共查询到19条相似文献，搜索用时 234 毫秒
1.
《中国畜牧杂志》2020,(10)
为探讨核因子E2相关因子(Nrf2)基因在牛子宫内膜上皮细胞抗氧化应激中的作用,本实验利用激动剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)激活Nrf2,研究其对牛子宫内膜上皮细胞中血红素加氧酶-1(HO-1)和醌NADH脱氢酶1(NQO1)表达以及相关抗氧化酶活性的影响。结果显示:300μmol/L终浓度H_2O_2处理细胞4h,牛子宫内膜上皮细胞存活率为70%,活性氧(ROS)水平增加(P0.01)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活性下降(P0.05)、丙二醛(MDA)含量上升(P0.05);用终浓度为30μmol/L的tBHQ预处理2 h可提高细胞中SOD和GSH-Px酶活性、降低ROS及MDA含量(P0.05)。氧化应激时Nrf2和NQO1的mRNA表达量上升(P0.05),HO-1的mRNA表达显著上升,tBHQ预处理可以显著增加HO-1和NQO1的mRNA的表达;在正常和氧化应激状态下,tBHQ均可显著增加牛子宫内膜上皮细胞Nrf2、HO-1及NQO1蛋白表达。综上可知,tBHQ通过激活Nrf2可提高相关抗氧化应激基因的表达,起到抗细胞损伤作用。 相似文献
2.
杨昊天 陈永平 王志强 黄宇翔 马志刚 邹跃 魏念冬 张红 李鑫 董佳强 吕明哲 李洪彬 刘力威 杨昊轩 张国华 刘雪松 钟鹏 石荷叶 寇玉红 陈志峰 《畜牧兽医学报》2023,54(2):779-786
本研究拟探索右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）对大鼠急性应激致肾损伤的保护作用,并从氧化应激的角度探索DEX对大鼠肾的保护通路。本研究使用了急性束缚应激模型,其中,大鼠被迫游泳15 min,并束缚3 h。本试验采用生化检测、组织病理学切片观察以评估肾功能,然后测定了氧化应激以及氧化应激的相关通路蛋白。旷场试验证实成功建立了急性应激模型。急性应激引起的肾损伤增加了NOX4,降低了Nrf2/HO-1/NQO1表达水平。DEX可降低NOX4表达,同时升高Nrf2/HO-1/NQO1的表达水平。DEX治疗组与急性应激组相比的肾生化结果明显恢复正常,病理切片观察损伤显著降低。试验结果表明,DEX治疗急性应激可影响NOX4/Nrf2/HO-1/NQO1信号通路,并抑制氧化应激。因此,DEX对急性应激引起的肾损伤具有保护作用,并在应激综合征中具有潜在的临床应用。 相似文献
3.
利用小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)和C57BL/6小鼠建立体外和体内模型，探究香叶木素对顺铂致肾损伤的保护作用。体外试验结果显示，香叶木素能显著降低顺铂诱导的mRTECs细胞内活性氧水平；细胞凋亡结果显示，其对细胞凋亡有明显的抑制作用。同时，香叶木素能激活Nrf2信号通路，提高HO-1和NQO1的表达水平，抑制炎症相关MAPK通路，减少mRTECs的凋亡。通过检测小鼠体内血液中尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)水平，发现香叶木素可明显缓解顺铂诱导的肾损伤。此外，香叶木素通过提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平，降低丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)水平，抑制顺铂诱导的氧化应激。肾组织病理组织学分析结果显示，香叶木素能明显减轻顺铂所致的小鼠肾损伤。肾脏组织Western blot结果显示，香叶木素以剂量依赖的方式激活Nrf2通路，通过抑制MAPK信号通路，提升Bcl2的表达及降低Bax的表达，进而抑制细胞凋亡，以保护肾脏免受顺铂诱导的肾损伤。结果提示，香叶木素可能成为防治顺铂诱导肾损伤的一种有效药物。 相似文献
4.
5.
本试验旨在通过脂多糖(LPS)诱导猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)来建立氧化应激模型,探讨壳寡糖(COS)的抗氧化作用效果。采用噻唑蓝(MTT)法检测LPS和COS对IPEC-J2作用12、24、48 h后细胞增殖活性的变化;选择适宜浓度LPS(1.0μg/m L)和COS(200μg/m L)作用于IPEC-J2,分为对照组、LPS组、COS组、LPS+COS组。采用Western Blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果表明:1.0μg/m L的LPS对IPEC-J2作用24 h,细胞增殖的抑制率为41.6%,为造模的最适浓度和作用时间;COS在一定浓度范围内对IPEC-J2有增殖作用,其浓度为200μg/m L时效果最佳,作用时间为24 h时,细胞增殖率达到126.3%。LPS+COS组较对照组的SOD、CAT活性和M DA含量差异不显著(P0.05),Nrf2和HO-1蛋白相对表达量显著升高(P0.05);LPS+COS组较LPS组的Nrf2蛋白相对表达量显著升高(P0.05),HO-1有升高趋势,但差异不显著(P0.05),SOD、CAT活性显著升高(P0.05),M DA含量显著降低(P0.05)。由此可见,LPS诱导IPEC-J2氧化应激,而COS可进一步促进Nrf2和HO-1蛋白的高表达,并提高抗氧化酶的活性,降低氧化产物含量,从而增强细胞对氧化应激的抵抗力,起到保护作用。 相似文献
6.
《畜牧兽医学报》2016,(3)
研究棕榈酸(PA)和硬脂酸(SA)作用HepG2细胞后,对其血红素加氧酶-1(HO-1)和核转录因子Nrf2在转录和蛋白质水平的影响。PA和SA分别以0.25、0.5、0.75、1.0mmol·L-1浓度刺激HepG2细胞24h后,采用荧光定量PCR以及蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞HO-1和Nrf2的mRNA转录及蛋白质表达量的变化。结果表明:PA作用细胞后,与对照组相比,随着PA浓度的递增HepG2细胞中Nrf2和HO-1的mRNA转录及蛋白质的表达量均极显著增加(P0.01);而SA组浓度为0.25、0.5、0.75 mmol·L-1时,Nrf2和HO-1的mRNA转录及蛋白质的表达量与对照组相比极显著增加(P0.01),当SA浓度为1.0mmol·L-1时其增加量相对减少。在1mmol·L-1范围内,较高浓度的PA和较低浓度的SA对HepG2细胞Nrf2和HO-1的mRNA转录及其蛋白质的诱导作用显著。 相似文献
7.
试验旨在探讨黄芩苷酯化物(BE)对H2O2诱导的IPEC-J2细胞氧化应激的缓解作用及其分子机制。采用CCK-8法检测细胞活性筛选出黄芩苷酯化物的适用浓度;采用ELISA法检测细胞中活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量;采用qPCR法检测细胞中HO-1和NQO-1 mRNA的表达量;采用WB法检测胞浆Nrf2蛋白、胞核Nrf2蛋白和HO-1的蛋白表达水平;免疫荧光法检测Nrf2蛋白入核情况。结果显示,BE的适用浓度为10、20、40 mmol/L;与对照组相比,H2O2组中ROS、MDA含量显著升高(P<0.05);SOD、CAT活性显著下降(P<0.05);胞浆Nrf2蛋白与胞核Nrf2蛋白表达量显著升高(P<0.05);HO-1 mRNA的表达量显著升高(P<0.05);NQO-1 mRNA (P<0.05)表达量显著降低。与H2O2组相比,中、高剂量BE显著降... 相似文献
8.
9.
10.
研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h,立即处死,取卵巢组织进行切片观察并检测丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力。Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达。免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase 3蛋白表达。结果显示,热应激引起小鼠卵巢组织氧化损伤。黄芩苷能显著降低组MDA和NO含量,显著或极显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。此外,热应激可显著增加Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达,黄芩苷干预后Nrf2等蛋白的表达降低。黄芩苷干预后Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2、Caspase 3蛋白表达显著升高。上述表明,黄芩苷能缓解热应激下小鼠卵巢组织的氧化损伤及细胞凋亡,其机制可能与提高抗氧化能力及Nrf2蛋白的表达有关。 相似文献
11.
【目的】 探究活化核因子红系2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）对热应激肉鸡心肌细胞氧化损伤的缓解作用及其机制。【方法】 利用差速贴壁法结合化学纯化法制备肉鸡原代心肌细胞。将心肌细胞随机分为对照组（Control组）、热应激组（HS组）和Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚（tert-butylhydroquinone,TBHQ）预处理热应激组（TBHQ+HS组）。对照组心肌细胞正常培养不做任何处理,HS组心肌细胞置于高温（43 ℃）培养箱处理2 h,TBHQ+HS组心肌细胞用50 μmol/L TBHQ预处理12 h,再进行热应激处理。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组心肌细胞相对活力;用比色法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性;用实时荧光定量PCR检测Nrf2、血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）、谷氨酰半胱氨酸连接酶（glutamate cysteine ligase catalytic,GCLC）和NAD （P） H：醌氧化还原酶1（NAD （P） H：quinone oxidoreductase 1,NQO1） mRNA表达水平;用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量。【结果】 与对照组相比,热应激组肉鸡原代心肌细胞形态发生改变,出现空泡网状结构,心肌细胞的相对活力和SOD活性极显著降低（P<0.01）,MDA含量极显著升高（P<0.01）,细胞培养液中LDH活性极显著升高（P<0.01）,Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路下游NQO1和GCLC mRNA表达升高,但差异不显著（P>0.05）,Nrf2和HO-1 mRNA表达显著增加（P<0.05）,但Nrf2总蛋白和HO-1蛋白表达量增加不显著（P>0.05）;与热应激组相比,TBHQ预处理热应激组心肌细胞内空泡网状结构减少,心肌细胞的相对活力显著升高（P<0.05）,SOD活性极显著升高（P<0.01）,MDA含量显著降低（P<0.05）,细胞培养液中LDH活性极显著降低（P<0.01）,Nrf2/ARE信号通路下游NQO1和GCLC基因的表达水平显著上调（P<0.05）,Nrf2基因和总蛋白表达量显著增加（P<0.05）,HO-1基因和蛋白表达量极显著增加（P<0.01）。【结论】 活化Nrf2可以上调Nrf2/ARE信号通路下游相关抗氧化基因和蛋白表达,提高热应激肉鸡心肌细胞的抗氧化能力,缓解热应激诱导的氧化损伤,提示Nrf2可能是肉鸡心肌细胞抗热应激氧化损伤的有效分子靶点。 相似文献
12.
旨在研究Nrf2/HO-1通路在日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)感染引起神经细胞损伤中的作用机制,本试验建立Nrf2激动剂叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone, TBHQ)处理JEV感染的小鼠神经瘤母N2a细胞的体外感染模型。N2a细胞四种处理分别为空白DMEM对照组(Control)、JEV感染组(JEV)、TBHQ处理组(TBHQ)、JEV感染+TBHQ处理组(JEV+TBHQ)。不同处理后观察细胞病变,检测ROS水平及MDA、SOD、CAT含量变化,利用qPCR和WB技术检测Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白的表达,并通过免疫荧光法检测各组细胞Nrf2蛋白表达情况,以及炎性因子及病毒含量。结果显示,JEV感染N2a细胞后随着时间延长ROS水平逐渐升高,且在36 h ROS水平最高。JEV感染后36 h Nrf2、HO-1的mRNA均升高,炎性因子水平升高。JEV感染N2a细胞后细胞皱缩,胞膜破裂,ROS、MDA水平升高,SOD、CAT水平降低;用40μmol·L-1 TBHQ处理6 h后... 相似文献
13.
旨在探讨齐墩果酸（oleanolic acid,OLA）对于骨关节炎（osteoarthritis,OA）大鼠肌肉氧化损伤和软骨下骨异常骨重建的作用。选取18只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组：对照组（CON组）、模型组（OA组）和齐墩果酸给药组（OLA组）。OA组和OLA组利用前十字韧带切断联合半月板部分切除手术（ACLT+PMMx）建立大鼠膝OA模型,CON组进行假手术。OLA组大鼠每天灌胃50 mg·（kg·d）-1 OLA,CON组和OA组灌服等体积含20 mL·L-1 Tween 80的无菌生理盐水,连续给药4周后取膝关节、股四头肌和血清样本。利用伸膝发声试验和热敏感试验检测大鼠关节疼痛情况。酶联免疫吸附测定试验检测大鼠肌肉中柠檬酸合酶（citrate synthase,CS）、肌球蛋白重链（myosin heavy chain,MHC）、白细胞介素1（interleukin 1,IL-1）和IL-6的水平,以及大鼠血清中骨钙素（osteocalcin,OCN）和Ⅰ型胶原羧基末端肽（C-terminal typeⅠ collagen telopeptide,CTX-Ⅰ）的水平。免疫印迹法检测肌肉组织Nrf2/NQO1/HO-1通路蛋白表达情况。微型计算机断层扫描（Micro-CT）用于软骨下骨扫描和骨组织显微结构定量分析。结果显示,与OA组比较,OLA可以降低OA疼痛评分（P<0.05）,激活肌肉Nrf2/NQO1/HO-1通路,促进肌肉CS和MHC表达,并下调IL-1和IL-6水平（P<0.05）。此外,补充OLA后大鼠软骨下骨的骨体积分数（BV/TV）、骨矿物质密度（BMD）和骨小梁厚度（Tb.Th）显著升高（P<0.05）,骨代谢标志物OCN和CTX-Ⅰ表达显著降低（P<0.05）。结果提示,OLA能够抑制OA大鼠关节疼痛反应,通过调控Nrf2/NQO1/HO-1通路抑制OA大鼠肌肉功能障碍,改善OA早期软骨下骨生物力学性能和微结构改变,从而延缓OA大鼠软骨下骨异常骨重建的发生。 相似文献
14.
Feng Gao Huatao Li Yanni Feng Wenru Tian Rongfeng Cao Kaiqiang Fu 《Reproduction in domestic animals》2021,56(7):972-982
Cows are susceptible to pathogenic bacterial infection after pregnancy, leading to inflammation of the endometrium. Aucubin (AU) has been proven to exhibit highly effective anti-inflammatory activity, but its ability to protect against endometritis in dairy cows remains unclear. Therefore, the goal of the present study was to evaluate the protective effect of AU on the LPS-induced inflammatory response of bovine endometrial epithelial cells (BEECs). After pre-treating BEECs with AU (10, 20 and 50 μM) for 6 hr, the cells were stimulated with LPS for 3 hr. Subsequently, BEECs apoptosis was analysed by flow cytometry, the expression of pro-inflammatory cytokine mRNA was detected by qRT-PCR, and changes in NF-κB and Keap1/Nrf2 signalling were analysed by western blotting and immunofluorescence analyses. The results showed that AU can reduce TNF-α, IL-1β, IL-6, COX-2 and iNOS mRNA expression in BEECs and reduce cell apoptosis. Furthermore, AU significantly reduced the level of NF-κB p65 and IκB phosphorylation and inhibited the nuclear translocation of NF-κB p65. AU also activated the Keap1/Nrf2 pathway, promoting the nuclear transfer of Nrf2 and increasing Keap1, Nrf2, HO-1 and NQO1 mRNA and protein levels. Taken together, these results indicate that AU ameliorates the LPS-induced inflammatory response by inhibiting NF-κB and activating the Keap1/Nrf2 signalling pathway, which has a protective effect on BEECs. 相似文献
15.
Omar Khadrawy Samuel Gebremedhn Dessie Salilew-Wondim Franca Rings Christiane Neuhoff Michael Hoelker Karl Schellander Dawit Tesfaye 《Reproduction in domestic animals》2020,55(10):1275-1285
Nrf2 is a master regulator for antioxidant machinery against oxidative stress in bovine preimplantation embryos. The endogenous or exogenous modulation of Nrf2-KEAP1 system in bovine embryos may contribute to the understanding of the mechanisms behind the response of embryos to stress conditions. Therefore, here we aimed to investigate the protective effect of quercetin on bovine preimplantation embryos exposed to higher atmospheric oxygen concentration. For that, blastocysts, which were developed from zygotes cultured in media supplemented with or without quercetin under high oxygen level (20%), were subjected intracellular ROS level and mitochondrial analysis, and determining blastocyst formation rate and total cell number. Moreover, mRNA and protein expression level of Nrf2 and selected downstream antioxidant genes were investigated in the resulting blastocysts. Quercetin supplementation in vitro culture did not affect cleavage and blastocyst rate until day 7. However, quercetin supplementation resulted in higher blastocyst total cell number and reduction of intracellular ROS level accompanied by increasing mitochondrial activity compared with control group in both day 7 and day 8 blastocysts. Moreover, quercetin supplementation induced mRNA and protein of Nrf2 with subsequent increase in the expression of downstream antioxidants namely: NQO1, PRDX1, CAT and SOD1 antioxidants. In conclusion, quercetin protects preimplantation embryos against oxidative stress and improves embryo viability through modulation of the Nrf2 signalling pathway. 相似文献
16.
旨在提高衰老蛋鸡的产蛋量,蛋鸡腹腔注射10 mg·kg-1芦荟大黄素,每天1次,连续7 d,研究天然的芦荟大黄素对580日龄(D580)衰老蛋鸡卵巢重量、卵泡数量和体重变化的影响。本试验建立D-gal诱导的衰老卵泡模型,探究芦荟大黄素对卵泡衰老过程中抗氧化能力、细胞凋亡和增殖的影响,然后检测芦荟大黄素对体外衰老卵泡模型中Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白和基因表达水平的影响,以及Nrf2激活剂和阻断剂对芦荟大黄素引起的衰老卵泡氧化应激缓解作用的变化。结果表明,芦荟大黄素处理可提高各级卵泡的数量(P < 0.05),其中,大黄卵泡、小黄卵泡、大白卵泡和小白卵泡数量分别提高32.00%、34.62%、50.00%和54.21%。同时,芦荟大黄素处理使D580蛋鸡血清中雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平分别提高34.14%和680.00%。芦荟大黄素处理还可提高卵泡中雌激素受体(ERα和ERβ)和肝中甘油三酯(triglyceride, TG)的含量(P < 0.05)。D580蛋鸡肝组织中脂肪酸合成相关基因的转录水平显著下调,但芦荟大黄素处理可提升这些基因的转录水平。此外,芦荟大黄素通过提高卵泡抗氧化酶的活性、Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白和基因的表达,缓解自然衰老和D-gal诱导的衰老卵泡的氧化应激。芦荟大黄素处理可促进衰老卵泡细胞增殖,抑制其凋亡。综上表明,芦荟大黄素通过激活Nrf2/HO-1信号通路缓解蛋鸡卵泡的氧化应激,提升蛋鸡衰老过程中卵泡雌激素受体基因和肝卵黄生成相关基因的表达量、血清E2和P4水平、卵泡抗氧化能力以及肝TG合成能力,从而缓解卵泡衰老。 相似文献
17.
18.
本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对敌草快(diquat)诱导的氧化应激仔猪肝脏抗氧化、抗炎性能的影响。选用健康断奶仔猪30头,随机分为5组,对照组(CON组)和diquat组(DIQ组)饲喂基础饲粮,试验组(RES-10组、RES-30组、RES-90组)饲喂在基础饲粮中分别添加10、30、90 mg/kg RES的试验饲粮。于试验第15天清晨给DIQ组、RES-10组、RES-30组、RES-90组仔猪按照10 mg/kg BW剂量腹腔注射diquat建立氧化应激模型,CON组注射相同剂量灭菌生理盐水。试验期21 d。结果表明：与CON组相比,DIQ组肝脏超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶-1(GPX-1)的mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05);肝脏白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),而白细胞介素-10(IL-10)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);肝脏Kelch样ECH关联蛋白1(... 相似文献
19.
【目的】旨在揭示血红素加氧酶1(HO-1)在巨噬细胞中的抗炎和抗氧化作用。【方法】利用不同浓度脂多糖(LPS,0、3、5、10、15、20、25μg/mL)、HO-1(0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10μg/mL)及锌原卟啉(zinc protoporphyrin, ZPP;0、5、10、15、20、30 ng/mL)分别处理巨噬细胞(RAW264.7),12 h后通过CCK8法检测RAW264.7细胞活力,计算LPS、HO-1和ZPP处理RAW264.7细胞的最佳浓度。将RAW264.7细胞随机分为对照组(CT)、LPS组(LPS)、LPS+HO-1组(LH)、HO-1组(HO-1)、LPS+HO-1+ZPP组(LHZ),每组3个重复。CT组细胞用含10%胎中血清的DMEM培养基培养;LPS组细胞用LPS处理;LH组细胞用LPS和HO-1共处理;HO-1组细胞用HO-1处理;LHZ组细胞用LPS、HO-1和ZPP共处理,各组细胞的处理时间均为12 h,收集细胞和上清。采用ELISA法检测上清液中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、活性... 相似文献