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相似文献
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1.
猪链球菌2型(ss2)是一种重要的人兽共患病病原菌,可引起人和猪发生严重疾病。SS2的经典毒力因子有荚膜抗原、溶菌酶释放蛋白、溶血素等。随着研究的深入.又发现了一些与SS2致病性相关的基因和毒力相关元件,以及一些蛋白酶类,这些毒力因子多数具有较好的免疫原性,并在链球菌致病和生长过程中发挥十分重要的作用。通过对一些具有免疫原性的SS2毒力因子蛋白片段进行体外重组表达,有望研制出有效预防SS2感染的基因工程疫苗。  相似文献   

2.
为了研究钦州市猪链球菌2型(SS2)的毒力因子分布特征,采用多重PCR方法对从我市健康猪扁桃体分离的11株SS2相关毒力基因——荚膜多糖(Cps2J),溶菌酶释放蛋白(Mrp),胞外蛋白因子(EF),溶血素(Sly),进行毒力基因检测。检测结果显示:毒力基因型为Mrp+epf+Sly+共有8株,毒力基因型为Mrp+epf+Sly-共有1株,这两种毒力基因型可归为强毒力基因型,占此次健康猪源毒株的81.8%;另外Mrp-epf-Sly-共有2株,属于弱毒和无毒基因型,占健康猪源毒株的18.2%。通过结果分析,预示我市目前SS2的主要流行菌株是同时具有4种毒力因子的高致病性菌株。  相似文献   

3.
猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,其主要毒力因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、纤连蛋白结合蛋白、谷氨酸脱氢酶等,但是这些经典的毒力因子不足以解释猪链球菌病发病的临床症状,而且毒力表型往往与实际毒力及临床症状不符。近年来随着研究的深入,鉴定出一系列毒力相关元件,主要有Sao蛋白、存在于89K毒力岛的双信号转导系统(salk-salR)、dltA基因、pgdA基因、srtA基因、Ⅳ型二肽基肽酶(dipeptidyl peptidaseⅣ,DPPⅣ)、毒力调控子R(control of virulence R,CovR)、烯醇酶(enolase)、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GlnA)等。论文对以上毒力因子研究进展进行综述,以期为SS2毒力因子及致病机制研究提供参考。  相似文献   

4.
猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征与致病性   总被引:6,自引:0,他引:6  
本研究设计并合成7对引物,用PCR方法对猪链球菌7种主要毒力因子,包括谷氨酸脱氢酶(gdh)、溶血素(sly)、胞外蛋白因子(ef)、溶茵酶释放蛋白(mrp)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)、三磷酸甘油醛脱氢酶(gadph)和毒力相关序列orf2进行检测,分析了29株猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征.在被检的25株2型菌株中,共检测出7个基因型.其中10株(40%)的基因型为cps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,7株(28%)表现为cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,4株(16%)表现为eps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orl2+,基因型表现为eps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、eps2/gdh+/sly-/ef-/mrp*/fbps+/gadph+/orf2+、eps2/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-各1株;1株猪链球菌7型(SS7)分离株,基因型表现为cps7/gdh+/sly+/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+;3株猪链球茵9型(SS9)扁桃体分离株,均表现为cps9/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+.可见我国SS分离株的毒力基因分布较为复杂,而且SS2的优势流行菌株是同时具有多种毒力因子的高致病茵株.通过对不同毒力基因型毒株对西藏小型猪的感染试验发现:毒力基因型为cps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+的健康扁桃体分离株SH06-21D对西藏小型猪有较强的致病性,仅次于标准株HA9801,而基因型为sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-的健康扁桃体分离株GZ06-122B对西藏小型猪不表现明显的致病性.  相似文献   

5.
为了探讨猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的Ⅲ型溶血素是否具有溶血活性以及Ⅲ型溶血素在SS2致病过程中的作用,本研究利用同源重组基因敲除法成功构建了SS205ZY的Ⅲ型溶血素(slyrp)基因缺失突变菌株△slyrp及双基因缺失突变菌株△sly/△slyrp,并比较了野生菌株和基因缺失突变菌株的溶血能力以及对小鼠的致病力.结果表明,slyrp基因敲除后可导致SS2裂解红细胞的能力有所下降,而双基因缺失突变菌株△sly/△slyrp的溶血能力完全丧失;slyrp基因敲除后对小鼠的致病力没有影响.结果提示猪链球菌2型Ⅲ型溶血素具有一定的溶血能力,该Ⅲ型溶血素在SS2感染过程中,对溶血素(sly)起协同作用,不是SS2主要的毒力相关基因.  相似文献   

6.
猪链球菌病是由多种致病性链球菌引起的一种细菌性人兽共患传染病,是由D、E及L群链球菌引起猪的多种疾病的总称,其中以2型猪链球菌病的流行最广。已发现的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)的毒力因子包括溶血素(suilysin,SLY)、溶菌酶释放蛋白(muramidase-relased protein,MRP)、细胞外蛋白因子(extracellular factor,EF)、IgG结合蛋白等。 SS2的毒力因子与其致病性密切相关,目前有多种检测SS2毒力因子的方法,常用的有免疫印迹、ELISA和PCR等检测方法。主要就猪链球菌病及其猪链球菌2型毒力因子的检测方法进行概述。  相似文献   

7.
副猪嗜血杆菌抗原性研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
副猪嗜血杆菌是猪格拉瑟氏病的病原,主要引起SPF猪和断奶前后仔猪的纤维素性多发性浆膜炎、多发性关节炎和脑膜炎等。其抗原主要有荚膜、脂多糖和外膜蛋白等,不是所有的菌株都存在荚膜抗原,外膜蛋白抗原是刺激机体产生体液免疫的主要抗原,菌株抗原性的高低与毒力的强弱呈正相关,副猪嗜血杆菌的毒力因子至今仍不清楚,推测其荚膜、外膜蛋白、菌体细胞膜表面的自动传输三聚体蛋白等与副猪嗜血杆菌的毒力有关。至今已经定型的副猪嗜血杆菌有15个血清型,还有约30%为未定型的菌株,其中血清5型副猪嗜血杆菌为强毒力代表菌株,常作为研究副猪嗜血杆菌抗原性的代表菌株。副猪嗜血杆菌抗原性的深入研究必将为新型、高效疫苗的研究奠定坚实的基础。  相似文献   

8.
猪链球菌2型溶血素重组亚单位疫苗的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据已报道的猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)重要毒力因子溶血素的基因序列,利用DNAstar软件选择抗原性好的一段基因序列,设计并合成该段序列的1对特异性引物。以四川强毒株ZY05719的基因组为模板,PCR扩增后定向克隆至pET-32 a表达载体中;重组质粒转化至原核系统大肠杆菌B21中,经诱导表达目的蛋白后,利用小鼠进行免疫效果的测定和佐剂筛选,结果使用ISA206佐剂的溶血素(Hly)蛋白亚单位疫苗保护率高。  相似文献   

9.
胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的一种呼吸道传染性疾病.根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位不同,将胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型,不同血清型的菌株毒力大小不同,致病性也有强弱之别.研究发现与APP致病性有关的毒力因子包括荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、溶血外毒素等,其中溶血外毒素是APP引起猪致病最主要的毒力因子,也是主要的保护性抗原.论文从猪传染性胸膜肺炎溶血外毒素的分子结构、致病机制、免疫原性几个方面对其进行综述,为获得以Apx为抗原制备减毒活疫苗提供参考资料.  相似文献   

10.
猪链球菌2型毒力相关基因在分离株中的分布与突变研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人畜共患病病原,研究表明其致病力与毒力因子的相关性各有不同。为探究SS2毒力因子与致病性间的相关性,明确毒力因子能否用于致病性的评价,本研究通过PCR方法对来自吉林省9个不同规模和经营模式的猪场临床健康猪群的32株SS2分离菌株和5个强毒参考菌株的毒力相关基因(38KD蛋白、GDH、OFS、SLY、HYL、FBPS、GAPDH、ORF2和Ssn A)进行克隆测序,比较这9个毒力相关基因在该37株SS2分离株中的分布差异和突变情况。结果显示各个毒力相关基因在来自临床健康猪群的32个分离株和5个强毒参考株中呈现不均等的分布,在强毒参考菌株中谷氨酸脱氢酶(GDH)、38KD蛋白、分泌性核酸酶(Ssn A)基因的检测阳性率达到100%,在健康猪群分离株中它们的阳性率也超过90%。纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)和溶血素(SLY)基因在强毒参考菌株中阳性率为100%,而在健康猪群分离株中FBPS和Sly基因检测率分别为68.75%和65.63%。透明质酸裂解酶(HYL)基因在两类菌株间阳性率相差较大,在强毒参考株中其阳性率约为60%,在健康猪群分离株中HYL阳性率仅为18.75%。通过测序和Blast比对分析显示,健康猪分离株中毒力相关基因突变情况非常少,而SS2强毒参考株中其突变位点较多,并呈现多种突变方式,GAPDH、HYL、Ssn A基因属于保守序列,突变较少。SLY和GDH基因也是保守序列,在健康猪群分离株中只发现一株无意义突变,但在强毒参考株中却发现多个导致氨基酸改变的突变位点和突变方式。OFS、ORF2和FBPS基因在两组菌中均有突变,但在强毒参考株中存在较多的突变,并且可造成其编码的氨基酸序列改变。提示SS2毒力相关因子复杂,仅仅依据毒力基因是否存在不能判断其毒力的强弱,其突变位点及突变方式对毒力的判断也具有一定的参考意义。  相似文献   

11.
猪链球菌PCR检测技术研究进展   总被引:2,自引:2,他引:0  
猪链球菌是猪的一种重要病原菌,并且也会引起人的链球菌病。有35个荚膜血清型(1/21、~34),通常自发病或死亡猪体分离获得1,2,7,9型和14型菌株,其中2型是毒力最强的血清型。根据已知猪链球菌16 SrRNA及溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、胞壁蛋白或溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、胞外因子(epf)编码基因序列设计特异性引物,建立猪链球菌群和1(14),2(1/2),7型和9型特异性PCR或多重PCR,建立2型致病性菌株和1型高致病性菌株毒力鉴定PCR或多重PCR,用于检测和鉴别临床病料和细菌分离物中的猪链球菌,具有高敏感性和高特异性,与其他致病菌及其他血清的猪链球菌型无交叉反应,为疫病诊断及流行病学的研究提供了快速、简便和有用的工具。  相似文献   

12.
This study was undertaken to determine the prevalence, capsular serotype, and antimicrobial susceptibility of Streptococcus suis isolated from slaughter pigs. Capsular serotype and antimicrobial susceptibility were determined by coagglutination test and agar dilution minimum inhibitory concentration, respectively. Streptococcus suis was isolated from 55 of the 406 palatine tonsillar samples tested (13.8%) and 14 of the 29 sampled herds (48.3%). Of the 55 isolates recovered from slaughter pigs, 26 (47.3%) were untypeable. Of the remaining 29 isolates, capsular serotypes 9 (9 isolates) and 16 (4 isolates) were the most common, followed by capsular serotypes 4 (3 isolates) and 7 (3 isolates). Every capsulated isolate was typeable and no palatine tonsillar sample yielded more than one serotype. Most of isolates were susceptible to low concentrations (MIC90) of amoxicillin (2 microg/mL), ceftiofur (1 microg/mL), and penicillin (1 microg/mL). No correlation was found between antimicrobial susceptibility and capsular serotype.  相似文献   

13.
多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌方法的建立及应用   总被引:6,自引:1,他引:6  
建立了一种快速检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis)的多重荧光PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction)方法。首先,从GenBank中获得Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原编码基因簇中的cps2I和溶菌素释放蛋白基因mrp,用PrimerExpress2.0设计引物和Taqman荧光探针,在ABl7500荧光PCR仪上进行荧光PCR检测。荧光曲线表明该多重荧光PCR可以特异性地检测Ⅱ型猪链球菌,而参考猪链球菌、大肠杆菌等细菌和空白对照均为阴性;检测方法灵敏度达10个细菌的最小检测量,整个过程仅需60min;稳定性试验表明,2次检测所得的ct值之间无统计学差异(P〉0.05)。本试验建立的多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌的方法快速、特异性强,灵敏度高,稳定性好,适合于大批量样品的检验,可广泛用于出入境检疫和动物防疫监督部门的疫情监测。  相似文献   

14.
Isolation of Streptococcus suis using a selective medium.   总被引:4,自引:2,他引:2       下载免费PDF全文
A selective medium containing tryptic soy agar, 5% defibrinated bovine blood, crystal violet, nalidixic acid and gentamicin significantly improved the isolation rate of Streptococcus suis from tonsilar tissue of slaughtered pigs. Ninety-five percent of the S. suis isolates identified in Guelph were confirmed as S. suis in Copenhagen, but only six out of 21 isolates typed as capsular serotype 2 in Guelph were confirmed to possess serotype 2 antigen in Copenhagen. Sixty-four percent of the S. suis isolates were not typable within the current scheme of capsular serotypes from 1 to 13 and type 1/2.  相似文献   

15.
The objective of this study was to determine the capsular serotypes and potential virulence factors of Streptococcus suis isolated from pigs with polyserositis. Among the 24 isolates evaluated, serotype 3 [7 (29%) of the isolates] and serotype 4 [5 (21%)] were the most common. The isolates were also studied for the presence of the genes mrp, epf, and sly, which encode muramidase-released protein (MRP), extracellular factor (EF), and suilysin (SLY), respectively. Of the 24 isolates, 8 carried mrp: 4 of serotype 3, 2 of serotype 2, and 2 of serotype 4. One mrp(+) isolate (serotype 2) also carried the epf gene. All 24 isolates carried the sly gene. The serotype and genotype distribution greatly differed from that reported for isolates from pigs with other clinical manifestations of S. suis infection in other countries.  相似文献   

16.
致病性猪链球菌2型的病原分离鉴定及毒力因子的PCR检测   总被引:6,自引:3,他引:3  
通过对广西某猪场急性死亡的猪进行病原分离,分离到革兰氏阳性球菌,用链球菌快速鉴定试剂条Rapid ID 32 Strep鉴定为猪链球菌2型;并对分离菌进行猪链球菌2型荚膜多糖抗原(cps2J)及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白(MRP)、细胞外蛋白因子(EF)和溶血素(SLY)的多重PCR检测,同时对cps2J基因进行序列测定,与GenBank发表的猪链球菌2型相比,同源性为98.8%,毒力因子MRP、EF和SLY检测均为阳性,证实广西某猪场急性死亡的猪为高毒力猪链球菌2型感染所致。动物试验中,该菌可引起小白鼠部分死亡,家兔体温最高升至40.3℃,最后败血而死。  相似文献   

17.
目的预测猪链球菌2型(SS2)溶血素(SLY)B细胞表位。方法以DNAstar分析为主,综合分析二级结构、亲水性、表面可及性及抗原性指数,辅以吴玉章氨基酸抗原指数计算方法进行SS2溶血素B细胞表位预测。结果推测最有可能的B细胞表位位于溶血素N端第74~85、231~244区域位。结论应用多参数预测SS2溶血素的特征,为表位疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

18.
湖南省猪链球菌的分离与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
从病猪脏器病料中通过细菌培养、生化试验分离鉴定出了121株猪链球菌.经PCR技术鉴定马链球菌兽疫亚种28株,占23.1%,猪链球菌24株,占19.8% ,其中猪链球菌2型4株,占3.3%,猪链球菌9型2株,占1.7%,猪链球菌1型和7型都没检测到,证实省内除了猪链球菌2型外,也存在其他血清型的猪链球菌.  相似文献   

19.
20.
Streptococcus suis strains (n=411), isolated from diseased pigs in seven European countries were serotyped using specific antisera against serotype 1 to 28, and were phenotyped on the basis of their muramidase-released-protein (MRP) and extracellular-factor protein (EF) production. Overall, S. suis serotype 2 appeared to be most prevalent (32%), followed by serotype 9 (20%) and serotype 1 (12%). Serotype 2 was most frequently isolated in France, Italy and Spain, whereas serotype 9 was most frequently isolated in Belgium, The Netherlands and Germany. In the United Kingdom serotypes 1 and 14 were most frequently isolated. High percentages of S. suis serotype 1, 2, 1/2 and 14 strains, isolated from tissues associated with S. suis infections such as brain, serosa, joint, heart and organs expressed the EF-protein, indicating that in these serotypes expression of EF is likely to be associated with virulence. In contrast, strains belonging to serotype 7 and 9, isolated from tissues associated with S. suis infections did not produce EF. These results strongly suggest that in the serotypes 7 and 9 EF expression is not related to virulence. More than 80% of the S. suis serotype 9 strains produced an MRP* protein, a high molecular variant of the 136kDa MRP. Expression of MRP* in serotype 9 strains is possibly associated with virulence.  相似文献   

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