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重组M蛋白-乳胶凝集试验检测PRRS病毒血清抗体的研究 总被引：19，自引：0，他引：19
利用纯化的 PRRS病毒重组 M蛋白致敏乳胶制成乳胶抗原 ,成功地建立了一种检测 PRRS病毒血清抗体的乳胶凝集试验 (L AT)诊断方法。用制备的乳胶 M抗原分别检测猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪弓形体病、猪衣原体病、猪乙型脑炎阳性血清 ,结果均为阴性 ,无交叉反应 ,说明建立的 L AT方法具有良好的特异性。用建立的乳胶凝集试验方法与国外IDEXX公司 PRRS病毒抗体检测试剂盒同时对 76份猪血清样本进行检测 ,结果表明建立的 L AT方法的特异性和敏感性均为 95 % ,两种方法的总符合率为 87% ,检出率基本一致。研究结果表明 L AT方法具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉且可用于现场检测等优点 ,是一种适合基层兽医单位用于 PRRS病毒血清抗体检测的新方法 相似文献
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应用猪弓形体抗体胶体金快速检测卡,对150份猪血样本进行弓形体抗体检测。结果显示,病原学涂片染色法检测阳性猪血样本13份,阳性检出率8.7%;胶体金法15份,阳性检出率10%。结论:猪弓形体胶体金快速检测法作为一种简单、便捷的血清学诊断方法,具有较好的敏感性和特异性,并具有简便快速安全的特点,可以作为对病原学涂片染色法的补充和验证,适合养殖场及野外现场使用。 相似文献
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检测猪伪狂犬病血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验方法的建立和评价 总被引：1，自引：0，他引：1
李克荣 《中国预防兽医学报》1989,(4)
以斑点酶联免疫吸附试验(简称 Dot-ELISA)检测128份接种伪狂犬病病毒(PRV)前后的实验猪血清及49头份现地猪血清,并与微量病毒中和试验(MIVN)作比较.结果,Dot-ELISA 能检出抗 PRV 特异抗体,与MIVN 的检出符合率为95.9%,两种方法无显著性差异(P>0.05).Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(接毒后第5天)早于 MIVN(接毒后第9天).Dot-ELISA 检测猪血清 PRV 抗体,具有特异性强、敏感性高、快速简便等优点,适合于大批检疫和流行病学调查. 相似文献
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应用单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELI-SA)的单抗第二抗体夹心法(单抗二抗法),检测人工感染弓形体病兔血清特异性免疫复合物(CIC),并与多抗(PcAb)第二抗体夹心法(多抗二抗法)及间接法进行比较.其结果显示:1.应用单抗二抗法检测感染弓形体后第4天,兔血清 CIC 阳性率为38%,至第6天阳性率达95.2%.显示了高度敏感性。2.单抗二抗法与多抗二抗法相比.在1～60天 CIC 的累积阳性率、OD 均值,前者均高于后者(P<0.01).有显著差异.3.交叉反应:与血吸虫病,本法为4.8%,间接法为21.4%;球虫病,本法为0%,间接法为12.1%. 相似文献
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用自制的猪囊尾蚴头节“颗粒性抗原”,以HRP—SPA作为第二抗体,进行间接免疫酶染色诊断猪囊尾蚴病。检测61份猪囊尾蚴病血清,阳性59份,检出率为96.6％;健康猪血清69份、细颈囊尾蚴病和肺丝虫病猪血清各10份,均为阴性。此法简便易行,快速、准确,适于基层使用。 相似文献
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应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体的技术已经得到了发展。我们用ELISA方法检测从无IBR病毒牛群中采集的304份血清,其特异性为100%;检测经鼻内疫苗接种免疫后采集的62份牛血清,其诊断敏感性在免疫后第一个月为27.4%,第六个月为100%,检测标准血清中和抗体滴度≥1:2的303份牛血清,其敏感性为100%;463份随意诊断样品经比较试验证明ELISA检出血清阳性牛(61.6%)比标准血清中和试验(49.9%)要高。因此,我们认为ELISA具有技术上的优越性,可以作为一种常规诊断试验来检测牛血清中IBR病毒抗体。 相似文献
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对IHA、IFA及ELISA三种方法检测弓形体抗体作了比较。感染兔血清首次检出抗体时间及阳性兔数:IHA为感染后第5天(1/15)、IFA为第6天(1/15)、ELISA为第4天(8/15);达全阳性时间分别为感染后第13、15及6天,GMT分别为4693、1301及8192。对照兔血清的假阳性率均为1.42％。三法检测猪血清的阳性率分别为42.0、41.0及44.0％。结果表明,三法均具有高度的敏感性和较高的特异性,其中以ELISA法最为灵敏,IHA法操作简便,两法均适用于现场血清学调查。 相似文献
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胶体染料试纸条法快速诊断家畜血吸虫病的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清83份,其结果为阳性检出率100%,健康牛、猪血清73份的检测结果为阴性符合率分别为95.3%和94.0%,与感染肝片形吸虫的牛、羊血清16份的交叉反应率为18.8%.表明本方法敏感性高,特异性较强. 相似文献
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Dot—ELISA检测猪血清中伪狂犬病病毒抗体方法的建立和评价 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了检测猪血清中伪狂犬病病毒(PRV)特异抗体的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),并通过对人工感染和自然感染猪血清以及野外试验猪血清的检测与微量血清中和试验(MSN)作了比较。结果表明, Dot-ELISA具有特异性和敏感性,能检测出猪血清中PRV特异性抗体,与MSN检出符合率在95％以上。经统计分析,差异不显著(P>0.05)。Dot-ELISA可检出早期感染猪血清中PRV抗体,可应用于猪伪狂犬病的临床实验诊断。 相似文献
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乙脑病毒非结构蛋白NS1的原核表达及重组蛋白间接ELISA方法的初步建立 总被引：1，自引：0，他引：1
克隆表达乙脑病毒非结构蛋白NS1,并以其作为包被抗原,建立间接ELISA诊断方法。用此方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒(PCV)阳性血清各3份,以及33份健康非免疫仔猪血清和205份乙型脑炎灭活疫苗免疫的猪血清,评价NS1-ELISA方法的特异性。取54份乙脑病毒感染的猪血清进行NS1-ELISA检测,评价该方法的敏感性。NS1-ELISA检测的特异性为95%,敏感性达90.7%。与商品化试剂盒比较,其符合率达到96.0%。在重复性试验中,NS1-ELISA检测方法重复性较好。本试验为进一步研究不同感染时期NS1抗体水平的差异奠定基础。 相似文献
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应用仔猪副伤寒琼扩抗原，对副伤寒高兔猪进行检测，第一次注射后第５天３／３阳转，抗体持续３４－７２天；对副伤寒弱毒苗免疫猪进行琼扩检测，于注苗后７天９／１１阳转，１４天１１／１１阳转，抗体持续７－４０天，该法与猪布氏杆菌病、猪巴氏杆菌病、猪丹毒、猪弓形体病、猪瘟、猪密蠓旋体病、猪链球菌病均无交叉反应。用本法检测１２８８份现地血清，阳性率３．２６％，试验肜该法监测仔猪副伤寒特异性强，操作简便、快速、具 相似文献
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采用毕赤酵母表达的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白免疫BALB/c小鼠，经间接免疫荧光(IFA)筛选，获得了17株特异性单抗。经病毒中和试验(VNT)验证，上述单抗均具有CSFV中和活性，其中单克隆抗体3H9的病毒中和效价最高，大于1∶10 240。采用HRP标记的CSFV单抗3H9为阻断抗体，配合酵母表达的CSFV E2蛋白作为包被抗原，建立了一种用于检测猪血清中CSFV中和抗体的阻断ELISA方法。该方法优化后的抗原包被浓度为0.5μg/mL,阻断抗体稀释度为1∶8 000。通过对100份阴性猪血清的检测，确定该方法的阻断率cut-off值为30%。该方法敏感性高，对中和抗体效价低至1∶16的血清检测仍呈阳性；特异性强，仅与CSFV抗体阳性猪血清呈阳性反应，与其他猪病病毒及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体阳性猪血清均呈阴性反应；良好的可重复性，批内、批间变异系数分别为0.90%～3.21%、1.89%～6.57%,均小于10%。对188份现有猪血清检测结果显示，该方法与病毒中和试验和IDEXX猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合率分别为96.3%、94.7%。用该方法对南京市浦口区某养殖场... 相似文献
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《中国兽医学报》2014,(10):1584-1588
为了进一步提高对猪圆环病毒2型(PCV2)检测的特异性,利用PCV2Cap蛋白及酶标记Cap单克隆抗体,建立了一种检测猪血清中PCV2Cap蛋白抗体的阻断ELISA方法,并将其组装成试剂盒。对阻断ELISA试剂盒进行了敏感性、特异性、重复性、符合率和保存期测定。结果显示,其敏感性高,特异性强,批内批间重复性好,与商品化试剂盒符合率高,保存期长且性质相对稳定。先后制备了5个批次的阻断ELISA试剂盒,用于检测PCV2不同疫苗免疫猪血清、规模猪场PMWS发病猪及同群健康猪血清、不同日龄猪群血清.结果显示,PCV2油佐剂免疫组血清抗体水平相对较高,PWMS发病猪血清抗体水平高于同群健康猪,猪群中育肥猪血清抗体水平最高。 相似文献
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以旋毛虫肌幼虫层析抗原及国产 BA 试剂建立了快速检验旋毛虫病的 BA-Dot-ELISA。本法采用全血、眼观判定.应用预先制成快诊膜,可在1小时内报告检验结果.BA-Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(人工感染后第4天)早于 Dot-ELISA(感染后第7天)和PPA-ELISA(感染后第10天)、与猪囊虫、猪弓形体、猪瘟不发生交叉反应.初步证实了本法具有简、快、敏、特等优点,有助于低水平血清抗体旋毛虫病猪的检测,尤其适合于早期诊断,宰前检查和流行病学调查. 相似文献
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Dot-PAA-ELISA快速检测猪丹毒抗体方法的建立与应用 总被引：3，自引：0，他引：3
以猪丹毒CD3004(1a型)和C43-12(2型)菌株为抗原提取菌株,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原,建立了Dot-PAA-ELISA检测猪丹毒血清抗体方法,经研究确定了Dot-PAA-ELISA的最佳工作条件.试验制备的诊断膜片特异性强,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、猪大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应;灵敏度高,能够最低检出猪血清中含2.61 × 10-9g的猪IgG抗体;膜片保存期长,在室温可保存4个月,4℃可保存7个月其检测活性不变.用该方法检测了仔猪免疫后抗体变化,并通过猪丹毒三型混合强毒攻毒试验确定了猪能抗强毒攻击的抗体临界保护值为1:32.对336份血清进行猪丹毒抗体检测,阳性检出率为96.13%.试验结果表明,本试验方法操作简便、快速准确、结果可存档、重复性和稳定性好,所用试剂材料均可做到标准化,适合基层检疫单位和养猪企业用于猪群免疫监测和猪丹毒流行病学调查. 相似文献
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用本试验建立的抗鸡病毒性关节炎(AVA)抗体的间接 ELISA 方法检测了实验感染 AVA 病毒(AVAV)的鸡血清、自然感染鸡血清及 IBD,ND 和 MD 病鸡血清,证明其具有较高特异性.通过对鸡实验感染 AVAV 后不同时期的检测表明.间接 ELISA 可在感染后6天检出血清特异性抗体,且不同时期检出率均高于 AGID 法,并可在2小时内报告试验结果.适用于 AVAV 抗体的常规检测.用该法对来自南京、海宁、长春等地鸡场的162份血清进行检测,阳性率为10.5%. 相似文献