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大通量的抗生素药敏检测盒的设计及应用 总被引：2，自引：0，他引：2
基于琼脂稀释法,设计制作了96点阵抗生素药敏检测盒。以NCCLS（2007）抗生素最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)微量稀释法为对照,测定了分离自规模化猪场饲养员和幼儿园、中学学生的98株大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星和中药三黄汤的药物敏感性。结果表明,两种方法测定的最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)、MIC都表现高度对称,其差值的平均值都在一倍稀释度内,在差值0.5 μg/mL范围内都达到90%以上的符合。MBC与MIC高度相关,r=0.94~0.99。这些指标说明两种方法测定的MBC与MIC平行性好。以总体的抗生素敏感性频率比较,两种方法测定值也很相近,符合率为93.93%。本检测盒还可以准确测定中药三黄汤对大肠杆菌的MIC（125～500 mg/mL）。96点阵抗生素药敏检测盒是适合于实验室进行大规模抗药性监测的新工具,具有简易、准确、快速、大通量、节约的优点。配合96孔培养板,一次可以测定96株病原菌对一种抗生素或中药的敏感性。 相似文献
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上海市动物源性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验 总被引：1，自引：0，他引：1
为掌握上海市动物源性大肠杆菌的耐药情况及耐药规律,对2013—2015年在门诊畜禽中分离到的大肠杆菌进行药敏试验。共分离到236株大肠杆菌,其中猪源164株、禽源72株。选用15种抗生素,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,对大肠杆菌进行药物敏感试验。结果表明,无论是猪源大肠杆菌,还是禽源大肠杆菌,对大多数抗生素的耐药程度均较高。其中,对磺胺异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和大观霉素等抗生素的耐药情况较为严重;对丁胺卡那霉素和阿莫西林/棒酸2种抗生素较为敏感,耐药率低于20%。从耐药谱型来看,猪源大肠杆菌较禽源大肠杆菌具有更加复杂的耐药谱型。 相似文献
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为了建立奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断与药敏试验方法,用刃天青钠取代大肠杆菌选择培养基MQQ中的酚红指示剂,通过对刃天青的工作浓度、大肠杆菌接种量和培养时间等参数的研究,建立了奶牛乳房炎大肠杆菌刃天青微量板快速诊断方法.将不同细菌及其感染模拟奶样进行刃天青微量板快速培养结果显示,此刃天青微量板对大肠杆菌具有很强的选择培养特性,能在10 h内获得明确诊断结果,并能反映奶牛乳腺大肠杆菌感染强度.对89份临床奶样进行大肠杆菌刃天青微量板快速诊断敏感性和特异性检测,结果显示,此刃天青微量板法诊断大肠杆菌阳性奶样敏感性高达100%,诊断大肠杆菌阴性奶样特异性高达94.9%,总符合率高达95.5%.在此基础上用矫正浓度10种抗生素包被微量板,分别用10株大肠杆菌纯培养菌株及其感染模拟奶样和10份大肠杆菌阳性奶样进行快速药敏试验,所获结果与标准纸片扩散法完全一致.这些研究结果表明,本研究建立的刃天青微量板法可以取代常规方法用于奶样大肠杆菌的快速诊断及药敏试验. 相似文献
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<正>兽医临床常用的药敏试验方法主要有两种,即扩散法和稀释法。扩散法属手工测试方法,通过测试药物纸片或者牛津杯在固体培养基上的抑菌圈的大小,判断细菌对该种药物是否敏感。稀释法包括试管稀释法和微量稀释法,通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况,判断其最低抑菌浓度(MIC)。由于扩散法操作简单,成本低,已经被大多数兽医临床实验室和基层单位所采用。扩散法又包括纸片法、牛津杯法和打孔法,目前兽医临床应用较多的方法是纸片法,以下针对该法进行分析。 相似文献
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为了解福州动物园动物细菌耐药现状,选用肠球菌为指示菌,采用琼脂平板筛选法(ADSP法)筛选高水平耐庆大霉素肠球菌(HLGRE)。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定耐药菌株对6种抗菌药物的耐药性,用PCR法对分离出的不同来源的高水平耐氨基糖苷类肠球菌进行菌种鉴定。从动物园圈养野生动物共分离出78株HLGRE,不同动物来源的分离率不同,其中草食动物HLGRE分离率最低,占55.56%;肉食动物HLGRE分离率最高,占84.38%。药敏试验结果显示,不同动物来源的HLGRE均对红霉素和土霉素的耐药率最高,分别为100%和96.1%,对氨苄西林和万古霉素的耐药率最低。 相似文献
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【目的】探讨黄芩对安普霉素耐药大肠杆菌的耐药消除作用。【方法】制备黄芩醇提物,采用琼脂稀释法检测黄芩醇提物对耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),通过耐药消除试验和影印法检测耐药消除率。进而采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法检测消除前后大肠杆菌耐药性的变化,扫描电镜法观察细菌形态的变化,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因相对表达量的变化。【结果】黄芩醇提物对安普霉素耐药大肠杆菌的MIC为41.25 mg/mL,对耐药大肠杆菌的耐药消除率为11.7%～17.0%。黄芩醇提物处理后,大肠杆菌的MIC值由256μg/mL降至16～32μg/mL;扫描电镜观察发现,黄芩醇提物处理组细菌表面受损,菌体形态异常;实时荧光定量PCR检测结果显示,黄芩醇提物极显著提高了大肠杆菌中ompF、fimA、phnE和fhuF基因mRNA的相对表达量(P<0.01)。【结论】黄芩醇提物能提高ompF、fimA、phnE和fhuF基因的表达水平,破坏细菌表面,提高大肠杆菌敏感性,发挥对安普霉素耐药大肠杆菌的耐药消除作用。 相似文献
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采用微量肉汤稀释法对2010-2012年分离的736株不同动物来源大肠杆菌进行26种临床常用抗菌药物敏感性试验,利用WHONet5.6软件对实验数据进行统计处理,分析分离的大肠杆菌对各种药物的耐药率,为黑水地区大肠杆菌的流行病学研究和防治药物筛选提供理论依据。 相似文献
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肖履中 《上海畜牧兽医通讯》2000,(2):34-35
兽医临床同样存在病原菌耐药性明显增多的威胁 ,尽管新的抗菌药不断问世 ,但常见病原菌的耐用药性也随之增加 ,因此 ,有效的抗生素治疗更加有赖于准确的抗菌药敏试验。药敏试验有纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法及新推出的Ｅｔｅｓｔ法等方法。纸片扩散法 (Ｋｅｒｂｙ-Ｂａｕｅｒ纸片扩散法 ,简称Ｋ -Ｂ法 )是 4 0年代建立的 ,操作方便 ,费用不多 ,测定的药物随意可变 ,灵活性强 ,一直是兽医临床常用的一种药敏试验方法。近来 ,这种古老的方法 ,不断增添新的内容 ,很有重新认识的必要。1 方法日趋标准化纸片扩散法是以测量抑菌环直径来… 相似文献
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本试验分别采用微量肉汤稀释法和改良结晶紫法对65株文昌鸡源大肠杆菌进行15种临床常用抗菌药物耐药性检测和生物被膜形成能力鉴定,以了解海南文昌鸡源大肠杆菌耐药谱型和生物被膜表型之间的相关性。结果显示,65株文昌鸡源大肠杆菌中89.23%具有多重耐药现象,64.62%具有交叉耐药现象;81.54%的菌株具有不同的生物被膜形成能力,只有18.46%的菌株无细菌生物被膜形成能力。本试验结果表明,具有生物被膜形成能力的菌株大都表现出多重耐药性,但交叉耐药性与无生物被膜形成能力菌株相差不明显。 相似文献
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《上海畜牧兽医通讯》2017,(6)
为了掌握河南省猪源大肠杆菌的耐药性情况,从规模化猪场抽取样品240份,通过细菌的分离、纯化,采用BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定系统对分离的大肠杆菌进行鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。结果显示:共分离菌株171株,分离率为71.3%;分离菌株对四环素、磺胺异恶唑、复方新诺明、强力霉素、氨苄西林、氟苯尼考耐药严重,耐药率均在80%以上。表明河南省猪源大肠杆菌耐药情况较为严重。 相似文献
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为了解主要动物性食品生产链大肠杆菌(Escherichia coli)的耐药情况,采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）推荐的微量肉汤稀释法,对源自猪肉、鸡蛋、鸡肉生产链的350株大肠杆菌进行常用10种抗菌药(组合)的敏感性测定,参考CLSI标准（2010）判定药敏结果。结果显示,350株大肠杆菌对四环素（TET）耐药率（82.0%）最高,其次是甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（SXT）（75.4%）,对庆大霉素（GEN）耐药率（26.9%）最低。尽管不同来源大肠杆菌对10种抗菌药中大部分药物耐药率较一致,但不同生产链环节的菌株耐药率却存在差异。76.2%（267株）受试菌株多重耐药,其中以8重耐药菌株（17.7%）最多。菌株共产生108种耐药谱,猪肉、鸡肉和鸡蛋生产链中大肠杆菌的耐药谱分别为40、46和55种,但优势耐药谱不明显。菌株数较多的耐药谱为：NAL-CIP-AMP-AMC-CEF-SPT-GEN-SXT-TET（21/350）、TET（20/350）、NAL-CIP-AMP-AMC-CEF-SPT-SXT-TET（16/350）、NAL-CIP-AMP-CEF-FLO-SPT-SXT-TET（16/350）及SPT-SXT-TET（15/350）。提示,主要动物性食品生产链大肠杆菌耐药情况较严重,应加强其耐药性连续监测与控制。 相似文献
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本试验通过对大肠杆菌进行分离纯化、生化鉴定等步骤分离出三株大肠杆菌,再用肉汤稀释法对大肠杆菌进行药敏试验。结果表明,其中全部3株大肠杆菌都对硫酸庆大霉素、硫酸安普霉素、硫酸黏菌素、恩诺沙星、诺氟沙星、达氟沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、环丙沙星、硫酸新霉素敏感。对大环霉素一株中度敏感,两株不敏感。对硫酸链霉素一株中度敏感,两株不敏感。其中全部的三株大肠杆菌对泰妙霉素耐药,而泰乐霉素则不起任何有效作用。 相似文献
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《现代畜牧兽医》2021,(3)
为有效防治鹅大肠杆菌病并分析其耐药性,无菌采集疑似大肠杆菌感染鹅的肝脏、脾脏等组织,进行细菌分离培养、生化鉴定、PCR鉴定、16S rRNA序列比对。结果表明,所分离的细菌为大肠杆菌。通过血清凝集试验,鉴定其主要血清型为O88、O171、O59、O27。应用小鼠对4种血清型代表菌株进行致病性试验,结果分离的菌株致小鼠发病率为92.5%,死亡率为87.5%,表现腹腔有纤维素性渗出物,肝淤血肿大且表面有纤维素性伪膜等病理变化。对代表菌株采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,结果显示,分离株对甲氧苄啶、磺胺异恶唑敏感,对黏杆菌素、美罗塔南等11种临床常用药物高度耐药。研究表明,从辽宁省黑山县分离的鹅大肠杆菌具有较强的致病性和较高的耐药性。 相似文献