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相似文献
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1.
猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和药敏试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了对河南省猪高热综合征发生期间多杀性巴氏杆菌引起的感染有全面了解,从2006-2010年河南省发生猪高热综合征的245家规模化猪场568份病料中分离革兰氏阴性小球杆菌,通过培养特性试验、生化试验和PCR试验分离鉴定到35株。对分离菌进行毒力和药敏试验,结果显示所分离的猪多杀性巴氏杆菌对小鼠均有毒力,对头孢噻呋、头孢噻肟、环丙沙星、氟苯尼考敏感。  相似文献   

2.
从病死母猪肺脏中分离到一株革兰氏阴性小杆菌,用生理生化鉴定、药敏试验、致病性试验和PCR鉴定方法对分离菌株进行鉴定,并用多杀性巴氏杆菌荚膜分型引物对分离株的荚膜血清型进行鉴定。结果表明:本菌为猪多杀性巴氏杆菌,对多种抗生素高度敏感,对小白鼠有强致病性;PCR扩增16SrDNA基因获得1415bp片段,分离株的16SrDNA核苷酸序列与多杀性巴氏杆菌(AY078999)的同源性为99%,因此该分离菌株被鉴定为致病性巴氏杆菌,命名为YN20110122株;本菌分离株为荚膜A型血清型多杀性巴氏杆菌。  相似文献   

3.
猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究   总被引:17,自引:2,他引:17  
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)。然后做了药敏试验,并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测,用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenie Pasteurella multocida,T^ Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致;PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型:Pm,1株为B型Pm,1株无法定型;有8株用PcR检测为T^ Pm;豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T^ Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8株T^ Pm都为D型,都分离于有严重PAR症状的猪。  相似文献   

4.
2018年9月广西某羊场部分山羊发生流涕、咳嗽、呼吸困难和体温升高等临床症状的疾病,为确诊发病原因并提供治疗方案,采用病原分离培养、PCR扩增鉴定的方法进行诊断,并对分离菌进行生化鉴定、致病性试验和药敏试验。结果显示,病料在血平板有圆形的小菌落生长,革兰阴性小球短杆菌,而在PPLO培养基上不生长;病料的PCR扩增结果显示绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌均为阳性;所分离到的病原菌经生化鉴定,该菌符合多杀性巴氏杆菌的特性;用多杀性巴氏杆菌种属和D型多杀性巴氏杆菌特异性引物扩增为阳性;致病性试验显示该菌对小鼠有很强的致病性;药敏试验显示该菌对头孢他啶、头孢噻肟、氧氟沙星高度敏感,对复方新诺明、强力霉素、红霉素、青霉素为耐药。结果表明该病是由绵羊肺炎支原体和D型多杀性巴氏杆菌混合感染引起。  相似文献   

5.
猪多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立及其应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
设计了1对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物。对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养.然后挑菌做PCR,同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定。结果,从不同省(市)的送检病料中分离鉴定出66株多杀性巴氏杆菌,PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合;该引物对其他6种猪的常见呼吸道病原菌的扩增结果均为阴性;该PCR检测方法能检出CFU为10^3/mL的巴氏杆菌模板。  相似文献   

6.
为了确诊某猪场患病猪的病原菌,找到防控办法,对死亡猪肺脏、气管液进行细菌分离鉴定,经过生化试验、药敏试验、体外抑菌试验、动物试验等,得知:分离菌培养特性、生化反应特性与巴氏杆菌基本一致;分离菌高敏药物为头孢氨苄、头孢曲松等,低敏药物为青霉素G、林可霉素等;乳酸菌对巴氏杆菌有明显的抑菌作用;攻毒小白鼠48 h内全部死亡。结论:分离菌为多杀性巴氏杆菌,该病为多杀性巴氏杆菌引起的猪巴氏杆菌病,乳酸菌配合高敏药物能防治该病。  相似文献   

7.
设计了一对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物。对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养,然后挑菌做PCR,同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定。结果,从不同省(市)送检的病料中分离鉴定出66株多杀性巴氏杆菌,PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合;该引物对其他6种猪的常见呼吸道病原菌扩增均为阴性;该PCR检测方法能检测出cfu为10^3的巴氏杆菌模板。  相似文献   

8.
《养猪》2021,(3)
对东营某猪场送检猪病料进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、生化试验、药敏试验、致病性试验和PCR鉴定。结果成功分离到一株血清A型多杀性巴氏杆菌,该菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。  相似文献   

9.
【目的】了解福建省猪场猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)的流行及oppA基因遗传进化情况。【方法】本研究采用细菌分离培养、生化试验、16S rRNA PCR扩增测序、PCR荚膜分型、oppA基因克隆及相似性分析、动物回归试验等方法对分离菌株进行鉴定和分析。【结果】本研究共分离到10株菌,分离菌在血平板上形成淡灰白色、湿润光滑、奶油露珠状菌落;分离菌株能酵解蔗糖、果糖、麦芽糖和甘露醇,不能分解葡萄糖、枸橼酸盐、乳糖、硫化氢等,与多杀性巴氏杆菌生化特性基本一致;分离菌株16S rRNA序列与GenBank中登录的多杀性巴氏杆菌相似性达99.9%以上,10株分离菌均为多杀性巴氏杆菌;PCR荚膜分型显示,6株分离菌为荚膜A型,4株为荚膜D型;基于oppA基因的遗传进化树显示,10株分离菌均位于同一分支内;动物回归试验结果显示,在24 h内攻毒小鼠死亡率较高(21/30),分离菌有较强的致病力。【结论】福建省猪场猪多杀性巴氏杆菌流行菌株的荚膜血清型主要是A和D型,且大部分菌株都来源于共同的祖先,本研究结果丰富了猪多杀性巴氏杆菌的流行病学资料,并为该病的防控奠定基础。  相似文献   

10.
对山东惠民某猪场猪病料进行病原菌的分离,对分离菌进行形态学观察、生化试验、药敏试验、致病性试验和PCR鉴定。结果成功分离到一株荚膜血清B型多杀性巴氏杆菌,该菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。  相似文献   

11.
产毒素多杀性巴氏杆菌菌落双重PCR检测方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
为建立快速特异的PCR方法以及同时检测并区分产毒素与非产毒素多杀性巴氏杆菌,本研究根据GenBank登录的多杀性巴氏杆菌KMT1基因和toxA毒素基因序列,设计合成了2对特异引物。特异性试验表明产毒素多杀性巴氏杆菌C51-6扩增出了460bp和1854bp的2条目的片段,而不产毒素多杀性巴氏杆菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和鸡白痢沙门菌的扩增均为阴性;敏感性试验表明该PCR方法能从含450CFU的菌液中扩增出相应的目的片段。同时用豚鼠皮肤坏死试验和小鼠致死试验对该PCR方法进行了验证。  相似文献   

12.
多杀性巴氏杆菌是鹅霍乱的病原体,给我国养鹅业带来了巨大的经济损失,但尚无有效的预防和控制措施。本试验对吉林地区分离的巴氏杆菌分离株的培养特性、生化特性、对化学消毒剂的敏感性、致病性、药敏试验进行了研究。结果为生化特性符合巴氏杆菌特性;1:10000稀释的百毒杀和1:5000稀释的过氧乙酸可有效杀灭该菌;对小鼠有较强致病性;药敏试验结果表明对氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林敏感,这将为研制巴氏杆菌灭活疫苗奠定了重要基础。  相似文献   

13.
多杀性巴氏杆菌是鹅霍乱的病原体,给我国养鹅业带来了巨大的经济损失,但尚无有效的预防和控制措施.本试验对吉林地区分离的巴氏杆菌分离株的培养特性、生化特性、对化学消毒剂的敏感性、致病性、药敏试验进行了研究.结果为生化特性符合巴氏杆菌特性;1∶10 000稀释的百毒杀和1∶5 000稀释的过氧乙酸可有效杀灭该菌;对小鼠有较强致病性;药敏试验结果表明对氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林敏感,这将为研制巴氏杆菌灭活疫苗奠定了重要基础.  相似文献   

14.
猪萎缩性鼻炎在我区猪场时有发生,给养猪业造成较大的危害,为了解我区猪萎鼻的流行情况,从我区的5个规模化猪场采集了266份断奶仔猪的鼻拭子,用常规的细菌分离方法与生化鉴定得到80株多杀性巴性氏杆菌.药敏试验结果表明这些菌株对大多数抗生素中度敏感.用豚鼠皮肤坏死试检、小鼠致死试验及PCR检测确定80株中有9株为产毒素多杀性巴氏杆菌,亦即为猪萎缩性鼻炎的病原菌.  相似文献   

15.
对来自苏中地区25个疑似感染多杀性巴氏杆菌的规模化猪场随机采取的250份病料进行了涂片镜检、分离纯化、生化试验、菌落荧光检测、菌体血清型鉴定、PCR鉴定和动物试验。结果分离出4个猪场共21株多杀性巴氏杆菌,21株多杀性巴氏杆菌中共检测出3个血清型,其中5型17株,1型3株和3型1株。通过对苏中地区猪多杀性巴氏杆菌流行情况的初步调查,为猪巴氏杆菌病的快速诊断和科学防治提供了重要依据。  相似文献   

16.
为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌,本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定,并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示,从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落,为革兰氏阴性短小杆菌,瑞氏染色呈两极浓染;生化鉴定结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇,硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性;16S rRNA基因序列系统进化树分析显示,该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支,同源性 > 99%;细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符;荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段,与荚膜血清A型相符;动物回归试验显示,该分离菌有较强的致病性;药敏试验结果显示,该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药;经耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带Sul1、Sul3、tetX)和Intl1 4种耐药基因,与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌,为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。  相似文献   

17.
为了确定西南民族大学动物医学实验室分离的鸭源、猪源、牛源和山羊源多杀性巴氏杆菌(Pm),即Q1、Z1、N1、Y1株的荚膜血清型及其致病性,试验采用PCR方法对分离的这4株不同动物源多杀性巴氏杆菌的种属和荚膜血清型进行鉴定,对目的基因测序分析,并用Balb/c小鼠对分离菌的致病性进行研究。结果表明:4株菌均为多杀性巴氏杆菌;鸭源Q1株为荚膜血清A型、猪源Z1株和牛源N1株为荚膜血清B型、山羊源Y1株为荚膜血清D型;对目的基因测序后与GenBank上已公布的相应荚膜血清型比对,同源性为98%~100%;不同动物源多杀性巴氏杆菌对Balb/c小鼠的致病性研究显示,猪源荚膜血清B型多杀性巴氏杆菌对Balb/c小鼠有较强的致病力。  相似文献   

18.
奶牛荚膜血清A型巴氏杆菌的分离鉴定及致病性   总被引:1,自引:0,他引:1  
山东省某规模化奶牛场10~30日龄的犊牛出现发热、咳嗽和关节肿大的临床症状,并造成部分犊牛死亡。为查明死亡原因并制定相应的防控方案,在流行病学调查和现场剖检的基础上,对采集的病料进行病理组织学检查、细菌分离鉴定、生化试验,并对鉴定的病原菌进行动物感染试验和药敏试验,对分离菌的PCR产物进行多杀性巴氏杆菌特异性基因和荚膜血清型特异性基因序列的测定。结果表明,该场犊牛主要死于以纤维素性肺炎为特征的败血症,死亡原因为多杀性巴氏杆菌感染所致,且分离的多杀性巴氏杆菌为荚膜血清A型高致病性菌株,对小鼠呈高致死性;该分离菌株对林可霉素、头孢噻呋、多西环素耐药,对恩诺沙星、氟苯尼考高度敏感。  相似文献   

19.
为了研究引起青海省海西州漠河骆驼场安格斯种牛致死病因及其病原特征,试验以C47-8为质控菌株,采用常规细菌分离鉴定技术对无菌采集的病死安格斯种牛病料进行了多杀性巴氏杆菌的分离与纯化、生化鉴定、致病性试验、药敏试验及其种特异性基因Kmt-1的检测。结果表明:临床分离株为革兰氏阴性的短杆菌,病料触片经美蓝染色镜检可见其呈两极着色特性;与C47-8间存在乳糖、蔗糖、木糖、水杨苷及尿素酶等5种生化鉴定差异;对小鼠具有致死性效应;对红霉素等22种抗生素耐药,平均耐药率为62.85%(22/34),而质控菌株则无耐药性。同时对提取的临床分离株DNA进行Kmt-1基因的PCR扩增,分别获得了大小为460 bp和253 bp的Kmt-1基因扩增片段;经序列分析,临床分离株Kmt-1基因与Gen Bank公布的序列之间的基因编码区核苷酸序列同源性为97%~100%;检测的最低DNA浓度为790 ng/m L;所应用的2对Kmt-1基因检测引物对伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌和克雷伯氏菌的扩增均为阴性。说明此次安格斯种公牛发病为多杀性巴氏杆菌引起,建议该养殖场在做好饲养管理的同时,应加强针对多杀性巴氏杆菌的免疫预防和消毒处理措施,以减少或杜绝本病的再次发生。  相似文献   

20.
2014年11月河北某规模化鸡场一批4周龄左右的肉鸡发病死亡,临床表现为精神沉郁、呼吸困难、关节肿大、跛行等症状,为对此疫病进行确诊,通过病理组织学观察、细菌分离、PCR检测、药敏试验、动物致病性试验等实验室诊断方法进行系统分析。病理组织学观察结果显示肺脏出血,心脏、肝脏水肿,并伴有异嗜性粒细胞浸润;镜检可见两极深染的短杆菌;用多杀性巴氏杆菌KMT-1基因和禽呼肠孤病毒(ARV) σB基因特异性引物的扩增结果均为阳性;该巴氏杆菌分离菌可致死小鼠,且对头孢曲松、头孢哌酮等药物高度敏感。根据上述实验室检测结果并结合临床症状进行综合分析,最终确诊该病为ARV和巴氏杆菌混合感染。  相似文献   

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