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从新疆分离的奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌,经TH-16S系统鉴定,选取鉴定结果为733330的优势生化株。毒力测定试验表明,1×108CFU/只的接种量会使小白鼠在24 h内死亡。菌株接种Columbia Broth Modified 37℃摇床100 r/m in培养24 h后,用0.05%戊二醛灭活。灭活培养物经4℃30 m in 17 000 g离心去除细胞碎片,上清用PBS(pH 7.2)4℃透析48 h,PEG20000浓缩10倍,透析,加入终浓度为10 mg/mL的蜂胶-乙醇浸液,作为荚膜多糖免疫原。先分别用荚膜多糖免疫原0.1、0.2、0.4 mL免疫小白鼠,再用组合免疫原(荚膜多糖+109CFU/mL菌体)0.1、0.2、0.4 mL免疫小白鼠。6组小鼠于免疫后14 d连同对照小鼠2组攻击金黄色葡萄球菌2×108CFU/(0.2 mL.只)。结果表明,荚膜多糖免疫原组保护率分别为0、25%和50%,(荚膜多糖+菌体)组保护率分别为25%、75%和100%。 相似文献
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贵州猪大肠杆菌本地株多价灭活疫苗的研制 总被引:1,自引:1,他引:0
选择本地分离的3株致病性大肠杆菌O139、O138、O101,分别接种于LB固体培养基于37℃恒温培养箱培养20 h,用0.85%生理盐水洗下菌落,进行活菌计数,3株菌按等量混合,加入0.4%甲醛灭活48 h,再加入20%氢氧化铝胶混匀,制成灭活疫苗置2~4℃冰箱保存。将该疫苗接种无菌的LB固体和麦康凯培养基上37℃培养48 h进行无菌检验,并接种小白鼠进行安全性检验,结果均合格;接种该疫苗14 d后,对小白鼠进行攻毒试验,试验组小白鼠健康无任何异常反应,对照组全部死亡,疫苗的免疫保护率达100%,说明疫苗安全。 相似文献
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【目的】制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗。【方法】选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验。【结果】分光光度法测定RA-SS-8株菌液D600 nm值随培养时间变化显示,细菌在0~3 h时增殖缓慢,在3~10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株D600 nm值为0.1~0.8时,该菌处于对数生长期,且D600 nm值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2%甲醛溶液、37 ℃灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.8×109 CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70%,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果。【结论】本研究成功制备了RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础。 相似文献
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本试验制备了3种兔出血症灭活苗,经对试验兔进行免疫对比试验,以1mL为免疫剂量,7d后检测,发现3种疫苗均可产生抗体。组织灭活苗、蜂胶佐剂苗、铝胶佐剂苗7d的抗体滴度分别为27.1、27.2、26.5;14d的抗体滴度分别为27.9、29.0、28.0;45d的抗体滴度分别为26.8、28.5、27.5;85d的抗体滴度分别为25.5、27.2、26.2;145d的抗体滴度普遍下降。在免疫攻毒试验中,第7、15、50、90d攻毒时,3种疫苗的保护率均为100%,对照组全部死亡;150d攻毒时,组织灭活苗、蜂胶佐剂苗、铝胶佐剂苗的保护率分别为25%、75%、50%。以上结果表明,3种疫苗都有很好的免疫效果,其中以蜂胶佐剂苗的抗体滴度更高,免疫保护期更长。 相似文献
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牛源A型多杀性巴氏杆菌培养特性和免疫原性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了确定牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的培养特性,本研究采用脑心浸液(BHI)培养基分别于静止、75r/min、250r/min3种培养转速对Pm进行培养,并与加血BHI进行比较,通过绘制生长曲线和小鼠毒力试验对Pm的培养基和培养转速条件进行优化,确定最佳培养条件为,以37℃,0.1%全血脑心浸汤(MB-HI)培养基,75r/min培养16h。将培养的A型Pm灭活后,免疫SPF小鼠,同时设立B型Pm灭活苗免疫组,攻A型Pm后的结果显示,A型灭活菌的保护率为100%,而B型灭活苗免疫组全部死亡。本研究通过对牛源A型Pm培养特性和免疫原性的研究,为新型牛出血性败血症灭活疫苗的研制提供了实验依据。 相似文献
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副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
为了评价铝胶、蜂胶及白油佐剂对副猪嗜血杆菌的免疫增强效果,我们将铝胶、蜂胶和白油3种佐剂分别与副猪嗜血杆菌血清5型菌株联合制备灭活疫苗,然后接种雄性成年家兔,采用ELSIA方法分别检测3种灭活苗在免疫期间副猪嗜血杆菌P5蛋白的抗体效价。结果显示:3次免疫后,白油佐剂免疫组的平均效价为1∶4000,铝胶佐剂免疫组的平均效价为1∶700,蜂胶佐剂免疫组的平均效价为1∶100,无佐剂对照组的平均效价为1∶100。说明这3种佐剂中免疫增强效果最好的为白油,铝胶次之。 相似文献
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用本地分离的5个代表菌株和引进的3个标准菌株混合,以蜂胶为佐剂,经甲醛灭活,蜂胶用酒精纯化,按一定比例配制成含100亿个/ml的大肠杆菌多价蜂胶佐剂灭活苗。经现地28万只鸡试验证明,本疫苗安全、有效。免疫接种0.5ml/只,临床无不良反应。7天60%出现免疫抗体,14天全部产生免疫抗体,3个月攻毒保护率100%,6个月70%;疫苗于4~8℃保存1年,20~25℃保存半年有效。 相似文献
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牦牛ETEC灭活疫苗的研制及免疫效力试验 总被引:4,自引:0,他引:4
制备了耗牛ETEC铝胶灭活苗、油佐剂苗和蜂胶灭活苗。分别使用3种佐剂灭活苗进行对比试验。经抗体监测表明在免疫后7天,蜂胶苗产生的抗体效价最高(2^7),随着时间的推移,油苗抗体儿价最高(2^9-10),于免疫后29日,使用ETEC进行攻毒,免疫兔全部保护,对照兔全部死亡。证明牦牛ETEC3种佐剂灭活疫苗均能有效保护家兔免受ETEC攻击。 相似文献
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鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活苗的研制 总被引:9,自引:0,他引:9
用本地分离的5个代表菌株和引进的3个标准菌株混合,以蜂胶为佐剂,经甲醛灭活,蜂胶用酒精纯化,按一定比例配制成含100亿个/ml的大肠杆菌多价蜂胶佐剂灭活苗。经现地28万只鸡试验证明,本疫苗安全、有效。免疫接种0.5ml/只,临床无不良反应。7天60%出现免疫抗体,14天全部产生免疫抗体,3个月攻毒保护率100%,6个月70%;疫苗于4 ̄8℃保存1年,20 ̄25℃保存半年有效。 相似文献
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将牛源魏氏梭菌磐石、双阳、德惠菌株作为生产菌苗株,制备浓缩甲醛氢氧化铝灭活苗,该苗安全性好,免疫后30天以2个致死量强毒攻击,可获100%保护,免疫后200天以同样剂量攻击仍可获90%保护。经氢氧化铝与蜂胶佐剂对比试验,氢氧化铝佐剂比蜂胶佐剂免疫效果好。抗体动态试验表明,免疫后30~50天,菌体抗体和毒素抗体均达最高峰。用兔血清进行中和试验表明,免疫后30天兔血清能中和8(MLD)毒素,小鼠全部存活。 相似文献
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我们采用我省猪群中分离获得的O8、O9、O149、O157血清型菌株混合,经甲醛灭活,以氢氧化铝为佐剂,按一定比例配制成含10亿个/mL的大肠杆菌病(本地株)多价灭活苗。应用试验研究表明,该大肠杆菌病(本地株)多价灭活苗对仔猪的保护率达96.13%,可以显著减少仔猪的发病和死亡。 相似文献