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为了明确洛阳某地区兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的致病菌及其药物敏感性，本试验无菌采取病兔的病灶进行细菌分离纯化、革兰染色镜检、16S rDNA序列鉴定，并采用药物纸片琼脂扩散法进行分离菌的药敏试验。分离鉴定结果显示，从病兔肺脏、肝脏和脾脏中分离的致病菌为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示，分离的金黄色葡萄球菌对红霉素、麦迪霉素、卡那霉素、复方新诺明、氨苄西林、丁胺卡那、头孢氨苄、头孢呋辛、呋喃唑酮具有耐药性；对羧苄西林、哌拉西林、诺氟沙星、多黏菌素B、多西环素、庆大霉素、新霉素敏感。结果表明该兔场家兔发病原因为金黄色葡萄球菌感染，且分离菌对多种药物耐药，通过药敏试验结果合理用药可减少细菌耐药性的发生。 相似文献
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粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(clfa A)基因, 设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行clfa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定.结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990 bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌clfa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础. 相似文献
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为了解河南省规模化奶牛养殖场金黄色葡萄球菌的分布及耐药情况,从具有代表性的奶牛养殖场采集400批样品,采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统对样品中的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离出的金黄色葡萄球菌进行耐药性分析。结果显示,该研究共分离金黄色葡萄球菌82株,分离率为20.5%。经耐药性分析发现,分离得到的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、氨苄西林耐药严重,耐药率分别为100%、86.6%和98.8%;对头孢菌素类、林可霉素类、喹诺酮类抗生素较为敏感。该研究结果提示河南省规模化奶牛养殖场金黄色葡萄球菌存在严重的耐药现象,建议在畜禽生产中要谨慎使用抗生素。 相似文献
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粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A（c1fa A）基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行c1fa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamH I和Xba I双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌c1fa A序列同源性为99％;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。 相似文献
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为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌圈直径(DIZ)、最小抑菌浓度(MIC)和抑菌曲线分析氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果。结果表明：从乳样中分离到一株细菌,该分离株革兰氏染色、镜检后呈蓝紫色并排列成葡萄串状,触酶、血浆凝固酶和甘露醇发酵试验结果均为阳性,其基因组DNA中能扩增出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶(nuc)基因,16S rDNA基因序列与金黄色葡萄球菌的相似性为99.7%,判断该分离菌为金黄色葡萄球菌。氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株均产生抑菌作用,DIZ大小为氟苯尼考纳米凝胶>氟苯尼考注射液>氟苯尼考原料药,均表现为高度敏感,其中氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株的DIZ均显著高于氟苯尼考原料药和氟... 相似文献
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探究乌鲁木齐生牛乳中金黄色葡萄球菌经典肠毒素携带情况及分离株同源性差异，为金黄色葡萄球菌的防控提供参考。对乌鲁木齐地区采集的131份生牛乳样品采用特异性选择培养基结合PCR方法分离鉴定金黄色葡萄球菌，并通过PCR方法检测金黄色葡萄球菌5种经典肠毒素(sea、seb、sec、sed、see)携带情况和根据测序结果对分离株进行同源性分析。结果显示，共分离鉴定到金黄色葡萄球菌13株，总分离率为9.92%(13/131);13株金黄色葡萄球菌经典肠毒素阳性菌株5株，阳性率为38.46%;13株金黄色葡萄球菌的同源性在93.7%～99.7%之间，遗传差异在0.3～6.6之间。研究表明，该地区生牛乳中存在一定金黄色葡萄球菌的污染，经典肠毒素阳性率较高，不同来源的分离株同源性高、差异性小。 相似文献
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金黄色葡萄球菌α-溶血素基因的克隆与序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
参考Gary S Gray和Michael Kehce在《传染与免疫》杂志上发表的关于金黄色葡萄球菌α溶血素蛋白的基因序列,设计合成1对引物,从分离自牛体的野生株金黄色葡萄球菌中提取细菌总DNA,对α溶血素蛋白基因进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条约960 bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18 T质粒载体中,进行核苷酸序列分析,然后与报道的α溶血素蛋白基因进行比较。结果表明:所鉴定的野生株金黄色葡萄球菌的α溶血素蛋白基因序列与报道的核苷酸的同源性高达99.99%以上,证实为金黄色葡萄球菌Wood 46株α溶血素蛋白基因。 相似文献
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PCR技术在鼠金黄色葡萄球菌检测中的初步研究 总被引：5，自引：0，他引：5
根据已公布的金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的序列 ,设计并合成一对特异性的引物 ,利用PCR技术扩增nuc基因片段。对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株抽提的DNA进行扩增。结果金黄色葡萄球菌PCR产物出现 6 6 8bp的特异性DNA扩增片段 ,而其他非金黄色葡萄球菌未出现扩增片段 ,证实了合成的引物对金黄色葡萄球菌具有特异性。将抽提的金黄色葡萄球菌DNA进行系列稀释 ,测定此PCR体系的敏感性。结果显示 ,该PCR体系能检出 3pg金黄色葡萄球菌DNA ,且从抽提DNA到PCR扩增及电泳结束仅需 4h。因此 ,研究所建立的扩增耐热核酸酶nuc基因检测鼠金黄色葡萄球菌的PCR方法 ,具有快速、可靠、敏感和特异的特点 ,可用于临床样品和金黄色葡萄球菌感染时的检测 ,适合应用于实验大小鼠的监测 相似文献
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为了克隆奶牛乳房炎金黄色(葡萄球菌裂解性噬菌体裂解酶Lys IMEP5基因,分析其生物信息学特性,以本实验室分离的奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体v B_Sau S_IMEP5为材料,根据其全基因组学信息,获取裂解酶基因序列,应用Primer 5.0设计特异性引物。采用PCR方法扩增并克隆Lys IMEP5基因,通过BLAST进行序列比对分析,利用在线软件对蛋白结构进行预测。成功克隆到裂解酶Lys IMEP5基因,测序结果通过DNAMAN比对与原序列完全匹配,无任何基因突变,同源性分析显示,与已报道的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶相似性最高为83.1%;裂解酶Lys IMEP5基因序列全长1371 bp,共编码456个氨基酸,为亲水性蛋白,分子质量为51.717 k Da,理论等电点为9.70;Lys IMEP5同时存在CHAP片段和Amidase-3片段;该蛋白无跨膜区,无信号肽,以无规则卷曲为主。从奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体中成功克隆出Lys IMEP5基因,通过对该蛋白的结构预测分析为后续克隆表达及开发新型绿色抑菌剂奠定了基础。 相似文献
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作者对自然状态发酵牛肉、接种金黄色葡萄球菌的发酵牛肉和接种发酵剂(植物乳杆菌、戊糖片球菌)与金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌及其肠毒素等指标在加工过程中的变化规律做了研究。研究结果表明,自然发酵牛肉中没有金黄色葡萄球菌及其肠毒素;接种发酵剂和金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌先是上升然后快速下降,且金黄色葡萄球菌肠毒素为阴性;接种金黄色葡萄球菌的发酵牛肉中金黄色葡萄球菌及其肠毒素都显著高于接种发酵剂的发酵牛肉(P＜0.05)。由试验结果可知,发酵剂植物乳杆菌和戊糖片球菌对金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用。 相似文献
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目的:对某进出口公司送检的一批含乳加工食品进行金黄色葡萄球菌检验时检出的一株可疑菌株进行分析、鉴定和总结,避免发生由于不典型的金黄色葡萄球菌漏检造成的食品安全事件.方法:按GB 4789.10-2010《食品微生物学检验:金黄色葡萄球菌检验》进行取样和增菌,从BP平板分离出的可疑菌落经血琼脂平板溶血试验、革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验等进行分析,随后利用全自动微生物鉴定仪及实时荧光聚合酶链式反应(PCR)法进行比对分析和确认.结果:与金黄色葡萄球菌标准菌株相比较:该菌株菌落直径较大,在血琼脂平板上呈白色菌落,溶血现象不明显,血浆凝固酶结果呈阳性;全自动微生物鉴定仪及实时荧光PCR鉴定金黄色葡萄球菌呈阳性.结论:经分析确认,检出可疑菌落为一株不典型金黄色葡萄球菌.实时荧光PCR法能够快速、准确地检出金黄色葡萄球菌,有效缩短检测周期.多种检测方法结合,可有效克服漏检的可能. 相似文献
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为检测江苏省某奶牛场中乳房炎是否为金黄色葡萄球菌所致,采取4份患病乳汁样本进行试验分离和鉴定,并针对金黄色葡萄球菌采用分离后鉴定,结果显示,分离到的2株致病菌为金黄色葡萄球菌,其他菌株还包括大肠杆菌、肠球菌等,为多种致病病原菌同时引起,主要为金黄色葡萄球菌感染。 相似文献
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为了解生驼乳中金黄色葡萄球菌的污染状况,本文从骆驼养殖户中采集了90 份生驼乳,对其进行金黄色葡萄球菌的增菌、培养和分离,并利用全自动微生物生化鉴定仪进行鉴定,同时对分离出的阳性菌株采用纸片扩散法进行耐药性分析。生化鉴定结果表明,90 份生驼乳样本中分离出8 株金黄色葡萄球菌,分离率8.9%。耐药性分析表明,8 株阳性菌株对青霉素耐药率达75%;对氧氟沙星敏感率最高,可达100%;对头孢哌酮钠、环丙沙星敏感性较高,敏感率可达87.5%;对链霉素、卡那霉素、阿莫西林、头孢唑啉和头孢西丁,四环素、氯霉素、头孢噻肟、林可霉素、苯唑西林、庆大霉素较敏感,敏感率在37.5%~75.0%之间。本研究为对生驼乳中的金黄色葡萄球菌的污染防控提供了参考依据。 相似文献
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OBJECTIVES: To evaluate staff nasal colonisation with meticillin-resistant Staphylococcus aureus in a veterinary orthopaedic referral hospital, and its effect on the occurrence of meticillin-resistant Staphylococcus aureus-associated postoperative wound complications in orthopaedic and spinal surgical patients. METHODS: Nasal bacterial swabs were collected from veterinary staff and environmental surfaces swabbed at six monthly intervals for meticillin-resistant Staphylococcus aureus monitoring over an 18 month period. The incidence of meticillin-resistant Staphylococcus aureus-associated postoperative wound complications of two veterinary orthopaedic surgeons was reviewed for a period when one was positive for nasal meticillin-resistant Staphylococcus aureus. RESULTS: Meticillin-resistant Staphylococcus aureus was isolated from a maximum of two out of 10 staff on each occasion. The persistently infected clinician was primary surgeon in 180 cases, of which four developed meticillin-resistant Staphylococcus aureus-associated wound complications. None of 141 operations led by the other surgeon developed meticillin-resistant Staphylococcus aureus-associated complications. This difference is not statistically significant (P=0.0974). The 95 per cent confidence interval for this odds ratio was 0.83 to 44.0. Meticillin-resistant Staphylococcus aureus resistance patterns of the human nasal isolates and three of four wound-associated isolates were similar. CLINICAL SIGNIFICANCE: Veterinary workers are at increased risk for meticillin-resistant Staphylococcus aureus colonisation, so it is likely that many veterinary patients are treated by meticillin-resistant Staphylococcus aureus-positive staff. Nasal colonisation of veterinary surgeons with meticillin-resistant Staphylococcus aureus appears to present only a small risk to their patients when appropriate infection control procedures are followed. 相似文献
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为确定患乳房炎奶牛乳中金黄色葡萄球菌的流行性和耐药性状况,试验自2018年4月至2018年5月采集了新疆地区70例和内蒙古地区50例患乳房炎奶牛生鲜乳样。通过对奶样中金黄色葡萄球菌进行增菌培养、分离纯化,KB纸片扩散法药敏试验及PCR耐药基因检测发现,新疆和内蒙古地区奶样中金黄色葡萄球菌分离率分别为28.6%和54.0%;新疆地区分离的金黄色葡萄球菌菌株对青霉素G的耐药性最高(75.0%),其次是磺胺异噁唑(60.0%)、林可霉素(55.0%);内蒙古地区的金黄色葡萄球菌菌株同样对青霉素G高度耐受,耐药率为70.4%,其次为林可霉素(63.0%)、克林霉素(51.9%);两地区所分离菌株中,88.9%以上携带多种耐药基因,呈现多重耐药性;两地区所检出的高频耐药基因分别是新疆地区的ermA(30.0%)、dfrS1(30.0%)基因和内蒙古地区的lnuA(46.2%)基因。 相似文献