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1.
猪肠道菌氨基糖苷类药物耐药基因分析 总被引：4，自引：0，他引：4
为调查和分析猪肠道菌的氨基糖苷类药物耐药机制,用PCR及序列分析方法检测鉴定2个猪肠道菌中4种16S rRNA甲基化酶耐药基因rmtA、rmtB、rmtC和armA和10种氨基糖苷钝化酶基因,用接合试验研究rmtB基因和10种氨基糖苷钝化酶基因的水平转移机制,用微量稀释法测定携带rmtB基因的分离菌及其接合子对20种抗菌药物的敏感性.结果,从分离的152株猪肠道菌中共检测到49株(32.3%)rmtB阳性菌,其中48株为大肠埃希氏菌,1株为阴沟肠杆菌,未检出其它16S rRNA甲基化酶编码基因.49株rmtB阳性菌中检测到7种氨基糖苷类钝化酶基因,检出率从高到低依次是aac(3)-Ⅱ(87.8%)、aph(3′)-Ⅶ(79.6%)、aph(3′)一Ⅱ(77.6%)、aadAJ(34.7%)、aacc(6′).-Ⅰb(14.3%)、aac(3)-Ⅳ(10.2%)和aph(4)-Ⅰ(8.2%).46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB、aac(3)-Ⅱ、aph(3′)-Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因传递给受体菌E.coli C600和E coli 488 Rifr,接合率从3.0×10-6～4.6×10-13不等.所有rmtB阳性菌株及其接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种氨基糖苷类抗生素均高度耐药(MIC≥512 Pg·mL-1).研究结果表明,rmtB基因和氨基糖苷钝化酶基因广泛存在于两猪场,它们共同介导猪源肠道菌对庆大霉素、阿米卡星等氨基糖苷类药物的高度耐药.rmtB基因与aac(3)-Ⅱ·aph(3′)一Ⅶ、aph(3′)-Ⅱ和aadA基因位于同一接合性质粒上,共同传播氨基糖苷类的耐药性. 相似文献
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鸡源致病性大肠埃希菌中氨基糖苷类抗生素耐药基因的检测 总被引：1，自引：0，他引：1
为了解鸡源致病性大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性变化和钝化酶耐药基因的携带情况及耐药基因与耐药性的相关性,从陕西、河南、河北、山西、宁夏和甘肃6省(区)的部分规模化养鸡场的病、死鸡中分离鉴定320株致病性大肠埃希菌。采用K-B药敏纸片法检测分离菌对6种氨基糖苷类药物的敏感性,PCR方法检测6种氨基糖苷类钝化酶耐药基因,用DNA Star软件对获得的耐药基因序列与GenBank中的相关序列进行比对。结果显示,鸡源致病性大肠埃希菌分离株对庆大霉素、链霉素、妥布霉素、卡那霉素、新霉素和阿米卡星的耐药率分别为53.4%、49.3%、37.5%、34.7%、22.8%和5.3%,对妥布霉素和卡那霉素耐药率呈上升趋势,而对庆大霉素的耐药率虽呈下降趋势,但仍维持在40%以上。3重以上耐药菌株占80%(256/320)。氨基糖苷类钝化酶基因aac(3)-Ⅱ、aph(3′)-Ⅰ和aac(6′)-Ⅰ的检出率分别为50.9%、25.9%和3.1%,未检测到aac(3)-Ⅳ、ant(3′′)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅱ基因。研究表明,分离的鸡源致病性大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性普遍存在,以多重耐药为主,且对妥布霉素和卡那霉素的耐药性不断上升。耐药基因aac(3)-Ⅱ和aph(3′)-Ⅰ的检出率与其耐药性呈正相关。 相似文献
3.
广东水禽源大肠埃希菌耐药性及氨基糖苷类耐药基因研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了调查广东地区水禽源大肠埃希菌对氨基糖苷类药物耐药现状和耐药基因的流行情况,探索大肠埃希菌的氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型之间的关系,本研究采用琼脂梯度稀释法测定251株广东地区水禽源大肠埃希菌对氨基糖苷类药物的耐药性和采用PCR方法检测耐药基因。药敏试验结果显示,大肠埃希菌对链霉素耐药较严重,鸭源和鹅源的耐药率分别为81.58%和75.43%,对庆大霉素和卡那霉素较敏感,耐药率分别为25%和54.86%,对阿米卡星最为敏感,其中鸭源的菌株耐药率仅为1.32%。PCR方法检测显示,aadA1和aph(3′)-1检出率较高,为84.6%和91.9%,表明携带aadA1和aph(3′)-1耐药基因的水禽源大肠埃希菌在广东地区呈流行趋势。耐药基因型与耐药表型相关性分析结果显示,耐药基因rmtB的携带与4种药物(庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素和壮观霉素)耐药株的产生具有显著相关性,表明耐药基因rmtB对大肠埃希菌耐药株的产生起重要的作用。本试验结果可为指导广东地区水禽大肠埃希菌病的临床用药提供理论基础和研究大肠埃希菌的耐药基因提供相关的数据。 相似文献
4.
《中国家禽》2019,(6)
为了解铜绿假单胞菌(PA)的氨基糖苷类耐药机制,用纸片扩散法检测分离自鸡场的50株PA对6种氨基糖苷类药物的敏感性,用PCR法检测7种氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因和5种16 S rRNA甲基化酶基因。结果显示:50株PA中45株对氨基糖苷类药物耐药,36株表现出多种氨基糖苷类药物耐药。50株菌中共有45株检测到耐氨基糖苷类药物基因,总检出率为90.0%。AMEs基因aac(3)-Ⅱ、ant(3′′)-Ⅰ、aph(3′′)-Ⅰb、aph(6′)-Ⅰd、aac(6′)-Ⅰb、ant(2′′)-Ⅰ的阳性率分别为88.0%、50.0%、44.0%、24.0%、20.0%、4.0%,16 S rRNA甲基化酶armA基因的阳性率为2.0%,其余5种基因均未检出。提示PA对氨基糖苷类耐药与产AMEs和16 S rRNA甲基化酶有关。 相似文献
5.
为调查不同动物源性大肠杆菌的耐药性,本试验对65株源于畜禽的大肠杆菌进行18种常见抗菌药的药敏试验,用PCR法检测3种氨基糖苷类耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib。结果显示：65株大肠杆菌中对氨基糖苷类药物链霉素耐药率最高(75.38%),其次为复方新诺明(69.23%),耐药率最低的是头孢哌酮舒巴坦(0%);耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib的检出率分别为29.23%、1.54%和9.23%;有51株分离菌株存在多重耐药,占总株数的78.46%。结果表明,动物源大肠杆菌对多种抗菌药具有耐药性,在氨基糖苷类耐药基因中以携带aac(3)-II为主。 相似文献
6.
猪源大肠埃希菌药敏试验及耐药基因检测 总被引：2，自引：0，他引：2
为调查云南省某规模化猪场大肠埃希菌(E.coli)对氨基糖苷类药物的耐药性及耐药基因aadA1和aph(3′)的携带情况,采用K-B(Kirby-Bauer)法检测51株E.coli对6种氨基糖苷类抗生素的耐药性,同时对2个目的基因片段aph(3′)和aadA1进行PCR扩增。结果显示,51株猪E.coli对链霉素、新霉素、妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素的耐药率分别为49.0%、35.3%、47.1%、43.1%、15.7%及70.6%;利用PCR技术检测氨基糖苷类药物的相关耐药基因,其阳性检出率依次为aph(3′)(86.27%)和aadA1(54.90%)。结果表明,云南楚雄某猪场撒坝猪E.coli耐药性普遍存在,对氨基糖苷类抗生素存在多重耐药,其中以二重耐药为主,2个耐药基因检出率偏高。因此,猪场应该针对性选择用药,规范使用抗生素,从而延缓和减少耐药性的产生,促进社会公共卫生的发展。 相似文献
7.
为探究温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素的耐药性,试验采用PCR法检测10株来源不同的鱼源温和气单胞菌对氨基糖苷类抗生素的4种耐药基因(aph(3′)-Ⅱa、ant(3″)-Ⅰa、aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱa)及四环素类抗生素的3种耐药基因(tetA、tetC、tetM)的表达情况,并利用K-B纸片扩散法对6种抗生素进行耐药表型分析。结果显示,10株温和气单胞菌对氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-Ⅱa、ant(3″)-Ⅰa、aac(6′)-Ⅰb的检出率分别为20%、30%、20%,未检测出aac(3)-Ⅱa基因;对四环素类的耐药基因tetA、tetC、tetM的检出率分别为70%、20%、60%。K-B纸片扩散法结果显示,10株菌对四环素耐药率最高,对链霉素敏感,对庆大霉素、卡那霉素、多西环素、米诺环素高度敏感。结果表明,本次分离的温和气单胞菌对氨基糖苷类和四环素类抗生素具有一定的耐药性,为深入了解温和气单胞菌的耐药机制提供参考。 相似文献
8.
旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3′)-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析。结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4%(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3″)-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱa为13.3%(13/98),aph(3′)-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3″)-Ⅰa+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98)、aac(3)-Ⅱa+aph(3′)-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6′)-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(99%);AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1%(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3)。另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因。鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3″)-Ⅰa和aac(3)-Ⅱa两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关。 相似文献
9.
《黑龙江畜牧兽医》2014,(17)
为了解鱼源致病性小肠结肠炎耶尔森菌对氨基糖苷类药物的耐药现状,试验采用KirbyBauer纸片法检测12株鱼源小肠结肠炎耶尔森菌对3种氨基糖苷类药物的耐药表型,PCR方法分析氨基糖苷类耐药基因aph(3)-Ⅲ、ant(3″)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰ和aac(3)-Ⅱ在致病菌中的分布情况。结果表明:12株菌株均对卡那霉素、庆大霉素高度敏感,其中1株菌株对链霉素中度敏感。4种耐药基因aph(3)-Ⅲ、ant(3″)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰ和aac(3)-Ⅱ的检出率分别为91.7%、83.3%、83.3%、0。鱼源小肠结肠炎耶尔森菌耐氨基糖苷类药物的耐药基因检出率显著高于耐药表型,因此检测耐药基因比耐药表型更能体现该类药物的耐药现状。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2020,(13)
为了调查鸭疫里默氏杆菌3种氨基糖苷类耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA、aac (6′)-Ⅱ的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类药物表型的相关性,试验选用常用氨基糖苷类抗生素对20株来自扬州、苏州、滁州、泰兴、淮安、南京地区的鸭疫里默氏杆菌进行药敏试验,用PCR法检测耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA、aac(6′)-Ⅱ,结晶紫染色法检测生物被膜形成能力。结果表明:20株鸭疫里默氏杆菌对氨基糖苷类药物中的妥布霉素耐药率最高,其次是多黏菌素B、庆大霉素和诺氟沙星,最后是丁胺卡那和链霉素;耐药基因aac (3)-Ⅱ、aadA与aac(6′)-Ⅱ的检出率均为0;20株鸭疫里默氏杆菌均能形成生物被膜,但OD_(595)值均在0.31～1.00之间,为弱生物被膜。说明鸭疫里默氏杆菌对氨基糖苷类药物具有强耐药性,且应少用妥布霉素等氨基糖苷类药物。 相似文献
11.
为研究16S rRNA甲基化酶rmtB在猪肠道菌中的传播方式,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分别对来源于A、B猪场的48株rmtB阳性大肠埃希氏菌进行基因分型;用膜接合试验研究rmtB基因的水平传播方式;用微量稀释法对rmtB阳性菌及其接合子进行药敏试验。有45株rmtB阳性大肠埃希氏菌(45/48)能进行PFGE分型,可分为28种不同的PFGE基因型。其中来源于A猪场的20株菌可分为12种基因型,来源于B猪场的25株菌可分为16种基因型;46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB基因及其介导的耐药性传递给受体菌E.coliC600和E.coli488 Rifr,接合频率从4.6×10-13~3.0×10-6不等,接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种二脱氧链霉胺类抗生素均高度耐药(MIC≥512μg/mL)。结果表明,rmtB基因位于接合性质粒上,该基因在两猪场的大肠埃希氏菌中既存在克隆传播,又存在水平传播,以水平传播为主。 相似文献
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山东地区禽源致病性大肠杆菌氨基糖苷类药物耐药性及耐药基因的检测 总被引：3，自引：0，他引：3
采用K-B纸片法对224株大肠杆菌进行5种氨基糖苷类药物的药敏试验,采用微量肉汤稀释法进行庆大霉素和阿米卡星最低抑菌浓度（MIC）的测定,三重PCR法检测全部菌株氨基糖苷类钝化酶基因ant（3’’）-Ia、aac（6’）-Ib和aph（3’）-Ⅱa,普通PCR法检测16S甲基化酶基因。结果显示：山东省禽源大肠杆菌对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素和阿米卡星的耐药率分别为84.4%、57.1%、55.8%、46.9%和40.2%;3种钝化酶基因ant（3’’）-Ia、aac（6’）和Ib、aph（3’）-Ⅱa的检出率依次为49.6%、25.0%和22.8%,介导高水平耐药的16S甲基化酶基因RmtB的检出率为11.6%（26/224）,只有1株大肠杆菌检测到armA基因,没有检测到rmtA,且3种甲基化酶基因在低度耐药菌中检出率均为0;所检大肠杆菌中携带2种及2种以上耐药基因的菌株占33.5%（75/224）,有1株大肠杆菌同时携带4种耐药基因。结果表明,氨基糖苷类钝化酶及16S甲基化酶广泛存在于禽源大肠杆菌菌中,其耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关,部分菌株的耐药性与耐药基因的检出率不一致,表明还存在其他耐药机制。 相似文献
13.
AIM: To determine the resistance to antibiotics among the indictor bacteria, Escherichia coli and Enterococcus spp, isolated from the faeces of healthy pigs on three conventional pig farms and one organic farm in the North Island of New Zealand. METHODS: Faecal samples, collected at intervals between March and October 2001, were plated onto MacConkey agar and Slanetz-Bartley agar and examined after 1-3 days incubation for colonies resembling E. coli and Enterococcus spp, respectively. Typical colonies were subcultured for further identification and storage. The isolates were tested for antibiotic resistance, using disc diffusion, to ampicillin, gentamicin, streptomycin, and tetracycline. Escherichia coli isolates were also tested for resistance to ciprofloxacin, cotrimoxazole and neomycin. Enterococcus spp isolates were also tested for resistance to vancomycin, erythromycin and virginiamycin. RESULTS: A total of 296 E. coli and 273 Enterococcus spp isolates were obtained from the three conventional farms, and 79 E. coli and 80 Enterococcus spp isolates were obtained from the organic farm. All the E. coli isolates from both the conventional and organic pig farms were susceptible to ciprofloxacin, and all the Enterococcus spp isolates were susceptible to ampicillin, gentamicin and vancomycin. Isolates of E. coli from conventional pig farms were resistant to gentamicin (0.7%), neomycin (0.7%), ampicillin (2.7%), cotrimoxazole (11%), streptomycin (25%) and tetracycline (60%). Enterococcus spp isolates from the same farms were resistant to erythromycin (68%), tetracycline (66%), streptomycin (54%) and virginiamycin (49%). By contrast, for the organic pig farm 相似文献
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Blanc V Mesa R Saco M Lavilla S Prats G Miró E Navarro F Cortés P Llagostera M 《Veterinary microbiology》2006,118(3-4):299-304
This study aims to determine the presence of extended-spectrum (ESBL) and plasmidic class C beta-lactamase-producing Enterobacteriaceae in poultry, pig and rabbit farms of Catalonia (Spain). PFGE typing showed a low clonal relationship among strains carrying these mechanisms of resistance. Ninety-three percent of them were resistant to two or more of the non-beta-lactam antimicrobials tested and harboured ESBL and plasmidic class C beta-lactamases. Greater diversity of these enzymes was found in strains from poultry farms, the CTX-M-9 family, especially CTX-M-14, with CMY-2 being the most frequent. The isolation of TEM-52 and SHV-2-producing Escherichia coli strains from these animal farms is noteworthy. In contrast, 73% of the strains from pig farms had CTX-M-1, and neither the CMY-type nor CTX-M-9 family enzyme was found. Likewise, it is the first time that CTX-M-1 and SHV-5 encoding strains have been isolated in pigs. On the other hand, in rabbit farms CTX-M-9 family was also the most frequent, being detected in three of a total of four strains. The last one showed a CMY-2, for the first time detected in these animals, too. In conclusion, commensal E. coli strains of food-producing animal farms are a reservoir of ESBL and plasmidic class C beta-lactamases. 相似文献
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仔猪黄痢病原分离株药敏试验和不同给药方法疗效比较研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为科学评价河南省仔猪黄痢大肠杆菌地方分离株的耐药性和不同给药方法对仔猪黄痢疗效的影响,本研究首先自河南省25个临床发病猪场病猪体内分离鉴定仔猪黄痢大肠杆菌;通过小白鼠致病力试验以检测大肠杆菌分离株的毒力;采用20种抗菌药物对分离株进行药敏试验以筛选对仔猪黄痢大肠杆菌最敏感的药物;选取敏感药物分别采用口腔灌服、肌肉注射和腹腔注射3种给药方法对临床上仔猪黄痢发病猪进行治疗效果比较试验以确定最佳给药方法。结果自河南省25个发生仔猪黄痢的猪场的病猪体内共分离鉴定出25株大肠杆菌。25株大肠杆菌分离株对小白鼠的致病率为100%;对临床上常用的20种抗菌药物都有耐药现象,但耐药率高低不同(4%～100%);20种抗菌药物中诺氟沙星、氧氟沙星、新霉素和利福平等4种药物的敏感率较高,高敏率分别为92%、88%、88%和80%。3种不同的给药方法对仔猪黄痢病例的治疗效果不同,其中通过口腔灌服和腹腔注射的给药方法对仔猪黄痢的治愈率(分别为92.3%、95.0%)显著高于肌肉注射给药方法(58.8%);腹腔注射组治愈率稍高于口腔灌服组,但二者差异不显著。本研究为临床上仔猪黄痢的防制提供了科学依据。 相似文献
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为了解重庆市北碚区龙凤桥镇养殖场中大肠杆菌对抗菌药物的敏感性,笔者在该镇某猪场及某鸡场采集了5份猪粪及10份鸡粪,从中分离出大肠杆菌,随后进行药物敏感性检测。结果显示:在15份粪便中分离到了15株大肠杆菌,包括5株猪源性大肠杆菌和10株鸡源性大肠杆菌;药物敏感性试验表明,这15株大肠杆菌的耐药率很高,2/3的菌株对超过23种抗菌药物有耐药性。 相似文献
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仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
由湛江市3个养猪场采集到40份仔猪黄痢、白痢腹泻粪便样品,共分离到40株大肠杆菌,其中7株是致病性大肠杆菌,三个猪场致病性大肠杆菌的分离率分别为15.4%、10%和43%。对7株致病性大肠杆菌进行药物敏感性试验,结果表明:它们均对恩诺沙星、菌必治和丁胺卡那霉素敏感,而对复方新诺明、阿莫西林、氨苄青霉素、四环素和庆大霉素的耐药率为100%,对氯霉素、头孢氨苄和痢特灵的耐药率为85.7%,对卡那霉素和链霉素的耐药率为57.1,%对氟哌酸和环丙沙星的耐药率为14.3%。猪场选用较敏感药物来防治仔猪大肠杆菌病,使疫病得到了有效控制。 相似文献