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C R Curtis M D Salman S Shott 《Journal of the American Veterinary Medical Association》1990,197(3):318-320
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Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers were assayed in an attempt to discriminate among five species of Paragonimus. Genomic DNAs of two strains of Paragonimus heterotremus from two provinces in Thailand, Saraburi and Phitsanulok, as well as of P. siamensis, P. harinasutai, P. westermani and P. bangkokensis were extracted and amplified by an arbitrary primer, namely P2 (5-GTTTCGCTCC-3). RAPD patterns showed that those five species were genetically distinct, although they shared genomic DNA to some extent. This primer could also distinguish between two strains of P. heterotremus. The polymorphism observed allowed to construct a relationship dendrogram. The phylogenetic dendrogram showed that the P. heterotremus strains were closest to P. harinasutai, followed by P. siamensis, P. bangkokensis and P. westermani. 相似文献
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本研究旨在对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TP株P4、P60、P90三个代次毒株进行全基因组序列测定,分析其遗传变异特性。通过分段RT-PCR、5′RACE和3′RACE法扩增病毒基因组,并运用生物信息学软件和动物致病力试验进行相关分析。结果表明:TP株P4、P60、P90株基因组全长分别为15346、15394和15393bp。3个代次病毒的基因组序列中ORF1a基因和3′-UTR区域变异较大,尤以Poly(A)尾序列碱基数差异显著,分别为26、74和73bp。3代次毒株基因组序列比对发现TPP90与TPP4差异较大,共有58个核苷酸位点和27个氨基酸位点发生突变,P90GP5蛋白抗原指数和表面亲和力与TPP4和TPP60相比呈增加趋势,动物致病力试验表明TPP4毒株致病力较TPP60和TPP90强。结果提示:TPP4、P60、P903代次毒株基因组序列存在着一定的差异,主要集中在4～60代致弱阶段,遗传进化关系上该病毒分属于PRRSV美洲株分支,并与高致病性PRRSV JXA1株亲缘关系最为接近,相似性高达99.5%、99.2%和99.3%。 相似文献
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牛瑟氏泰勒虫P23和P33表面蛋白双基因融合表达载体的构建及原核表达 总被引：1，自引：1，他引：0
为探索牛瑟氏泰勒虫的表面蛋白基因融合产物作为双价疫苗的可行性,以牛瑟氏泰勒虫基因组DNA为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应（SOE-PCR）把P23和P33表面蛋白基因连接一起,2个基因之间插入一个linker（Gly4Ser）3,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,获得1151bp的双基因融合片段,克隆于表达质粒pGEX-4T-1中,构建了双基因重组表达载体pGEX-4T-P23-P33,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达出预期大小70．0ku的融合蛋白。Western blot检测结果显示,该蛋白与牛瑟氏泰勒虫抗血清呈阳性反应,表明融合蛋白具有反应原性,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据。 相似文献
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饲粮非植酸磷水平对褐壳蛋鸡植酸磷利用率的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
150只蛋鸡随机分为5个处理组，5个处理组非植酸磷水平分别为0.2%,0.25%,0.3%,0.35%,0.4%，钙水平都为3.5%。结果表明：饲粮非植酸磷水平为0.2%时，蛋鸡对植酸磷的表观利用率为65．5％（P＜0．05）。饲粮非植酸磷水平对蛋鸡生产性能无明显影响（P＞0．05）。 相似文献
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Avian reovirus (ARV) causes viral arthritis, chronic respiratory diseases, and malabsorption syndrome. The P10 protein is a viroporin and induces cell fusion, whereas the biological function of P17 protein is completely unknown. In this study, the nucleotide sequences of the P10- and P17-encoding genes from 17 field isolates and vaccine strains of ARV isolated over a 23-year period from distinct geographic locations were analyzed to define phylogenetic profiles and to study sequence variability and genetic evolution. These genes displayed the signs of a high level of sequence divergence and have evolved into five distinct lineages, respectively. The P17-encoding gene showed higher sequence divergence than that of P10-encoding gene. Our results indicated that synonymous substitutions predominate over nonsynonymous substitutions in both genes. Comparison of P10 and P17 gene phylograms with those of S-class genes revealed distinct evolutionary patterns, indicating that P10 and P17 evolve in an independent manner. Comparative sequence analysis also showed extensive sequence divergence between ARV and other orthoreoviruses. The phylogenetic analysis of P10- and P17-encoding genes revealed that diversity within both genes is neither dependent of viral serotypes nor correlated with the disease states caused by avian reovirus. 相似文献
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禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
根据GenBank上的禽呼肠病毒(ARV)S1基因序列,设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物,对13个ARV毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示,13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp,编码98个氨基酸;P17蛋白基因ORF全长为441bp,编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96.6%~100%和95.2%~99.3%之间,推导的氨基酸同源性分别在98.2%~100%和91.9%~99.0%之间。将这13个ARV毒株与GenBank上其他正呼肠病毒毒株,包括番鸭株(DRV)和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒(NelsonBayvirus,NBV)及两个澳洲分离株(ARM-1和SOM-4)进行同源性比较和遗传进化树分析,结果表明,呼肠病毒有地域和种类的差别。 相似文献
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研究磷富集植物对畜禽粪便施用土壤中过量磷的积累及去除能力,可为利用植物提取土壤过剩磷以降低磷造成的非点源污染提供科学依据。采用两期土培盆栽试验,以矿山生态型水蓼为研究对象,探讨不同用量(0、25、50、75、100 g·kg^(-1))鸡粪、猪粪和牛粪处理下矿山生态型水蓼的磷积累能力,分析适宜用量畜禽粪便处理下矿山生态型水蓼在不同生长时期(6、8、10、12周)的磷积累特征及磷去除能力。结果表明:1)随着畜禽粪便用量的增加,矿山生态型水蓼地上部生物量和磷积累量均在75 g·kg^(-1)鸡粪(PM_(75))、100 g·kg^(-1)猪粪(SM_(100))和100 g·kg^(-1)牛粪(DM_(100))时达到最大,地上部磷积累量分别为158.64、204.05和128.92 mg·株^(-1),是不施畜禽粪便处理的5.47~8.66倍。2)适宜用量畜禽粪便(PM_(75)、SM_(100)、DM_(100))处理下,矿山生态型水蓼生物量和磷积累量分别在12和8周时达到最大,地上部磷积累速率在6~8周时最高。8周后,各适宜用量畜禽粪便处理下矿山生态型水蓼磷去除能力无显著变化,磷提取率可达5.84%~19.36%、植株有效数为4~6株。8周为适宜用量畜禽粪便处理下矿山生态型水蓼的适宜收获时期。3)不同畜禽粪便处理下矿山生态型水蓼磷积累能力存在较大差异,在0~6周时,DM_(100)处理下矿山生态型水蓼地上部磷积累速率明显高于其他处理;在6周后,PM_(75)和SM_(100)处理下矿山生态型水蓼地上部磷积累速率均迅速增加,地上部磷积累量在8周时分别是DM_(100)处理的1.19和1.27倍。综上,在75 g·kg^(-1)鸡粪、100 g·kg^(-1)猪粪、100 g·kg^(-1)牛粪的土壤中,矿山生态型水蓼生长良好,磷积累和磷去除能力强,可高效提取畜禽粪便施用土壤中的磷以降低过量磷对环境的威胁,且对猪粪、鸡粪处理土壤中磷的提取效果优于牛粪处理土壤。 相似文献
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猪肺炎支原体P52蛋白的原核表达及抗血清制备 总被引：1，自引：0，他引：1
为表达猪肺炎支原体(Mhp)P52蛋白及制备其血清,本实验利用PCR从Mhp J株扩增P52基因,克隆到表达载体pET-30a中,获得重组质粒pET-P52,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE和western blot检测重组蛋白表达及其免疫学活性.以该重组蛋白为抗原免疫兔制备抗血清,采用间接ELISA检测抗血清效价,并利用抗血清通过间接免疫荧光检测P52基因在AD-293细胞中的表达情况.结果表明,PCR扩增目的基因为1 202 bp,SDS-PAGE检测重组蛋白大小约52 ku,其表达量占菌体总蛋白的28%.Western blot检测表明,目的蛋白能与Mhp阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫活性.间接免疫荧光检测到P52基因在AD-293细胞中表达.本研究为构建P52蛋白腺病毒载体疫苗奠定了基础. 相似文献
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牛病毒性腹泻病毒P20和P14基因的克隆及序列分析 总被引：5，自引：0，他引：5
参考GenBank中BVDV Oregon C24V株的基因组序列设计两对引物,利用套式PCR方法扩增P20基因,扩增出预期525 bp的目的片段.扩增产物克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序.测序结果与参考序列Oregon C24V比较,二者的核苷酸同源性仅为80.95%,推导氨基酸同源性为87.50%.测序结果经NCBI上的Blast(Http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)同源性比较,克隆得到的基因与Osloss株同源性最高,核苷酸同源性为93.65%,推导氨基酸同源性为95.83%.根据P20的测序结果,参照GenBank中BVDV Osloss株设计一对引物,扩增P14基因,经同源性比较,扩增的P14基因与Osloss株核苷酸同源性为94.77%,推导氨基酸同源性为95.10%,通过系统发生分析,推测P20基因和P14基因与Osloss株在进化上比较接近. 相似文献
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