２、ＩＦＮ、ＣＳＦ诱生活性、Ｔ细胞与Ｂ细胞增殖反应的动态变化。结果表明，雏鸡感染ＣＩＡＶ后：（１）胸腺和脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性分别于７～２１ｄ不１７～１４ｄ明显降低；（２）脾脏淋巴细胞ＩＦＮ诱生活性于７～１４ｄ显著减弱；（３）胸腺淋巴细胞ＣＳＦ诱生活性于１４ｄ未见异常，２１ｄ明显升高；（４）胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于１４ｄ和７～２１ｄ明显减弱：（５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应分别于７～２１ｄ和２１ｄ显著减弱；（６）胸腺重量与体重比值、法氏囊重量与体重比值、体重均明显降低；（７）外周血液ＰＣＶ、ＲＢＣ、Ｈｂ、ＷＢＣ、血栓细胞（血小板）数值均明显降低。 相似文献
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用地高辛标记的核酸探针从尿囊液和组织中检测传染性支气 … 总被引：1，自引：0，他引：1
将ＩＢＶＴ株基因组Ｓ１基因上０．６kb片段（位于Ｓ１基因上１１２１bp～１７２３bp之间）克隆到ＰＩＢ－ＰＣＲ Ｃloning vector中,用地高辛标记探针,分别与９株ＩＢＶ 的ＰＣＲ产物和１２株ＩＢＶ的核酸进行点杂交均呈阳性反应,而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＲＮＡ,ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液的抽提物反应。探针检测ＩＢＶ－ＰＣＲ产物的灵敏度为１００～２００pg。用该探针检测不同毒株ＩＢＶ在鸡胚中的繁 相似文献
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从母牛接种过Ａ组ＢＲＶ株ＮＣＤＶ－Ｌｉｎｃｏｌｎ（Ｐ１：Ｇ６）苗的两个吡邻牛场分离到两株牛轮状病毒（ＢＲＶ），编号为ＮＳ－１和ＮＳ－２，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，ＮＳ－１和ＮＳ－２有相的的Ａ组ＲＮＡ电泳模式，而且全部基因片段同源，体外中和试验表明，ＮＳ－１株病毒能被Ｇ６特异性单克隆抗体（ＭｃＡｓ）和抗ＢＲＶＢ６４１株（Ｐ５：Ｇ６）豚鼠高免血清（ＧＰＡＳ）中和，但不被Ｇ１０特异性Ｍ 相似文献
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对英国畜禽饲养场环境控制和环境保护的考察报告 总被引：2，自引：0，他引：2
陆仁忠 《国外畜牧学(猪与禽)》1998,(3):32-32,34,35
我们随农业部考察团于１９９７年９月２１日到１０月６日考察了英国畜禽饲养场环境控制和环境保护，分别访问了英国农渔食品部（ＭＡＦＦ）、ＳＩＬＳＯＥ研究中心，６Ｘ公司，国家农业中心（ＮＡＣ）内的农场工程中心（ＦＥＣ），ＨＡＲＰＥＲＡＤＡＭＳ农学院农业工程系... 相似文献
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１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）． 相似文献
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新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的克隆 总被引：2，自引：0，他引：2
以提纯的我国标准ＵＤＶＦ４８Ｅ８强毒株基因组ＲＮＡ为模板、化学合成的融合蛋白（Ｆ）基因特异寡核苷酸为引物，反转录合成Ｆ基因ｃＤＮＡ，并采用同聚物加尾的方法克隆到细菌质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）。经ＡＩＸ平板筛选和酶切分析，并用Ｆ基因片段核酸探针作ｄｏｔ－ｂｌｏｔ检测，共获得插入片段长度在０．６￣２．８ｋｂ之间的阳性克隆３４个，其中插入片段大于１．５ｋｂ的阳性克隆８个。用多种限制性内切酶对阳性克隆ｐＦ７ 相似文献
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重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究 总被引：4，自引：1，他引：3
使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠，研究了同时注射重组牛白细胞介素－２（ｒＢＩＬ－２）对ＮＫ细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为４组：Ａｇ组，ｒＢＩＬ－２组，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组和ＰＢＳ对照组。以ＬＤＨ释放法和间接ＥＬＩＳＡ法分别检测脾ＮＫ细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明，首次免疫后２４ｄ，Ａｇ组ＮＫ细胞杀伤活性为３１．６％，ｒＢＩＬ－２组为９９．６６％，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为９８．９８％，对照组为１９．７３％；抗体效价Ａｇ组为２４，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为２６。说明ｒＢＩＬ－２可显著提高ＮＫ细胞杀伤活性及促进抗体生成，提高宿主免疫力。 相似文献
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氨化稻秆与精料添补饲喂孝湖半细毛羊的效果 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究用氨化稻秆（ＡＲＳ）、氨化稻秆添加精料３００克／日、只（ＡＲＳ－Ｉ）少６００克／日、只（ＡＲＳ－Ⅱ）以及未氨化稻秆添加精料３００克／日、只（ＵＡＲＳ－Ｉ）饲喂考湖半细毛羊，并与放牧羊作比较，结果表明：①稻秆氨化提高了羊对稻秆的适口性，粗蛋白的含量提高了近１倍，ＮＤＦ和ＡＤＦ分别下降了３．５和７．２％；②日增重以ＡＲＳ－Ⅱ为最高（９７．２克／日、只），ＡＲＳ－Ｉ，ＵＡＲＳ－Ｉ和ＡＲＳ组分别为６ 相似文献
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雏鸡感染巨型艾美耳球虫后细胞免疫的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
通过用地塞米松处理鸡和用特异性抗原刺激因子的微量全淋巴细胞转化试验（ＬＰＡ），研究雏鸡抗Ｅｉｍｅｒｉａｍａｘｉｍａ再感染中细胞免疫现象。结果表明，地塞米松处理可损伤鸡抗Ｅ．ｍａｘｉｍａ再感染的免疫力，这提示了ＣＤ８＋Ｔ细胞，γ－ＩＦＮ及ＩＬ－２等在抗．Ｅｍａｘｉｍａ再感染中的作用，利用Ｅ．ｍａｘｉｍａ卵囊抗原作刺激因子的微量全血ＬＰＡ结果表明，其刺激指数值与鸡抗Ｅ．ｍａｉｘｉｍａ再感染抵抗力有关。 相似文献
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鹌鹑卵泡发育过程中颗粒细胞黄体生成素受体mRNA的表达 总被引：4，自引：0，他引：4
用Ｎorthern杂交的方法研究了鹌鹑排卵泡内颗粒细胞黄体生成素受体（ＬＨＲ）mＲＮＡ的表达。在预计排卵前２０h和３h分别取出最大的３个卵泡（Ｆ１、Ｆ３卵泡）以及小黄卵泡（ＳＹＦ）,剥离颗粒层提取出总ＲＮＡ,并经变性凝胶电泳后将ＲＮＡ转移到滤膜上。杂交所用的探针是用特异的引物经反转录一多聚栈链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增出编码ＬＨＲcＤＮＡ的细胞外区（ＥＣ）和跨膜区（ＴＭ）cＤＮＡ。结果表明,颗粒细胞ＬＨＲmＲ 相似文献
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新城疫病毒(长春株)F蛋白基因的克隆和序列分析 总被引：21，自引：6，他引：15
新城疫病毒（ＮＤＶ）长春株在鸡胚增殖后纯化,提取ＲＮＡ,然后利用特异性引物,经ＲＴ－ＰＣＲ一次性扩增出了ＮＤＶ长春株的全长Ｆ基因。将该Ｆ基因插入ｐＫＳ（－）后,进行了序列测定。序列分析表明,该Ｆ基因核苷酸长度为１７５８ｂｐ,编码５５３个氨基酸,序列中有６个糖基化位点,１３个半胱氨酸残基,裂解位点区（１１２～１１７）氨基酸序列为Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ,与所有弱毒株在这一区域的序列（Ｇｌｙ－Ａｒｇ／Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ／Ｓｅｒ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ）相符,证明长春株为弱毒株。同源性分析表明,长春株Ｆ基因与目前国外发表的其他ＮＤＶＦ基因相比,核苷酸序列同源性在８８％～９９％之间,推导的氨基酸序列同源性在９０％～９８％之间 相似文献