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牛精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白的分离与定位 总被引：3，自引：0，他引：3
牛精子膜用非离子去污剂ＮＰ－４０增溶，经固相凝集素亲和层析，初步分离了精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白，经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色显示出了四条蛋白质带，分子量分别为７８，６０，４２和３３ｋＤ。用分离到的糖蛋白制备抗血清，对牛精子进行免疫细胞化学标记，结果顶体区显示为强阳性，与麦芽凝集素亲和细胞化学的染色一致。用抗血清处理精子再进行亲和细胞化学染色时，顶体区的麦芽凝集素结合糖残基多数被封闭，揭示 相似文献
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为了对精子膜凝集素受体进行定量测定,建立了一种 HRP-凝集素分光光度法,并筛选确定了适宜的测定条件。该方法的主要步骤为:①调节精子浓度;②用 HRP-凝集素孵育精子样品及对照;③加入底物显色;④离心后以分光光度法测定样品和对照上清中游离 HRP-凝集素量。精子膜凝集素受体量以精子样品 OD 值与对照 OD 值之差(即标记到精子膜上的凝集素量)表示。对同一精子样品分别进行三种凝集受体定量的重复试验表明,该法具有良好的再现性。本方法可用于精子膜特性的研究和某些雄性(或男性)不育的诊断。 相似文献
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一个重要的精子受体—猪透明带糖蛋白β-D-半乳糖残基 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】证明末端半乳糖残基在猪透明带糖蛋白中的分布以及它在精子结合和侵入中的作用。【方法】体外成熟的猪卵母细胞去除周围卵丘细胞，用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate，FITC) 络合西非单叶豆凝集素(Bandeiraea simplicifolia lectin-I，BS-I) 或蓖麻凝集素(Ricinus communis agglutinin，RCA-I)处理30min，分别观察末端-D-半乳糖残基或-D-半乳糖残基在透明带中的定位分布。荧光显微镜观察显示，BS-I和RCA-I都标记于整个透明带上且比较集中于透明带的外层，其中BS-I显示微弱荧光反应，而RCA-I呈强荧光反应且在透明带的外层反应尤为强烈。植物凝集素处理的卵母细胞用于体外受精，分别在受精2h或12h观察精-卵结合和精子入卵情况。【结果】RCA-I处理组卵母细胞平均精子结合数显著低于对照组（18 vs 95），而精子入卵则完全被阻断；可是BS-I处理组的卵母细胞的精子结合数少量被抑制（59 vs 95），而且精子入卵率与对照组无显著差异。【结论】猪透明带末端-D-半乳糖残基作为精子受体的重要组成成分，参与精-卵结合和受精。 相似文献
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细胞表面糖蛋白中糖的特性对于细胞的相互识别起重要作用,配子细胞表面糖配基的差异恰恰体现不同物种间受精作用的特异性,本研究分别选用可以特异性结合半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖的FITC标记凝集素,对紫贻贝配子细胞中对应的糖进行研究。结果显示,4种糖在卵细胞边缘的标记特征不明显,仅半乳糖和葡萄糖在一些卵细胞边缘有区域性分布,但在细胞质区,这4种糖均有少量分布;半乳糖和岩藻糖在贻贝的精巢的精细胞和成熟精子区为较均匀的弱阳性标记,甘露糖仅在输精小管边缘有分布,葡萄糖的含量相对较多,但也只是在输精小管边缘以及成熟精子区有一定的标记。上述结果表明,紫贻贝配子细胞表面不同糖基的分布和含量存在一定的差异,造成配子间起到识别作用的糖蛋白组成和结构不同,决定了紫贻贝配子识别的特异性。 相似文献
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用自己设计的酶标凝集素法测定了乳用牛、乳肉兼用牛、中国美利奴羊、澳洲美利奴羊新鲜和冷冻精子表面的麦芽凝集素（WGA）受体、大豆凝集素（SBA）受体及伴刀豆球蛋白A（Con A）受体的相对数量。在乳用牛精子，冷冻后WGA受体数量显著下降（P< 0.01），穿透实验表明WGA受体数量与精子的穿透率呈高度正相关（r=0.86），另两种受体的数量在冷冻后无显著变化，与精子的穿透率也无相关关系。在乳肉兼用牛精子，冷冻后数量显著下降的是SBA受体（P< 0.01）在中国美利奴羊精子是WGA受体（P< 0.05）和Con A受体（P< 0.05），而在澳州美利奴羊精子三种受体的数量均无显著变化。 相似文献
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为了认识附睾对精子表面抗原修饰作用的分子机制,本文应用HRP—WGA、HRP—ConA、HRP—SBA、HRP—RCA—Ⅰ和HRP—UEA—Ⅰ分别对昆明小鼠附睾头、附睾体与附睾尾切片进行了亲合细胞化学研究,并用HRP—WGA、HRP—ConA和HRP—SBA分别对取自附睾头和附睾尾的精子涂片进行了标记,以明确附睾管糖复合物分泌功能与精子表面抗原变化之间的关系。WGA对附睾内排精管上皮细胞的标记很不均一,直至附睾尾部,上皮细胞才呈均一的强阳性反应。从附睾头至附睾尾ConA对排精管上皮细胞的标记由强变弱,个另细胞甚至完全不被标记。SBA对各段排精管上皮细胞的标记基本相同。RCA—Ⅰ对排精管上皮细胞的标记主要发生在静纤毛上,并呈强阳性反应,且各段上皮细胞的标记反应相似。UEA—Ⅰ对附睾头和附睾体内排精管上皮细胞的静纤毛呈强阳性标记,且在顶端胞质内有一强阳性颗粒,在附睾尾段,细胞内强阳性颗粒消失,静纤毛标记强度也减弱。WGA对涂片上精子的标记反应相近。ConA在精子顶体区的标记强度随着精子向附睾尾的推移而略增。与此相反,SBA在精子顶体区的标记强度则随着精子向附睾尾的推移而减弱。上述结果表明,附睾排精管上皮细胞具有分泌多种糖复合物(主要是糖蛋白)的功能,并籍此功能实现其对精子表面抗原的修饰作用。 相似文献
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H—Y抗血清的制备,检测与应用 总被引：1，自引：0，他引：1
用纯系（ＢＡＬＢ／ｅ）雄性小鼠制备Ｈ－Ｙ抗原对雌性大鼠进行免疫，可获得特异性的Ｈ－Ｙ抗体。经初步检测，Ｈ－Ｙ抗血清的效价为１：３２。用ＥＬＩＳＡ检测结果为阳性反应，抗血清与鼠精子有特异性抑制的凝集作用，凝集反应的程度随抗血清的稀释而降低，对牛的Ｙ精子也有特性抑制，经抗血清感作过的年精子荧光反应消失。曾两次用Ｈ－Ｙ抗血清感作过的牛精液对母牛进行体外界输精。试验结果雌性比率分别达到８１．８０％和８０５ 相似文献
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采用比色法分析比较了金花茶多糖与蓖麻凝集素、伴刀豆凝集素等凝集素的凝集反应特性.结果显示,不同凝集素均能与金花茶多糖发生凝集反应,但凝集反应程度有明显差异.特异结合糖残基为半乳糖的蓖麻凝集素与金花茶多糖的凝集反应效果最显著,而特异结合糖残基同样为半乳糖或其衍生物的海红豆凝集素、欧卫矛凝集素、怀槐凝集素和花生凝集素的凝集反应程度则比较弱.当金花茶多糖浓度上升至6.59 mg/mL时,蓖麻凝集素的凝集反应是其他凝集素的6～10倍.另一方面,特异结合糖残基为甘露糖的伴刀豆凝集素与金花茶多糖虽然有类似的凝集反应特征,但是其凝集反应程度明显弱于蓖麻凝集素.从以上结果推测,凝集素的分子形态对金花茶多糖的凝集反应有显著影响. 相似文献
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母牛因为反复无效的输精可能使血液中抗精子抗体不断升高而导致不孕。目前对牛精液品质的鉴定常常以谷—草转氨酶(GOT)的释放量作为鉴别精细胞完整性的可靠指标。 抗精子抗体引起了精子凝集,是否损伤了顶体,破坏了精细胞的完整?本试验以GOT的释放为指标来检测抗精子抗体对精细胞及顶体完整性的影响。 相似文献
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T型雄性不育小麦种子蛋白的电泳分析 总被引：7，自引：0，他引：7
以梯度SDS－PAGE方法分析了T型小麦雄性不育系及其保持系种子醇溶蛋白和谷蛋白组分，发现两系间有明显差异，而且四个不同品种小麦不育系均有各自与保持系区别的谱带出现，表明T型雄性不育小麦醇溶蛋白基因的表达有品种特异性。用单、双向电泳结合银染技术进一步分析了胚乳醇溶蛋白，发现不育系11A和14A，分别有24kD和36kD的特异蛋白。 相似文献
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目的 研究小麦胚芽对面团流变学特性及对馕品质特性的影响。方法 选择市售特一粉,测定面粉主要性能指标,分析小麦胚芽添加量对面粉白度、灰分、蛋白质、湿面筋、粉质、拉伸、糊化特性以及馕品质的影响,评价感官品质。结果 随着小麦胚芽粉添加量的递增,面团的湿面筋含量、粉质特性、拉伸特性和糊化特性呈减弱趋势;蛋白质呈递增趋势。小麦胚芽的添加比例从0%增加到10%,蛋白质、吸水率、拉伸阻力呈递增趋势,变化范围分别为9.3~11.42 g/100g、57.2%~64.6%,718.5~485.0BU;湿面筋、面团形成时间、稳定时间、拉伸阻力、延伸度、拉伸曲线呈递减趋势,变化范围分别为34.8%~30.6%、5.2~2.5 min、15.0~8.5 min,635.0~320.0 BU,181.0~106.0 mm,116.8~101.7cm 2。添加小麦胚芽粉会使馕的外表形态、内部结构和咀嚼性等逐渐降低,但其风味、色泽、硬度和酥脆度增加,使馕有麦胚独特的香味和口感,在添加量6%时,馕的评分最高。 结论 在小麦粉中添加 6%~8% 的小麦胚芽粉对面团品质特性和馕的综合影响较小,制作的馕评分值较高,可以改善馕的风味和馕的品质,提高馕的营养成分含量。 相似文献
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The Technology Research of Anti-oxidation Peptide Preparation by Alkaline Protease Hydrolyzing Wheat Germ Meal 总被引：3，自引：0，他引：3
小麦胚芽粕是小麦胚芽提油后的副产物,大部分未得到充分开发利用,因此有大量的小麦胚芽蛋白损失。为了充分开发利用小麦胚芽粕蛋白,对其进行了碱性蛋白酶酶解备抗氧化肽。通过单因素实验和回归分析,得到最优实验条件为加酶量0.8%（w/w）,料水比1：12.3,酶解时间2.1 h,此条件下得到 DPPH清除率为49.78%,水解度为22%,水解液中肽含量为1.9%（w/w）.通过SDS-PAGE电泳,肽的分子量都在10 ku以下,大部分在4.54和5.63 ku之间。小麦胚芽蛋白得到充分利用从而节约了粮食。 相似文献
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小麦胚芽花生酱的研制(英文) 总被引：2，自引：0，他引：2
采用正交试验分析方法研究了小麦胚芽花生酱的生产工艺,并对小麦胚芽及花生进行了烘烤试验,同时研究了产品的配方及稳定性,得到色泽黄褐、香味浓郁并具有营养和保健功能的新型小麦胚芽花生酱,其最优配方为：小麦胚芽与花生原酱的比例为１：９,食盐浓度为１．５％,蔗糖浓度为４％,单甘油脂为１．５％～２％。添加适当的单甘油脂、磷脂、甘油和控制研磨方式,控制酱体出口温度（７０℃左右及酱体装瓶前的温度（３５ ℃）,就可以制成均匀稳定的小麦胚芽花生酱。 相似文献
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【目的】克隆TaPrx基因并对其在小麦与条锈菌互作中的功能进行初步分析。【方法】利用PCR方法结合RACE技术在cDNA文库中筛选得到TaPrx基因的全长序列并进行生物信息学分析,然后克隆至pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达。通过Real-time RT-PCR进行表达模式分析。【结果】得到TaPrx基因的全长序列688 bp,ORF489 bp,编码162个氨基酸残基,分子量17.36 kD,等电点5.32,含一个保守的半胱氨酸残基（Cys）,不含信号肽及跨膜结构域,亚细胞定位94%的可能性在细胞质。TaPrx融合蛋白分子量38 kD,最佳IPTG诱导浓度0.05 mmol?L-1,20℃诱导20 h可得到最大量的融合蛋白。Real-time RT-PCR分析表明TaPrx基因在小麦与条锈菌的亲和与非亲和互作中均受诱导表达,分别在接种后24 h、18 h达到表达高峰。【结论】获得了TaPrx基因特异性的多克隆抗体;TaPrx基因受条锈菌诱导表达,可能参与了小麦与条锈菌互作。但是否参与了小麦受条锈菌侵染后产生的ROS的清除与调节仍需进一步验证。 相似文献
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麦胚黄酮类化合物提取方法的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
采用水提法、加碱浸提法、醇提法分别从麦胚中提取黄酮类化合物，进行工艺方法比较，选出提取率高，工艺条件可行的最佳方法。实验结果表明，碱提法、水提法提取的黄酮类化合物得率低于醇提法，醇提法后续过滤、回收溶剂、浓缩等操作比水提法简单且不费时。因此，醇提法的提取效果最好。 相似文献
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麦胚黄酮在不同氧化体系中的抗氧化作用的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
通过三种常用抗氧化体外模型试验对试验制得的麦胚黄酮的抗氧化功能性质进行验证。结果显示:麦胚黄酮具有抗氧化活性和 OH自由基清除能力。对 OH自由基清除率为44.8%～78%。 相似文献
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Various lectins were found to induce tyrosine aminotransferase in H-35 rat hepatoma cells grown in monolayer culture. Wheat germ agglutinin gave a maximal induction of tyrosine aminotransferase 6 hours after its addition. The induction time course was similar to that elicited by insulin. Fourteen micrograms of wheat germ agglutinin per milliliter gave half-maximal enzyme induction and 50 micrograms per milliliter gave the maximal response. The induction of tyrosine aminotransferase by wheat germ agglutinin was additive with the induction by either dexamethasone or dibutyryl adenosine 3',5'-monophosphate, but was not additive with the tyrosine amino transferase induction by insulin. Wheat germ agglutinin also mimicked insulin in the inhibition of cellular protein degradation in the absence of serum. The insulin-like effects of lectins should be considered in lectin-mediated manipulations such as agglutination. 相似文献
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小麦细胞壁糖蛋白的耐盐性保护作用与机制研究 总被引：26，自引：0，他引：26
小麦盐胁迫处理后发现，强耐盐品种（961、R-025、鲁德1号和R-017）细胞壁结合的羟脯氨酸及糖蛋白合成显著高于盐敏感品种（东103和中国春）；品种间的游离脯氨酸含量与其耐盐性关系不明显。电镜观察结果表明：盐胁迫过程中强耐盐品种其细胞表面糖蛋白层明显增厚、致密，而盐敏感品种则变薄、脱落甚至完全消失，游离到细胞间隙中。细胞壁糖蛋白的积累是小麦品种耐盐性反应的重要生化机制，在小麦的耐盐生理活动中起着重要作用。 相似文献