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成都地区宠物犬感染犬瘟热病毒和犬呼吸道冠状病毒的分子流行病学调查 总被引：2，自引：2，他引：0
为了解成都地区宠物犬犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬呼吸道冠状病毒(canine respiratory coronavirus,CRCoV)的感染情况,本试验应用RT-PCR对采自成都地区8家动物医院共计420份出现呼吸道症状的宠物犬鼻腔棉拭子样本进行分子检测。结果发现,从420份样本中,检出213份CDV阳性,检出率为50.71%;检出247份CRCoV阳性,检出率为58.81%;CDV和CRCoV混合感染的检出率为41.19%。表明成都地区宠物犬感染CDV和CRCoV较为严重,且二者混合感染率较高。宠物犬CDV和CRCoV的检出率与年龄、性别、品种、季节和免疫状况等因素的关系存在不同程度的差异。其中,1~3月龄幼犬检出率最高,分别为74.40%和79.20%;纯种犬的检出率较其他犬种高,分别为59.37%和62.22%;春季CDV的检出率较高,为56.19%,而冬季CRCoV的检出率较高,为67.59%;未免疫犬的检出率较高,分别为64.42%和63.46%。该研究丰富了成都地区宠物犬CDV和CRCoV的流行病学资料,为该地区宠物犬CDV和CRCoV的诊断及防控提供了基本数据。 相似文献
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本研究旨在分析犬呼吸道冠状病毒（canine respiratory coronavirus,CRCoV）的感染情况和在北京地区的流行病学状况。采用RT-PCR方法,对自2015年12月—2017年3月于中国农业大学动物医院采集的487份犬咽鼻拭子进行了CRCoV检测,同时,对部分样本进行了犬副流感病毒（canine parainfluenza virus,CPIV）、犬腺病毒II型（canine adenovirus type 2,CAV-2）、犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）等病毒的混合感染情况调查。结果表明：CRCoV的阳性率为21.36%（104/487）;CRCoV与CPIV、CAV-2、CDV的混合感染率分别为3.43%（11/321）,0%（0/156）和3.85%（6/156）。在所有呼吸道症状记录完整的455例样本中,无呼吸道症状的犬CRCoV携带率为27.19%（31/114）;呈轻度呼吸道症状（鼻液、咳嗽）的犬CRCoV感染率为19.73%（59/299）;呈中至重度呼吸道症状（肺炎）的犬CRCoV感染率为14.28%（6/42）。对2016年11月―2017年3月采集的146例样本进行CRCoV与CPIV、CAV-2、CDV混合感染情况调查,CRCoV带毒犬混合感染率为12.50%（1/8）;呈轻度呼吸道症状的CRCoV感染犬混合感染率为41.18%（7/17）;呈中至重度呼吸道症状的CRCoV感染犬混合感染率为100.00%（2/2）。454例不同年龄段犬的CRCoV阳性率为15.56%~22.97%;除7月份CRCoV检出率高外,较冷的冬春季节检出率高于夏秋季节。结果提示：CRCoV的致病力较弱,单一感染犬常表现为无或轻度呼吸道症状,与其他呼吸道病毒（CPIV、CAV-2、CDV）混合感染时多出现轻度或中至重度呼吸道症状。该病毒在冬春季节更易流行;其感染率和年龄无显著关系。 相似文献
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为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型（canine adenovirus type 1,CAV-1）、犬腺病毒2型（canine adenovirus type 2,CAV-2）、犬冠状病毒（canine coronavirus,CCV）、犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）、犬细小病毒（canine parvovirus,CPV） 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2~3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10~100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。 相似文献
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犬传染性支气管炎又称犬窝咳,是由犬支气管败血波氏杆菌(Bb)、犬腺病毒2型(CAV-2)、犬瘟热病毒(CDV)和犬副流感病毒(CPiV)中的一种或几种病原混合感染引起的。为研究Bb在窝咳犬中的阳性检出率和分离株的生物学特性,2006年10月到2008年1月,从南京和北京两地共采集了164份患有窝咳的犬鼻腔拭子,对其进行Bb的分离培养,通过形态学、生化试验、血清学及PCR鉴定,证实最终分离到了16株Bb,分离阳性率为9.8%,药敏试验结果显示16株细菌生物学特性和对多种抗生素敏感性基本相同。此外,对16份Bb阳性病料样品分别进行CAV-2、CDV、CPiV检测,结果表明:由单纯Bb引发犬窝咳病例占19%,与犬瘟热混合感染的机率最高(43%),其次为与CPiV(31%)和CAV-2(25%)混合感染。2种病原混合感染引起窝咳的比率最高,为56%;3种病原混合感染的几率为19%;4种病原混合感染的几率为6%。 相似文献
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犬冠状病毒（canine coronavirus,CCoV）与猫冠状病毒（feline coronavirus,FCoV）同属于冠状病毒科冠状病毒属α属,与其同属的病毒还有猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV）、猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）等。遗传进化分析表明,该种属不同基因型病毒通过基因重组能产生新型变异毒株,为疾病的诊断与防控造成了很大的阻碍。β属冠状病毒包括牛冠状病毒（bovine coronavirus,BCoV）、犬呼吸道冠状病毒（canine respiratory coronavirus,CRCoV）、严重急性呼吸综合征冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV）等,其中CRCoV与BCoV同源性较高,该类病毒与α属冠状病毒在基因组结构、致病机制、感染症状等方面差异较大。CCoV与FCoV在全球范围内广泛传播,具有发病率高、死亡率低的特点。由于RNA病毒本身的特点和环境选择压力的影响,这两种病毒不断变异进化,新的强致病力毒株相继出现。经FCoV基因突变演化而来的猫传染性腹膜炎病毒（feline infectious peritonitis virus,FIPV）毒力大大增强,病毒基因组中某些特异性的点突变使得针对宿主的细胞嗜性发生改变,该病毒的致病机制主要依赖于病毒感染后诱导机体产生的抗体依赖性增强作用（ADE）。针对犬猫冠状病毒的流行病学调查及防控不能仅依赖于疫苗免疫单一因素,还应综合考虑病毒毒力、环境条件、宠物自身免疫抵抗力状态等。针对犬猫冠状病毒的诊断应根据临床症状,结合常规血液学检查、血清生化检查和实验室诊断技术来进行全面的鉴定,防止出现假阳性及假阴性结果。 相似文献
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本研究采集常州地区3家宠物医院106例犬粪便和肛拭子,经胶体金和RT-PCR鉴定共检出45例犬冠状病毒（CCV）阳性病例,阳性检出率达到42.45%。对发病月份以及发病月龄进行统计学分析发现,1-3月龄幼犬属于CCV高发群体,阳性检出率可达44.44%;发病月份主要集中在冬春两季（10月～次年3月）,发病率合计86.67%。感染犬常表现肠道症状,临床主要可见以腹泻为主。未经接种疫苗或者疫苗接种程序不完全的犬感染CCV概率远高于接种完成的犬。调查结果表明,常州地区宠物犬对犬冠状病毒病的感染率较高,需引起足够的重视。 相似文献
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《当代畜牧》2021,(2)
为了解新疆城市宠物犬肠道寄生虫感染情况,笔者采用饱和蔗糖溶液漂浮法对新疆5个城市的477份宠物犬粪便样本进行了检查。结果显示,113份样品呈肠道寄生虫虫卵/卵囊阳性,总感染率为23.7%。共检出7种(类)寄生虫虫卵或卵囊,以球虫为优势感染虫种,感染率为13.8%;蛔虫感染率次之,为9.2%;隐孢子虫,圆线虫,钩虫,鞭虫及带科绦虫感染率分别为0.6%、2.7%、0.4%、0.2%和0.2%。在宠物店内饲养犬的肠道寄生虫感染率较高,为33.2%;宠物医院及犬舍内宠物犬的肠道寄生虫感染率分别为14.7%和8.5%。雄犬感染率(26.0%)高于雌犬感染率(21.7%);6月龄以下,7～12月龄,1岁以上宠物犬的感染率分别为30.9%、20.5%和3.8%,随年龄增长呈递减趋势。调查结果表明,应进一步加强宠物犬肠道寄生虫的驱除工作和公共卫生知识宣传。 相似文献
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Abstract AIM: To determine whether canine respiratory coronavirus (CRCoV) and canine influenza virus (CIV) are present in dogs in New Zealand. METHODS: Serum samples from 251 dogs of varying age, breed and clinical histories were tested for the presence of antibodies to CRCoV and CIV, using indirect fluorescent antibody (IFA) analysis. The population sampled represented a wide geographic area but principally encompassed the central and lower North Island of New Zealand. RESULTS: Seventy-three of the 251 samples (29%) were seropositive for CRCoV. Dogs <2 years old were less likely to be seropositive for CRCoV than older dogs. None was seropositive for CIV. CONCLUSIONS: This study revealed the presence of antibodies to CRCoV in dogs in New Zealand. Young dogs are less likely to be seropositive than older dogs, probably due to increased opportunity for exposure to CRCoV over time. Serum antibodies to CIV were not detected in any of the dogs sampled, suggesting that this virus is unlikely to be present in dogs in New Zealand. CLINICAL RELEVENCE: Canine respiratory coronavirus is present in New Zealand. Although the role of this virus in canine infectious tracheobronchitis has not been fully elucidated, evidence suggests that it may have a causal role in this disease. Veterinarians should consider CRCoV as a differential diagnosis in cases of respiratory disease in dogs in New Zealand. While CIV appears not to be currently present in New Zealand, veterinarians should consider infection with this virus as a differential diagnosis in dogs presenting with respiratory signs. 相似文献
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犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬科烈性传染病,给患病动物带来重大危害。本研究基于犬瘟热病毒的NP蛋白基因设计特异性引物,利用RT-PCR获得287 bp目的片段,经TA克隆并测序。结果表明,该片段与NCBI上公布的犬瘟热病毒NP序列(登录号:EU716322)同源性达到98%。利用该特异性的RT-PCR方法,检测杭州市及周边部分地区犬瘟热的流行情况,结果表明,整个杭州及周边地区犬瘟热病毒总阳性检出率为6.7%,杭州城区阳性个体数最多,阳性率最高达到18.8%,其他地方(临安、台州、舟山)阳性率较低。该研究为犬瘟热的综合防制提供基础数据。 相似文献
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ZHAO Xueli LIU Yi BAN Fuguo YAN Ruoqian WANG Huajun WANG Shujuan MA Zhenyuan WANG Dongfang 《中国畜牧兽医》2018,45(8):2086-2094
This study was aimed to establish a double TaqMan MGB Real-time PCR assay to simultaneously and specifically detect canine distemper virus (CDV) and canine parvovirus (CPV) in one reaction.Two pairs of specific primers for CDV and CPV,along with two TaqMan MGB probes for each virus were designed in the assay basing on CDV H gene and CPV VP2 gene sequences.The specificity,sensitivity and repetition of the double TaqMan MGB Real-time PCR assay were tested,and 48 samples taken from clinic suspicious CDV and CPV infected canines had been testified by the established double TaqMan MGB Real-time PCR.The results indicated that the doulde TaqMan MGB Real-time PCR assay was successfully established,and the number of standard curve correlation (R2) of CDV and CPV were 0.997 and 0.993,respectively.The specificity of the double TaqMan MGB Real-time PCR assay revealed that amplifications were showed on CDV and CPV samples,but other pathogens and negative controls had no amplifications;The sensitivity of CDV and CPV were both 10 copies/μL.Meanwhile,14 CDV positive samples,19 CPV positive samples and 4 CDV/CPV double positive samples were detected,which were consistent with the results of the sequencing.Therefore,the established double TaqMan MGB Real-time PCR assay had high sensitivity,specificity and flux accurate quantitative,which could be applied to clinical CDV/CPV infection each periods. 相似文献
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为建立可以同时检测犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)的双重PCR方法,本研究根据GenBank登录的CDV N蛋白序列和CPV NS基因保守序列,设计合成2对特异性引物。通过优化反应条件,对CDV阳性病毒株反转录后的cDNA模板和CPV的DNA模板进行双重PCR扩增,同时得到2条与试验设计相符的669 bp(CDV)和392 bp(CPV)特异性条带,建立了同时检测CDV和CPV的双重PCR方法。实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测这2种病毒,而对犬腺病毒Ⅰ型、犬腺病毒Ⅱ型、狂犬病毒检测均为阴性;CDV和CPV的最低检出限分别为101.8TCID50和101.4TCID50。采用该方法对在黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为30%;CPV阳性率为23.33%,表明建立的PCR方法可以用于临床诊断。 相似文献
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犬瘟热是一种接触性传染病,可侵害免疫系统、呼吸系统、消化系统,甚至神经系统,导致全身性的病理变化,对宠物犬、毛皮动物等存在巨大威胁。目前常用的胶体金检测法不能有效区分疫苗免疫与动物自然感染。为建立一种高效准确的鉴别犬瘟热病毒野毒株和疫苗株的检测方法,本试验对从武汉地区收集已确诊犬瘟热的6只犬分离得到的野毒株以及3株广泛使用的CDV疫苗株进行全基因组测序,从氨基酸水平和碱基水平比对分析后,确定H基因为AS-PCR引物设计的靶基因。通过对H基因进行分型,发现武汉地区流行的CDV均为Asia-Ⅰ型,而疫苗株Y2为America-I型,疫苗株Y1和Y3均为America-Ⅱ型。对比179株Asia-Ⅰ型（6株野毒株样品+173株GenBank Asia-Ⅰ型）与3株疫苗株的CDV-H基因序列,采用AS-PCR技术（3'端错配）设计出1对能有效区分犬瘟热Asia-Ⅰ型野毒株和疫苗株的特异性引物,上游引物序列为5'-TTAAATGATAATGACATAGTG-3',下游引物序列为5'-CCTGGCAAGGCAAGA-3'。结果显示该引物有较强的特异性,6株样品野毒株均可扩增出长894 bp的片段,疫苗株不能扩增,且野毒株的H基因上存在9个较为规律的碱基（氨基酸）变异位点,而疫苗株在第277位氨基酸上均为天冬酰胺,这些变异可能导致N-糖基化位点的增加,从而对犬瘟热病毒疫苗株的毒力产生影响。本研究建立的AS-PCR方法能有效区分犬瘟热疫苗和Asia-Ⅰ型野毒株。 相似文献
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Canine distemper (CD) is a contagious disease, which can damage the immune system, respiratory system, digestive system, and even nervous system, leading to systemic pathological changes, and has a huge threat to pet dogs, fur animals, etc. At present, the commonly used colloidal gold test cannot effectively distinguish vaccine immunity from animal natural infection. To establish an efficient and accurate detection method for identifying wild strains and vaccine strains of canine distemper virus(CDV), the whole genome of six canine distemper wild strains isolated from dogs and three widely used CDV vaccine strains collected from Wuhan area were sequenced. After comparing and analyzing the amino acid and the base sequences, the H gene was determined as the target gene for AS-PCR primer design. By genotyping the H gene, it was found that the prevalent CDVs in Wuhan were all Asia-Ⅰ, while the vaccine strain Y2 was America-I, and the vaccine strains Y1 and Y3 were both America-Ⅱ. Comparing the CDV-H gene sequences of 179 Asia-Ⅰtypes (6 wild-type strain samples + 173 GenBank Asia-Ⅰtype stains) and 3 vaccine strains, using AS-PCR technology (3'mismatch) to design a pair of primers. It can effectively distinguish CDV Asia-I wild strain and vaccine strain. The upstream primer sequence is 5'-TTAATATAATAATGACAGTG-3', and the downstream primer sequence is 5'-CCTCAAGGGGCACA-3'. The results showed that the primer had a strong specificity and the wild strains could amplify an 894 bp fragment, while the vaccine strains could not. There are 9 more regular bases (amino acids) variation sites in H gene of wild strain, and the 277th amino acids of all vaccine strains are Asparagine. These mutations may lead to an increase in N-glycosylation sites, which will have an impact on the virulence of canine distemper virus vaccine strains. The AS-PCR method established in this study can effectively distinguish the canine distemper vaccine and Asia-Ⅰwild strains. 相似文献