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1.
将一段DNA片段导入哺乳动物细胞中后，能够定位并且与内源的同源序列重组，这种类型的同源重组叫做基因打靶(gene targting)。基因打靶技术可以用来生产转基因动物。在小鼠胚胎干细胞中应用这一技术已生产出各种不同基因位点的突变体，可对小鼠中特异性基因的表型进行评价。基因打靶技术不只是一种使基因失活的手段，而且可作为一种用来改变基因活性的方法。 相似文献
2.
为建立一种一次性检测多个磺胺类抗生素耐药基因的检测方法,用磺胺类抗生素耐药大肠杆菌作为受试生物,根据磺胺类抗生素耐药基因Sul1和dfrA1设计一对引物进行二重PCR检测。结果发现:本方法能有效检测出大肠杆菌Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因,检出限为4.5 cfu/μL,对于Sul1和dfrA1两种磺胺类抗生素耐药基因具有较强的检出特异性。此方法对检测大肠杆菌磺胺类抗生素耐药基因提供了有力的技术支撑。 相似文献
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据英国奶牛业协会生物工程部称:预计在2005年,将有一种能激活人体免疫系统来抵抗传染病和肿瘤的新型牛奶面市,这种牛奶就是共轭叶酸牛奶,又称免疫牛奶。 很早以前的研究已表明:牛奶中的共轭叶酸能激活人体的免疫系统功能,但它在目前普通牛奶中的含量甚微或根本检测不出含量:该研究项目是通过改造奶牛基因,使其所产的牛奶中含有 相似文献
4.
曾经参与克隆出小羊多利的英国PPL医疗公司日前宣布，该公司研究人员培育出了５只新型转基因克隆猪，它们体内有一个基因被“关闭”了。这是异种器官移植研究领域的又一重要进展。PPL公司发布的新闻公报说，这５只小猪是该公司设于美国弗吉尼亚州的子公司的研究人员培育出的，它们都是雌性，出生于２００１年１２月２５日。DNA试验表明，它们体内的两个“阿尔法１（３半乳糖转移酶”（GT）基因），有一个处于被“关闭”状态。研究人员说，GT基因控制产生一种酶，这种酶使猪细胞表面产生一种糖类物质。当猪器官或细胞被移植给人体时，… 相似文献
5.
研究利用PCR和PCR-RFLPs等技术检测了特种野猪72个样品的繁殖(ESR和FSHβ)性状的主要功能基因的多态性分布,ESR基因运用PCR-RFLPs法研究它们的遗传变异,FSHβ基因直接采用PCR进行检测,检测这两种基因不同基因型在特种野猪群体中的分布频率。并对其进行群体遗传学分析,结合特种野猪的繁殖性能记录,建立合理统计分析模型,旨在研究ESR和FSHβ这两种基因对特种野猪产仔数性状的影响,从基因角度寻找特种野母猪繁殖力低的原因,寻找其解决办法,利用分子遗传标记手段提高特种野母猪的繁殖性能。结果表明:FSHβ基因和ESR基因可以作为控制猪高繁殖率的候选基因。注意提高ESR基因中等位基因B的频率,将能显著提高猪群的繁殖性能。 相似文献
6.
基因表达系列分析(serial analysis gene express，SAGE)是近几年发展起来的一种快速分析基因表达信息的技术。它通过快速而详细地分析成千上万个EST(expressed sequencedtags)来寻找出表达丰度不同的SAGE标签序列，从而接近完整地获得基因组表达信息。它不但能快速、详细地同时分析成千上万个基因转录子的丰富信息，还能发现新基因，因此是基因表达定性和定量研究的一种有效工具， 相似文献
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AMV和WCMV在转基因红三叶中的基因累集 总被引：8，自引：4，他引：4
随着转基因技术的发展及其在植物育种中的应用，出现了一大批表现优良、经济效益高的转基因植物，但生产实践要求一种植物同时具有多个优良的转基因性状。目前解决这一问题的方法主要是基因累集(Gene pyramiding)，就是将多个基因集中到同一植株，可以将已经转入1个基因的植株做原材料，用农杆菌介导或基因枪等方法将另一基因转进去。也可以采用人工杂交，在不同转基因植株之间进行人工授粉，从后代中筛选出所需要的基因型。本研究对抗苜蓿花叶病毒(AMV)的转基因红三叶和抗白三叶花叶病毒(WCMV)的转基因红三叶进行了人工杂交，以期获得兼有2个基因、同时抵抗2种病毒的新植株，为下一步的育种打好基础。几乎所有的杂交组合都结了种子，杂交一代的发芽率随杂交亲本转基因拷贝数的不同而有所变化，只有1个转基因拷贝的亲本其杂种发芽率最高。对所有幼苗先用PCR进行检测，从中挑出较理想的基因型作进一步的分子生物学分析。Southern和Northern印迹分析结果表明，有些杂交一代的转入基因多于1个拷贝，有一部分同时兼有2种抗病基因，并且得到了表达。为进一步检测其抗病性，对它们进行了温室接种和田间评估，结果显示，尽管有的个体Northern分析呈阳性，但在田间仍然对病毒敏感，不过其感病程度都比对照有显著降低。大多数兼有2种转入基因的植株都能同时抵抗2种病毒，可以作为免疫个体供下一步育种之用。与遗传转化相比，人工杂交以其操作简单、省时省力、预见性强和准确率高而具有明显优势，是常规育种方法在分子育种中的具体体现。 相似文献
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据英国《每日电讯报》报道。“生物技术革命”的说法已被爆炒多年。按照科学家的预言，利用基因疗法将会为人类开发出奇迹般的治疗手段。然而。英国政府经济与社会研究理事会最近公布的一份官方报告却指出，基因疗法并没有产生实质性的突破进展，人们已对基因疗法的神奇性产生置疑。在以基因分析和细胞分析为基础的生物技术所产生的重大科学突破中， 相似文献
9.
根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480 bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带.由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从而使检测结果往往出现很高的假阳性.本试验利用EMA能穿过死细菌的细胞膜并在光激活的作用下能与基因组DNA共价结合,从而能抑制死菌DNA进行PCR扩增的特性,建立了一种快速、有效的检测金黄色葡萄球菌活菌的EMA-PCR方法,较传统PCR大大提高了检测的准确性和可靠性,该方法检测灵敏度可达15 CFU/mL. 相似文献
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ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术用于寻找小鼠印迹基因的原理,主要通过观察小鼠亲本及它们杂交后代等位基因的多态表达,就能清楚区分基因的母源表达与父源表达,从而筛选出印迹基因。本研究通过ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术克隆到了一个新的印迹基因,并对其染色体定位,基因结构和表达等特性进行了初步研究。 相似文献
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为了解禽源产色葡萄球菌的耐药性，本研究从发病金陵花鸡中分离到1株产色葡萄球菌GZQX2019，并进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验、16S rDNA序列分析、药敏试验、部分耐药与肠毒素基因检测和动物回归试验。结果显示，分离菌在鲜血琼脂培养基上长出表面凸起、边缘整齐的溶血现象白色菌落；革兰氏染色镜检呈葡萄串状球菌。生化试验结果显示，分离菌蔗糖、精氨酸水解酶、木糖等反应阳性，尿素、木糖醇、麦芽糖等反应阴性。系统进化树显示，分离菌与产色葡萄球菌处于同一分支；药敏试验结果显示，分离菌对红霉素、头孢他啶、多西环素等6种抗菌药耐药，对头孢呋辛、头孢哌酮、新霉素等11种抗菌药敏感。耐药与肠毒素基因检测结果显示，分离菌能检测出热敏感细胞肠毒素基因Alt，耐大环内酯类基因ermB，β-内酰胺类基因VIM、TEM，四环素类基因tetB。动物回归试验结果显示，分离菌对小鼠和雏鸡致病能力不强或者没有致病力。试验成功分离到1株禽源产色葡萄球菌，丰富了禽源产色葡萄球菌的认知。 相似文献
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本研究采用PCR-SSCP方法对13个鸡品种的NLRC5基因外显子8的多态性进行了SNP检测,共检测到2个等位基因,2种基因型,其中北京油鸡、固始鸡、皖南三黄鸡、大骨鸡群体中检测到AA和AB两种基因型,其余群体中只检测出AA基因型。序列分析结果显示,在NLRC5基因外显子8的43bp处存在G/A突变,将该突变翻译为氨基酸仍然为缬氨酸,因此该突变是一个同义突变;卡方适合性检验结果显示:13个鸡品种均处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);根据群体遗传变异分析,13个鸡品种均处于低度多态或无多态(PIC<0.25)。本研究为NLRC5基因作为一种新兴研究的抗性基因是否能为鸡抗病性状选育工作的分子标记提供了初步的参考。 相似文献
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猪氟烷基因PCR-RFLP检测新引物设计与条件优化 总被引：1，自引：0，他引：1
本文在测定4个不同品种猪包含突变位点的氟烷基因序列的基础上,重新设计了PCR引物,并对反应体系和反应条件进行了优化。实验结果表明:新设计的引物在PCR扩增中对DNA模板量要求不高,PCR反应对温度变化不敏感,具有较高的稳定性,结合限制性酶切技术,能快速准确地鉴别猪氟烷基因的三种基因型,可应用于猪氟烷基因的分子检测。 相似文献
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侯梅利 《国外畜牧学(猪与禽)》2013,(11):52-53
研究人员对两个鸡种的NK-lysin基因多样性进行了检测,获得了两种NK-lysin的基因变体,结果它们都能抵抗细菌感染和其他疾病,为该项研究迈出了可喜的一步. 相似文献
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为检测松辽黑猪H-FABP基因位点多态性，应用PCR-RFLP技术(HinfI、HaeIII和MspI 3种限制性内切酶)检测了62头松辽黑猪5’-上游区和第二内含子的遗传变异情况。结果发现松辽黑猪在MspI多态位点上表现为单一的AA型；而在HinfI多态位点上表现为多态性，等位基因H的基因频率为0.7177，在HaeIII位点上也表现出多态性，等位基因d的基因频率为0.6210。研究结果表明松辽黑猪H-FABP基因5’-上游区和第二内含子存在多态性。 相似文献
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4猪种Nramp1基因第6内含子多态性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
天然抗性巨噬蛋白(Nramp)基因是与人、鼠的一些病原微生物的易感性和抗性有关的重要候选基因。为了研究猪Nramp1基因的多态性,利用PCR-RFLP技术检测了杜洛克、大白猪、长白猪和合作猪共270头个体Nramp1基因第6内含子NdeⅠ酶切位点多态性。结果表明,4个猪种群共检测到3种基因型(AA、AB和BB),其中AB基因型为杜洛克、大白猪和长白猪的优势基因型;AA基因型为合作猪的优势基因型。经卡方适合性检测,杜洛克、合作猪和长白猪处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),大白猪处于Hardy-Weinberg不平衡状态。多态信息含量分析显示,Nramp1基因的第6内含子NdeⅠ酶切位点在各猪种表现出中度多态性。 相似文献
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绵羊高繁殖力候选基因BMPR-IA的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
以骨形态发生蛋白受体IA（bone morphogenetic protein receptor IA，BMPR-IA）基因为候选基因，采用PCR—SSCP技术检测该基因在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊、湖羊）以及低繁殖力绵羊品种（多赛特羊、特克塞尔羊、德国肉用美利奴羊）中的单核苷酸多态性，同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。结果表明：在小尾寒羊中检测到AA、AB两种基因型，在湖羊中只检测到一种基因型BB，而在低繁殖力的3个绵羊品种中只检测到一种基因型AA。统计结果表明：小尾寒羊A等位基因频率为0．964，B等位基因频率为0．036。测序结果表明：BB型与AA型相比有6处核苷酸发生了突变。独立性检验表明：外尾寒羊与低繁殖力绵羊品种间基因型分布差异不显著（P〉0．05），而湖羊与小尾寒羊、低繁殖力绵羊品种间基因型分布差异极显著（P〈0．001）。AB基因型小尾寒羊平均产羔数比AA基因型多0．15只，但差异不显著（P〉0．05）。研究表明：BMPR-IA基因不是小尾寒羊和湖羊高繁殖力的主效基因。 相似文献
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GNRHR、IGF-1基因对文昌鸡繁殖性状的遗传效应分析 总被引：13，自引：1，他引：13
以控制文昌鸡繁殖性状的促性腺激素释放激素受体基因（GNRHR）和胰岛素样生长因子-1基因（IGF-1）为候选基因，采用PCR—RFLP技术检测GNRHR基因和IGF-1基因在文昌鸡中的单核苷酸多态性（SNP），同时对这2个基因与文昌鸡繁殖性状的相关性进行了研究。结果表明，GNRHR基因内含子1的537bp位置有C→T碱基的变异，在文昌鸡中检测到AA、Aa、aa3种基因型，A等位基因的频率为0．69，a等位基因的频率为0．31；在IGF-1基因5′非翻译区（5′UTR）发现C→T碱基的变异，改变了限制性内切酶PstⅠ识别位点，经PCR-RFLP分析，在文昌鸡中检测到BB、Bb、bb3种基因型，B等位基因的频率为0．53，b等位基因的频率为0．47。对其基因型与所检测个体相应的繁殖性状采用GLM分析进行遗传效应研究，结果表明，GNRHR基因对300日龄产蛋数、400日龄产蛋数有显著影响（显性作用），IGF-1基因对300日龄产蛋数有显著影响（加性作用）。因此，推测GNRHR基因和IGF-1基因可能是影响鸡繁殖性状的主效基因或与主效基因紧密连锁的标记基因，并且能够在分子标记辅助选择中用于对鸡繁殖性状的遗传改良和固定。 相似文献