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相似文献
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1.
用4种兔粘液瘤琼抗原,测定了琼扩试验的最佳条件,结果表明,以pH7.4TNE缓冲液,0.4cm孔距为最佳,抗原应少量分装,冷冻保存,室温融化使用。经阳性血清干粉吸收试验,琼扩抑制试验,混合血交叉试验,表明琼扩试验是特异的,与禽痘病毒,兔病毒性出血症阳性血清不出现交叉反应。  相似文献   

2.
鸡病毒性关节炎免疫扩散试验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用Vero细胞、成纤维细胞制备琼扩抗原,系统规定了鸡病毒性关节炎琼扩试验所需的最佳缓冲液,琼脂糖浓度、孔径、孔距、抗原保存条件。结果表明以pH8.1、0.06M巴比妥钠-HCl缓冲液,1%琼脂糖,孔径和孔距均为3mm,效果最佳。抗原少量分装-20℃保存,避免反复冻融。特异性试验表明,与其他相关病阳性血清均不产生交叉反应。  相似文献   

3.
绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)感染山羊后可生产琼扩抗体.用OPP抗体阳性山羊的肺脏、肝脏分离物在绵羊胎肺细胞上连续培养传代,可出现以多核巨细胞为特征的细胞病变.用其培养物制备的琼扩抗原与抗OPPV标准阳性血清呈阳性反应,与抗马传贫病毒、牛白血病病毒标准阳性血清无交叉反应.电镜观察。病毒粒子大多散在细胞外及胞浆空胞中,以出芽方式增殖,病毒呈球多,直径80~120nm.用OPPV感染山羊的肝脏分离培养物复归山羊,2个月后4只山羊琼扩抗体全部阳转.  相似文献   

4.
以禽呼肠病毒S1133毒株尿囊腔接种10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚,无菌收集24 h~120 h的死胚尿囊液,加1 mL/L的甲醛灭活,浓缩制得琼扩抗原;用该抗原制成灭活苗两次免疫SPF鸡,无菌采血分离制备阳性血清;选用SPF鸡无菌采血分离制备阴性血清.经过效价测定制备16单位琼扩抗原,8单位阳性血清;取免后的SPF鸡血样4个20~2-5稀释分别与1单位~8单位琼扩抗原做琼扩试验,确定了应该用4单位或8单位琼扩抗原做工作抗原;并以血清中和试验为参照证明琼扩试验在血清抗体监测中的可行性.本研究成功制备了禽呼肠病毒琼扩抗原与血清,为用琼扩试验定量检测禽呼肠病毒感染禽和疫苗免疫禽的抗体奠定了基础.  相似文献   

5.
鸡马立克氏病(MD)琼脂扩散试验(琼扩)抗原大多数都是含羽髓的羽毛经浸提挤压制成。为探讨更简便的方法,我们将MD的病、死鸡皮肤打碎,离心制成MD琼扩抗原,取得满意效果,现报告如下。1 材料和方法1.1 抗原和血清:MD琼扩抗原和阳性血清、  相似文献   

6.
以醋酸纤维素膜作为固相载体,辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体(IBD—IgG),饱和二氨基联苯胺为底物显色,建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为:IgG的包被液为0.05mol/L(pH9.6)碳酸盐缓冲液,包被浓度为1:50;酶标抗体的工作浓度为1:100;洗涤液为含0.05%吐温—80的0.02mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液;封闭液为含0.2%明胶的洗涤液;封闭时间、抗原及酶标抗体的作用时间均为37℃30min。应用本方法和琼扩试验同步检测20份已知阳性病料、120份待检病料和胚毒尿囊液、10份正常鸡样品,结果表明,Dot—ELISA阳性率为90%,而琼扩试验为40%;凡琼扩试验阳性者,Dot—ELISA均呈强阳性,而在Dot—ELISA阳性样品中,只有44%呈琼扩试验阳性,Dot—ELISA的敏感度为琼扩试验的100倍。  相似文献   

7.
用小鹅病毒浓缩乳化抗原,皮内多点注射分3次免疫水牛,可获得琼扩抗体为1:6-1:64的抗小鹅瘟高免血清,此血清具有良好的预防效果和较高疗效,在疫区注射1-5日龄雏鹅预防小鹅瘟,可提高雏鹅成活率36.4%;治疗发病雏鹅,治愈率达88.7%。乳化抗原以首免后血清琼扩抗体效价高低而定,抗体高加倍剂量大,低则加倍剂量小。同时测得水牛三免后13-16天血清琼扩抗体开始达高峰。血清达高峰后,至少可以持续16天  相似文献   

8.
本试验以纯化的重组马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区蛋白作为诊断抗原建立了间接ELISA诊断方法,确定其最佳工作条件为每孔包被重组抗原2仙g,兔抗马IgG酶标抗体以1:4000,血清以1:40倍稀释,底物作用时间为10 min;判定标准为P/N值大于2,且OD值大于0.2的血清为阳性,否则判为阴性。本试验所建立的诊断方法与琼扩试验以及以琼扩抗原作为包被抗原的ELISA试验进行了比较,表明该诊断方法敏感性更高。特异性和重复性试验表明该诊断方法具有良好的特异性和重复性。通过对4匹马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马血清抗体的检测,发现均在接种2周后可产生抗马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区相应抗体。此抗体一直持续存在到本试验检测的免疫后17个月,且效价较高。,用此方法检测203份马血清样品,其中161份呈抗体阳性,还检测了马传贫自然感染马血清93份,结果全部为阳性。  相似文献   

9.
在内蒙古牙克石市图里河镇非马传贫注苗区,用琼脂扩散试验(ID)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法对64匹马进行了对比检查,检出ID、ELISA双阳性4匹、DLISA单阳性马3匹。对3匹ID阴性,ELISA阳性马血清用不同浓度琼扩抗原重复检测结果为阴性,而用不同批次的ELISA抗原包被板及酶标抗体检测结果均为陧阳性,用马传盆病毒抗原对3匹单阳性马血清中和后,再进行ELISA测定,OD值均降低5  相似文献   

10.
绵羊进行性肺炎病对山羊的感染试验   总被引:5,自引:1,他引:4  
绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)感染山羊可生产琼扩抗体,用OPP抗体阳性山羊的肺脏、肝脏分离物在绵羊胎肺细胞上连续培养传代。可出现以多核巨细胞为特征为细胞病变。用其培养物制备的琼扩抗原与抗OPPV标准阳性血清呈阳性反应,与抗马传贫病毒、牛白血病病毒标准阳性血清无交叉反应,电镜观察,病毒粒子大多散在细胞外及胞浆空胞中,以出芽方式增殖,病毒呈球多,直径80~120nm,用OPPV感染山羊的肝脏分离培养物  相似文献   

11.
本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验(AGIDT)和免疫印迹试验(IBA)对实验感染绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)的山羊血清与山羊关节炎—脑炎病毒(CAEV)抗原以及实验感染CAEV的绵羊血清与OPPV抗原的交叉反应进行了研究。4只接种OPPV的山羊中有一只山羊的血清可与CAEV琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别CAEV的gp44、p35和p28。2只接种CAEV的绵羊中有一只绵羊的血清可与OPPV琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别OPPV的gp44和p28。以上的交叉反应结果表明OPPV与CAEV的抗原之间具有密切的相关性,这对于OPPV通过山羊和CAEV通过绵羊的传代研究是非常重要的,并对将来的免疫预防策略具有重要的指导意义。  相似文献   

12.
用19只绵羊(注苗前BTV琼扩和ELISA均为阴性)注射BTV灭活苗后7~139天的血清进行BTVELISA和琼扩平行试验,结果表明,注苗后7~30天11只试验丰ELISA阳性,注苗40天13只羊ELISA阳性,注苗90天以后全部试验羊只均为ELISA阳性,而琼扩试验则始终为阴性结果。  相似文献   

13.
禽流感病毒重组核蛋白在琼扩诊断中的应用   总被引:6,自引:0,他引:6  
利用杆状病毒表达禽流感病毒型特异性抗原-核蛋白,并就重组核蛋白作为禽流感琼扩诊断抗原地特异性和敏感性及作为抗原的其它特性进行了研究,并与普通全病毒琼扩抗原进行了应用比较试验,对354份现地可疑血清样品进行了检测,结果表明:该抗原可以特异性地定性检测出所有15个禽流感病毒亚型的抗血清,与普通全病毒琼扩抗原的检测结果一致,但沉淀线更细密、清晰,保存方便;与我国广泛流行的15种禽类其它病原体的抗血清没有任何交叉反应,表明该重组核蛋白作为禽流感琼扩抗原特异、敏感、生物安全性更可靠和生产成本更低廉,有利于进一步扩大禽流感疫情调查范围和加大监测力度。  相似文献   

14.
随着免疫化学诊断药盒在临床医学上的广泛应用,其药盒中重要试剂之一——第二抗体的需求量不断增加。近年来,多用马和驴等大动物为免疫动物,以限量多次采血法生产大量第二抗体血清。我们在研制出口用马抗羊血清过程中,观察到马抗羊血清与传贫琼扩抗原之间可发生非特异性反应。通过试验,明确了该反应是由传贫琼扩抗原中被浓缩的牛血清同马抗羊血清抗体之间交叉所致的,现报道如下。  相似文献   

15.
鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立   总被引:8,自引:1,他引:7  
为建立快速检测鸭坦布苏病毒(DTV)的血清学方法,本研究利用纯化的DTV奉贤株(FX2010)作为包被抗原,建立了检测DTV血清抗体的间接ELISA方法,并且对各种检测条件进行了优化。优化后确定的抗原最适包被浓度为1.675μg/孔,抗原最佳包被条件为37℃放置2 h后,4℃下过夜,血清的最佳稀释度为1∶200,酶标抗体最适稀释度为1∶2 000。在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.432。用建立的间接ELISA方法对禽流感病毒、新城疫病毒、网状内皮增生病病毒、I型鸭肝炎病毒、呼肠孤病毒、禽白血病病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别为2.9%和3.9%,显示该方法具有很好的稳定性。用间接ELISA方法对140份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,有108份样品呈现阳性,而琼扩试验只有32份呈阳性结果,而且用该方法检测的阳性样品包括了琼扩试验的阳性样品,证明该方法具有较高的敏感性和特异性。本研究快速检测DTV抗体间接ELISA的建立为该病的诊断和流行病学调查提供了新的方法。  相似文献   

16.
鸡传染性支气管炎卵黄和血清抗体检测方法的探讨王招娣,韩庆彦,杨小玲,何虎成,张艳萍(甘肃省兽医技术推广总站)目前,大部分兽医基层单位采用琼脂扩散试验(AGP)检测传染性支气管炎(IB)。AGP需时48小时,敏感性较低。本试验采用IB琼扩抗原及阳性血清...  相似文献   

17.
禽脑脊髓炎琼扩抗原的研制和应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
将禽脑脊髓炎病毒(AEV)陕西分离株接种于6日龄鸡胚卵黄囊,16日龄时收取活胚脑、胃肠道和胰腺,匀浆灭活后制成琼扩抗原,该抗原与AE标准阳性血清在36h内出现特异性的沉淀线,而与ND、EDS-76、AI、IB阳性血清及SPF鸡血清不出现沉淀线,用其检测60份血清,48份呈AE阳性,与用标准抗原检测的结果一致。  相似文献   

18.
本试验Ⅱ报对鸡白痢卵黄平板法和琼扩法的特异性及敏感性与血清平板法和琼扩法进行了比较,本试验对卵黄平板法和琼扩法阳性鸡的各器官鸡白痢沙门氏菌检出情况进行了试验,现将试验结果报告如下。  相似文献   

19.
<正> 鸡马立克氏病(MD),是由B群疱疹病毒所引起的肿瘤性传染病。1985年,笔者对某鸡场有明显临床症状的MD病鸡群,从45日龄开始,分别采用羽囊琼扩检测和血清琼扩检测进行试验,观察了羽囊中沉淀抗原和血清中沉淀抗体的消长规律,得出不同日龄病鸡的最佳  相似文献   

20.
近年来,鸡马立克氏病在我县大面积发生和流行,青县畜牧局分别彩临床检查病理剖检、羽毛囊琼扩和血清琼扩进行诊断。现将结果报告如下:1典型临床病例诊断对50例有明显临床症状(采食减少,消瘦,拉稀,发育不良和/或瘫痪、劈叉)和典型剖检病变(肝、脾、肾、心、肺。肠、卵巢或睾丸)临床诊断为鸡马立克氏病阳性(阳性率100%)的病例,于剖检前分别采集新生羽毛髓和血清,进行羽毛囊琼扩和血清琼扩试验,结果为:羽毛囊琼扩阳性41例,阳性率82%;血清琼扩阳性22例,阳性率44%。结果表明,临床诊断为马立克阳性的鸡,羽…  相似文献   

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