己烯雌酚免疫分析技术研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

邴爱英  李坤林  牛钟相 《动物医学进展》2006,27(4):51-54

己烯雌酚为人工合成的二苯乙烯类雌激素药物,曾经作为促生长剂广泛应用于畜牧业。但国内研究表明,己烯雌酚存在着潜在的致癌性。因此,近年来,其在饲料及动物性食品中的残留检测倍受关注,但己烯雌酚属于小分子化合物,不具备免疫原性。己烯雌激酚人工抗原主要采用混合酸酐反应(氯甲酸异丁酯法)将半抗原己烯雌酚与载体蛋白牛血清蛋白连接制备人工免疫原,并采用碳二亚胺法将半抗原己烯雌酚与载体蛋白卵清蛋白连接制备人工包被原。文章对己烯雌酚的免疫分析技术进行了综述。  相似文献   

甲硝唑人工抗原的制备及其ELISA检测     

俎晶晶  屈凌波  孙武勇 《动物医学进展》2007,28(1):11-13

采用碳二亚胺法将甲硝唑半抗原与牛血清白蛋白(BSA)连接制备人工免疫原,同样方法将其与卵清蛋白(OVA)连接制备人工包被原.经紫外扫描分析,两种方法合成的免疫原和包被原的结合比分别为8∶1、2∶1和6∶1、2∶1;动物免疫试验分析偶联物,小鼠抗体效价达1∶5 000,与3种硝基咪唑类药物的交叉反应率均小于10%.表明制备的抗体可以用于甲硝唑残留的检测,同时为检测试剂盒的研制奠定了基础.  相似文献   

用多聚赖氨酸作载体制备IVM人工抗原的研究     

魏小娟  张继瑜  张梅  李剑勇  周绪正  李金善  牛建荣 《黑龙江畜牧兽医》2009,(1)

采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法和混合酸酐法,将伊维菌素(IVM)分别与多聚-L-赖氨酸(PLL)和卵清蛋白(OVA)连接制备人工免疫原5-O-(单)琥珀酰IVM-PLL和包被原5-O-(单)琥珀酰IVM-OVA,经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实人工抗原合成成功.  相似文献   

达氟沙星人工抗原的合成与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

龙淼  杨正涛  张乃生  朱连勤 《黑龙江畜牧兽医》2009,(1)

采用碳二亚胺偶联法将达氟沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)载体蛋白偶联,制备达氟沙星人工抗原DFLX-BSA和DFLX-OVA,并用FeCl3显色反应、紫外扫描和酶联免疫吸附试验对制备的人工抗原进行鉴定.结果表明:DFLX与BSA和OVA的偶联比为14: 1和16: 1时可成功地制备达氟沙星人工抗原.  相似文献   

己烯雌酚人工抗原的合成研究   总被引：5，自引：1，他引：4  

康彦龙刘雅红  单国强 《中国兽医科技》2003,33(10):43-46

采用三步反应合成了己烯雌酚人工抗原，为己烯雌酚酶免疫检测技术的进一步研究奠定基础。试验结果证实，己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象，酸碱处理是降低交联前衍生物中顺式体比例的有效方法；经三步合成，成功地制备出了人工抗原；人工免疫原及包被原的最适结合比例分别为1：28和1：7。  相似文献   

酸性红73人工抗原的合成与鉴定     

常向彩  马明  冉丹丹 《贵州畜牧兽医》2019,43(4):1-4

为进一步制备酸性红73新型人工抗原,试验采用N,N-羰基二咪唑(CDI)法合成酸性红73的免疫原和包被原,经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联成功,酸性红73与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OA)的偶联比分别为9∶1和5∶1。免疫后所得兔源多克隆抗体,采取双向琼脂扩散实验和方阵滴定法确定包被抗原和抗体的最适工作浓度分别为1∶4000、1∶8000。  相似文献   

雌二醇多克隆抗体的制备与鉴定   总被引：4，自引：0，他引：4  

高富红  戴小华  吴国娟 《畜牧与兽医》2007,39(10):19-22

制备雌二醇完全抗原,并通过免疫家兔得到多克隆抗体,为下一步制备雌二醇单克隆抗体和雌二醇检测ELISA试剂盒奠定基础。试验以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用碳化二亚胺法,合成了雌二醇(E2)的2种免疫偶合物:免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA;通过紫外光谱定性证明偶合物偶联成功与否,并对偶合物的蛋白含量、结合比进行测定并以免疫原E2-BSA免疫家兔,制备多克隆抗体,用包被原E2-OVA进行ELISA,对多克隆抗体特异性及效价进行检测。结果表明成功合成了雌二醇人工抗原即免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA,二者的蛋白浓度分别为5.455和7.533mg/mL,结合比分别为7:1和8:1;制备的多克隆抗体特异性好,血清效价为1:106。  相似文献   

盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定   总被引：2，自引：1，他引：1  

张桂贤 《中国畜牧兽医》2010,37(3):171-174

本试验旨在合成盐酸四环素人工抗原,为其单克隆抗体的制备奠定试验基础。将盐酸四环素(TCH)发生霍夫曼降解和重氮化反应生成重氮盐,再与蛋白质载体(BSA,OVA)偶联生成免疫原和包被原,对偶联产物采用三氯化铁及紫外扫描法鉴定偶联成功,且免疫原和包被原的摩尔结合比分别约为3.4∶1和4.2∶1。用免疫原免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA检测抗体效价,采用竞争ELISA法测IC50,获得了效价为1∶51200I、C50为16.91 ng/mL的多克隆抗体,最终证明人工抗原制备成功。  相似文献   

诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘庆堂  职爱民  李青梅  柴书军  赵东  张磊  邓瑞广  张改平 《中国预防兽医学报》2010,11(9)

为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备NFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定。结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1∶512,腹水效价为1∶6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLXMAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

呋喃唑酮人工抗原的制备     

《畜牧与饲料科学》2017,(6)

[目的]制备呋喃唑酮人工抗原。[方法]通过重氮化法和戊二醛法将半抗原FZ与载体蛋白质牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,制备人工免疫抗原和检测抗原,经SDS-PAGE电泳鉴定人工抗原是否耦联成功,用紫外可见分光光度计法测定耦联蛋白浓度。[结果]SDS-PAGE结果显示,用2种方法制备的人工抗原FZ-BSA和BSA、FZ-OVA和OVA的2组蛋白条带迁移距离均发生了变化,耦联物的迁移距离均小于其相对应的载体蛋白。[结论]通过SDS-PAGE鉴定呋喃唑酮人工抗原制备成功。  相似文献   

多西环素人工抗原的合成与鉴定     

米克热木·沙衣布扎提  孟坤杰  王剑 《动物医学进展》2016,(4)

建立多西环素人工抗原(Doxycycline,DOX)的合成及鉴定方法。采用戊二醛偶联法将DOX分别与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原(DOX-BSA)和包被抗原(DOX-OVA)。经SDS-PAGE电泳法、紫外可见吸收光谱鉴定,证实人工抗原成功合成,偶联比分别为8.6∶1和3.8∶1。结果表明建立了一种新的DOX抗原合成方法,为进一步制备特异性DOX抗体和建立检测食品中DOX的酶联免疫方法奠定了基础。  相似文献   

氨基脲人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备     

姚嘉赟  沈锦玉  郝贵杰  徐洋  潘晓艺  尹文林 《中国动物检疫》2009,26(1):33-35

目的合成氨基脲人工抗原并制备其多克隆抗体。方法以氨基脲(SEM)和对醛基苯甲酸(CP)为原料合成半抗原(CP-SEM),并采用碳化二亚胺法和混合酸酐法将其分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成氨基脲人工抗原。以氨基脲人工抗原(CPSEM-BSA)为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用间接ELISA法测定其抗体效价。结果经薄层层析、红外光谱和元素分析等方法鉴定合成半抗原即为CP-SEM。紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明人工抗原合成成功。免疫获得抗氨基脲的多克隆抗体,其抗体效价为1:64000。结论氨基脲人工抗原合成成功,并获得抗氨基脲的多克隆抗体。  相似文献   

氯羟吡啶抗原合成和多克隆抗体制备     

冯才伟  郭鑫 《中国畜牧兽医》2011,38(4):173-176

本研究以氯羟吡啶原药为基础,合成了带羧基的氯羟吡啶衍生物,经质谱鉴定结构正确,并用活性酯法和氯甲酸异丁酯法合成抗原,紫外测定偶联比率和最终抗原蛋白浓度,免疫制备抗血清并测定血清特异性和灵敏度,为建立氯羟吡啶酶联免疫法(ELISA)奠定坚实基础。  相似文献   

展青霉素人工抗原的制备与鉴定     

王欣然  聂虹霞  李岩松  谭彩云  胡盼  冯小丽  任洪林  郭一平  周玉  柳增善  卢士英 《中国畜牧兽医》2014,41(7):14-20

为探讨展青霉素（patulin,PAT）不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2种偶联方法制备的完全抗原免疫动物后抗血清的效价水平。同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶渗透色谱多种方法分析鉴定偶联结果,为PAT单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

一种简单的兔假阴道采精器的制作   总被引：5，自引：0，他引：5  

赵立虎  赵丹凤  刘丽均  张春燕  狄敏  谢夏阳  张守纯  徐平 《中国畜牧兽医》2007,34(1):147-149

作者介绍了2种简单有效的兔假阴道制作方法。 该法使用容易获得的材料和简单工具，结合实验室实际制作采精用假阴道。结果表明，采精效果较好，制作、清洗方便，满足工作需要。  相似文献   

兽药人工抗原合成的研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

张泽英  袁宗辉 《中国兽药杂志》2006,40(5):44-47

在兽药的免疫化学残留分析中,能否合成稳定的具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的最关键步骤.综述了国内外兽药人工抗原合成过程中载体的选择、半抗原的设计（强调偶联部位和间隔臂的引入）、半抗原与载体的偶联方法、人工抗原的纯化与鉴定等方面的研究进展.  相似文献   

Further studies of Mycoplasma gallisepticum serum plate agglutination antigen grown in medium with artificial liposomes substituting for serum     

I Ahmad  S H Kleven  J R Glisson  A P Avakian 《Avian diseases》1989,33(1):140-149

Frey's medium supplemented with artificial liposomes substituting for serum was evaluated for Mycoplasma gallisepticum (MG) serum plate agglutination (SPA) antigen. Antigens prepared in batch (static) culture were compared with antigens grown in a fermenter. All batch-grown MG liposome antigens were highly sensitive, specific, and resulted in a greater yield compared with fermenter-grown liposome antigens. Compared with antigens prepared in Frey's medium with 12% swine serum (regular FMS) or with commercial SPA antigens, liposome antigens had a higher degree of specificity; however, they were similar in sensitivity and antigen yield. The only growth parameter to affect the yield per liter of batch-grown liposome antigen was the concentration of liposomes in the growth medium. The reduced yield and sensitivity of antigens grown in a fermenter may have been due to autoclaving the medium instead of sterilizing by filtration. There was no obvious difference between patterns of serum-medium-grown, liposome-medium-grown, or commercial SPA antigens upon sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis.  相似文献   

Sensitivity and specificity of Mycoplasma gallisepticum agglutination antigens prepared from medium with artificial liposomes substituting for serum     

I Ahmad  S H Kleven  A P Avakian  J R Glisson 《Avian diseases》1988,32(3):519-526

Three batches of strain A5969 Mycoplasma gallisepticum (MG) serum-plate-agglutination (SPA) antigen grown in regular Frey's medium with 12% swine serum, three batches grown in Frey's medium containing artificial liposomes instead of serum, and one commercial SPA antigen were evaluated for sensitivity and specificity. Sensitivity was measured using chickens exposed to MG by intraocular and intranasal inoculation. Specificity was measured in uninoculated controls and in groups inoculated with the oil-emulsion vaccines Haemophilus paragallinarum, infectious bursal disease inactivated virus vaccine, or Staphylococcus aureus. Sera were tested 1 to 8 weeks postinoculation. All SPA antigens had a perfect sensitivity score, except one liposome-grown antigen batch (LC). The two other liposome-grown antigen batches (LA and LB) maintained significantly higher specificity by yielding significantly (P less than 0.01) fewer false positive (FP) agglutination reactions than did the other antigens. The three antigen batches produced in medium with serum had intermediate levels of FP agglutination reactions. When known MG-negative sera were tested, MG SPA antigens LC and commercial SPA antigen yielded significantly (P less than 0.01) higher numbers of FP agglutination reactions than the other SPA antigens.  相似文献