共查询到19条相似文献，搜索用时 390 毫秒
1.
赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE鉴定表明,OTA与BSA和OTA与OVA偶联成功,偶联物OTA-BSA和OTA-OVA的偶联比分别为7∶1和4.5∶1。用免疫原OTABSA免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,用OTA-OVA包被ELISA板进行检测,小鼠血清中抗OTA的抗体效价最高可达1∶51 200。表明制备的免疫原OTA-BSA具有良好的免疫原性,为OTA单克隆抗体的制备奠定了基础。 相似文献
2.
雌二醇多克隆抗体的制备与鉴定 总被引：4，自引：0，他引：4
制备雌二醇完全抗原,并通过免疫家兔得到多克隆抗体,为下一步制备雌二醇单克隆抗体和雌二醇检测ELISA试剂盒奠定基础。试验以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用碳化二亚胺法,合成了雌二醇(E2)的2种免疫偶合物:免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA;通过紫外光谱定性证明偶合物偶联成功与否,并对偶合物的蛋白含量、结合比进行测定并以免疫原E2-BSA免疫家兔,制备多克隆抗体,用包被原E2-OVA进行ELISA,对多克隆抗体特异性及效价进行检测。结果表明成功合成了雌二醇人工抗原即免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA,二者的蛋白浓度分别为5.455和7.533mg/mL,结合比分别为7:1和8:1;制备的多克隆抗体特异性好,血清效价为1:106。 相似文献
3.
4.
唑人工抗原的合成及多克隆抗体的制备将磺胺甲(口恶)唑以重氮化方法使之分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体.交叉试验表明产生的特异性抗体与磺胺甲(口恶)唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显. 相似文献
5.
磺胺甲(口恶)唑人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 总被引：1，自引：0，他引：1
将磺胺甲(口恶)唑以重氮化方法使之分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体.交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲(口恶)唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显. 相似文献
6.
氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 总被引：9，自引：0，他引：9
将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接．三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验，结果产生了特异性抗体。交叉试验表明：产生的特异性抗体与氯霉素反应明显，与其他类似物交叉反应不明显。 相似文献
7.
8.
盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定 总被引：2，自引：1，他引：1
本试验旨在合成盐酸四环素人工抗原,为其单克隆抗体的制备奠定试验基础。将盐酸四环素(TCH)发生霍夫曼降解和重氮化反应生成重氮盐,再与蛋白质载体(BSA,OVA)偶联生成免疫原和包被原,对偶联产物采用三氯化铁及紫外扫描法鉴定偶联成功,且免疫原和包被原的摩尔结合比分别约为3.4∶1和4.2∶1。用免疫原免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA检测抗体效价,采用竞争ELISA法测IC50,获得了效价为1∶51200I、C50为16.91 ng/mL的多克隆抗体,最终证明人工抗原制备成功。 相似文献
9.
10.
磺胺甲噁唑人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 总被引：1，自引：1，他引：0
将磺胺甲噁唑以重氮化方法使之分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲口恶唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。 相似文献
11.
二氟沙星人工抗原的合成与鉴定 总被引：15，自引：2，他引：13
通过化学方法合成了二氟沙星人工免疫原和包被原；采用碳二亚胺法将半抗原二氟沙星与载体蛋白BSA连接制备人工免疫原；并采用氯甲酸异丁酯法将二氟沙星与载体蛋白OVA连接制备人工包被原，经FeCl3显色反应、紫外扫描分析和动物免疫试验证实人工抗原合成成功。这对抗二氟沙星单克隆抗体的制备具有重要意义。 相似文献
12.
用混合酸酐法合成的BSA-DES免疫兔子,制备抗DES的特异性抗体,分别用混合酸酐法和碳二亚胺法合成的OVA-DES作为包被原检测抗体;用混合酸酐法合成的OVA-DES和碳二亚胺法合成的OVA-DES免疫小白鼠,制备抗DES的特异性抗体,分别用混合酸酐法合成的BSA-DES和碳二亚胺法合成的BSA-DES作为包被原检测抗体。检测结果表明:三种免疫原免疫动物,都产生了DES的特异性抗体,并建立了间接阻断ELISA法。这为残留DES酶免疫检测试剂盒的制备奠定了基础。 相似文献
13.
间接ELISA检测奶牛乳房炎多联苗抗体方法的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
利用超声波破碎法制备无乳链球菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌可溶性抗原。对3种破碎抗原最佳包被浓度及包被条件、血清样品工作浓度、封闭液、酶标二抗的最佳工作浓度及作用时间等反应体系进行筛选和优化，初步建立了间接ELISA法检测奶牛乳房炎多联苗3种菌血清抗体的方法。对24头泌乳牛进行抗体检测，结果表明该3种抗原反应体系一致，3种抗原最适包被浓度为4—6μg／mL．血清样品最佳稀释度为1：200，该方法具有快速、简单、特异性和重复性好等优点。 相似文献
14.
为探讨展青霉素（patulin,PAT）不同抗原合成方法对完全抗原制备及抗体产生的影响,本试验利用琥珀酸酐联合活泼酯法,分别制备免疫原PAT-BSA和包被原PAT-OVA。为提高PAT与偶联蛋白的结合率,尝试将BSA修饰为EDA-BSA后与PAT进行偶联,并对比2种偶联方法制备的完全抗原免疫动物后抗血清的效价水平。同时利用琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶渗透色谱多种方法分析鉴定偶联结果,为PAT单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立奠定了基础。 相似文献
15.
为了合成恩诺沙星（enrofloxacin,EFLX）完全抗原,制备兔源多克隆抗体血清,试验通过活化酯法将小分子的EFLX偶联到牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白(OVA)上,形成偶联物EFLX-BSA和EFLX-OVA,以EFLX-BSA为免疫原免疫兔,以EFLX-OVA为检测原通过ELISA方法检测兔血清效价。结果表明,免疫兔血清效价都在1∶51200以上,其中2号兔效价最高,达到1∶204800,敏感性好,半数抑制浓度IC50为169.91 ng/mL,检测范围为37.52～302.31 ng/mL。本试验成功制备了EFLX完全抗原,获得了敏感的兔源多克隆抗体血清,为以后ELISA试剂盒和胶体金试纸条的研发奠定了基础。 相似文献
16.
建立多西环素人工抗原(Doxycycline,DOX)的合成及鉴定方法。采用戊二醛偶联法将DOX分别与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原(DOX-BSA)和包被抗原(DOX-OVA)。经SDS-PAGE电泳法、紫外可见吸收光谱鉴定,证实人工抗原成功合成,偶联比分别为8.6∶1和3.8∶1。结果表明建立了一种新的DOX抗原合成方法,为进一步制备特异性DOX抗体和建立检测食品中DOX的酶联免疫方法奠定了基础。 相似文献
17.
A dot immunobinding assay (DIA) was developed to detect antibodies against Pasteurella multocida in turkey serum. Five coating antigens, namely, whole-cell (WC) antigen, sonicated cell lysate (SCL), crude capsular extract (CE), formalin extract (FE), and heat-stable antigen (HSA), were compared by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and DIA using reference antisera against P. multocida organisms. WC and SCL antigens showed higher sensitivity, whereas FE and HSA antigens were more specific coating antigens in both assays. The specificity of DIA was greater than ELISA by comparing the P/N ratios of HSA against serum prepared from heterologous serotype of P. multocida. The DIA had also several distinct advantages over the ELISA, which included reduction of the manipulation time and more uniform binding of coating antigens onto the nitrocellulose membranes compared with binding of coating antigens to microtiter plates for ELISA. 相似文献
18.
将杆状病毒表达系统表达并经梯度离心纯化的PCV2Cap蛋白作为标准品,利用双抗夹心法建立了针对猪圆环病毒2型Cap蛋白的ELISA检测方法,并应用于圆环病毒2型基因工程疫苗的质控。结果表明,多抗最适包被浓度为1μg/mL,最佳封闭液为1％BSA,最佳单抗反应浓度为2μg／mL,反应时间60min,最佳二抗使用稀释度1：40000,反应时间60min。该方法与St9细胞、BSA和其他猪病病毒抗原之间无交叉反应,最低检测抗原量为5ng。 相似文献
19.
目的合成氨基脲人工抗原并制备其多克隆抗体。方法以氨基脲(SEM)和对醛基苯甲酸(CP)为原料合成半抗原(CP-SEM),并采用碳化二亚胺法和混合酸酐法将其分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成氨基脲人工抗原。以氨基脲人工抗原(CPSEM-BSA)为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用间接ELISA法测定其抗体效价。结果经薄层层析、红外光谱和元素分析等方法鉴定合成半抗原即为CP-SEM。紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明人工抗原合成成功。免疫获得抗氨基脲的多克隆抗体,其抗体效价为1:64000。结论氨基脲人工抗原合成成功,并获得抗氨基脲的多克隆抗体。 相似文献