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在研制猪细小病毒灭活疫苗时,应用了超滤浓缩技术,提高了合毒细胞培养液中的抗原含量。为了保证浓缩的流量,减少对滤膜的污染,对含毒细胞培养液作了预处理一离心及微滤,以便除去细胞培养液中的细胞碎片、蛋白质等大分子物质及固形微粒。超滤时选用50000Da滤膜,在20psig压力下,经过5倍浓缩的PPV细胞培养液,血凝滴度提高2个滴度以上。病毒含量测定表明,TCID50／0．2mL由107左右升至109以上,以其配制疫苗,能显著地提高疫苗的免疫原性。超滤技术具有易于操作、高效、分离精度高、没有二次污染等优点,可以根据需要选择不同的浓缩浓度,对保证疫苗的质量具有重要作用。 相似文献
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为了研究纯化浓缩的猪细小病毒灭活疫苗的免疫效果,应用微滤/超滤管式陶瓷膜分离系统对猪细小病毒细胞收获液进行纯化浓缩,使浓缩液病毒平均含量由10~(4.7)TCID_(50)/mL提高到10~(6.5)TCID_(50)/mL;将纯化浓缩的病毒液经检验合格后,进行甲醛灭活,与注射用矿物白油佐剂制成油包水灭活疫苗;按照猪细小病毒灭活疫苗的质量标准,对制备的灭活疫苗进行检验与免疫效果试验。结果显示:纯化浓缩的猪细小病毒液杂蛋白去除率平均达到71.6%左右;制备的三组灭活疫苗检验均合格;免疫至63 d时,免疫猪体内抗猪细小病毒抗体(HI)水平分别为:纯化浓缩的灭活疫苗平均高达9.62 log_2稀释倍数,常规疫苗平均为8.78log_2稀释倍数,差异显著(P0.05)。试验表明:疫苗病毒细胞收获液进行膜纯化技术处理后,免疫效果显著优于未经纯化的常规灭活疫苗。 相似文献
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为进一步研究浓缩纯化后的高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)疫苗的效果,本研究使用一组不同孔径的滤器,将HP-PRRSV培养液(107.5 TCID50/mL)过滤除去杂蛋白、超滤浓缩、除菌处理得到纯化浓缩的HP-PRRS疫苗,对其进行杂蛋白去除率检验、内毒素检验、无菌检验、病毒含量测定;并将检验合格的纯化浓缩及未纯化浓缩的HP-PRRS疫苗溶液分别添加保护剂冻干后制成冻干疫苗,将两种疫苗进行免疫对比.结果表明:经10倍纯化浓缩的HP-PRRS疫苗杂蛋白去除率在90％以上,病毒含量增加8.5倍,内毒素含量降低3倍;并且将纯化浓缩后疫苗样品免疫猪体后,PRRSV特异性抗体增长幅度比未纯化的疫苗显著,免疫过程中接种猪的副反应明显减小,该研究为兽用疫苗的浓缩纯化提供一定的参考. 相似文献
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采用Filtron中型盒式超滤系统，对新城疫病毒（NDV）抗原液和NDV与传染性支气管炎病毒（IBV）混合抗原液进行浓缩试验，结果显示，浓缩抗原液的HA效价按浓缩比率成倍上升，而超滤液的HA为阴性，以浓缩抗原液，未浓缩抗原液及超滤液为水相，分别制成NDV浓缩油苗，NDV未浓缩油苗，四联浓缩苗，四联未浓缩油革以及超滤液乳剂，分别对久．鸡免疫后，NDV浓缩苗与未膛缩苗免疫鸡均产生了对NDV强毒攻击的抵抗力，保护率达100％，而NDV浓缩苗诱导产生的HI抗体效价明显高于未浓缩苗；比较浓缩四联苗与未浓缩四联苗的免疫效力，当2种疫苗注射剂量不同而抗原量相同时，诱导产生的免疫效力相同；浓缩苗与未浓缩苗效价测定及超滤液乳剂免疫试验结果证实，浓缩过程中既无有效抗原丢失，也无抗原活性变化，试验结果显示，该设备浓缩工艺简单，抗原回收率达100％，是一种理想的病毒浓缩齐备。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病细胞毒的浓缩粗提 总被引：4，自引：0，他引：4
应用聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）沉淀法浓缩粗提鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞毒,经毒价和紫外光ＯＤ值测定,浓缩病毒的毒价较浓缩前平均提高１个滴度;浓缩液中病毒含量及纯度是浓缩前的６倍以上。浓缩病毒与ＩＢＤ阳性血清和ＩＢＤ高免卵黄抗体ＩｇＹ琼扩反应呈弱阳性。加氯仿离心去除细胞杂蛋白后用ＰＥＧ沉淀ＩＢＤＶ细胞毒的方法,简便可行。 相似文献
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口蹄疫疫苗效检模型动物测毒及口蹄疫种毒冻干试验 总被引：4，自引：0，他引：4
应用豚鼠作为口蹄疫疫苗效检模型动物检测口蹄疫病毒对模型动物的病原性.用体重400 g左右的豚鼠,将猪O型口蹄疫灭活疫苗效检攻毒毒株ORMF8经后肢蹠部皮内注射途径进行测毒.测毒结果表明,口蹄疫病毒可引起豚鼠出现典型发病,并产生明显病变,ORMF8种毒对豚鼠的毒价可达105.5ID50/0.2 mL.将乳鼠中和试验用种毒OMⅡ按一定比例加入5%蔗糖脱脂牛奶稳定剂进行冷冻真空干燥试验,3次冻干试验结果表明,种毒冻干后病毒含量有一定程度的下降,但下降程度不显著. 相似文献
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以海塞克斯蛋鸡为试验对象,通过检测蛋鸡血清和肾脏线粒体自由基代谢的变化,研究肾型IBV感染对青年蛋鸡血清和肾脏线粒体自由基代谢的影响。挑选31日龄海塞克斯蛋鸡200羽,随机分成4组,每组50羽。病毒组按鸡胚半数致死量的测定结果（10-5/0.2mL）人工滴鼻攻毒。病毒1组、病毒2组、病毒3组分别接种滴度为10-4/0.2mL、10-5/0.2mL、10-6/0.2mL病毒尿囊液,对照组接种灭菌生理盐水,每羽均为0.2mL,试验期31d。于试验第17、24、31天,每组随机选取试验鸡10羽,分离血清和肾脏线粒体,检测自由基代谢变化。结果显示,肾型IBV感染可导致青年蛋鸡肾脏肿大、血清及肾脏线粒体中T-AOC、SOD活性下降和XOD活性、MDA含量升高,并且随着接种病毒尿囊液滴度剂量的升高这种变化趋势更加明显。结果表明,肾型IBV感染可导致青年蛋鸡血清及肾线粒体的自由基生成增多及抗氧化功能的下降。 相似文献
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用中国农科院兰州兽医研究所统一提供的猪口蹄疫O型灭活疫苗效检攻毒用种毒ORMF8,在3个企业同时用架子猪进行测毒,分别测得猪的最小感染量(MID)和猪的半数感染量(ID 50).3家单位测得的MID和ID 50分别为10 -6.0 /2 mL,10 -8.2 /2 mL;10 -7.0 /2 mL,10 -7.0 /2 mL;10 -6.0 /2 mL,10 -7.5 /2 mL.将所有实验动物统计计算,MID约为10 -6.3 /2 mL,ID 50约为10 -7.6 /2 mL.从这些数据得出,该试验1 MID约为20 ID 50. 相似文献
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Tim E Carpenter Mark C Thurmond Thomas W Bates 《Journal of veterinary diagnostic investigation》2004,16(1):11-16
Intraherd transmission of foot and mouth disease virus (FMDV) was examined using a simulation model for a hypothetical 1,000-cow dairy, assuming clinical diagnosis was made when at least 1% (10 cows) or 5% (50 cows) had clinical signs of FMD, I index case cow, and transition state distributions for the latent, subclinically infectious, and clinically infectious periods of FMD calculated from published data. Estimates assumed for the number of animal-to-animal contacts (k) adequate for transmission ranged from 0.6 to 9.0 per hour (13.7-216.0 per day). A total of 40,000 iterations (5,000 for each scenario, assessing 4 adequate contact rates and 2 detection criteria) were run. The model predicted that FMD would not be diagnosed in the herd until 10.0-13.5 days after the index case cow had become infected, at which time between 65% and 97% of the cows (646-967 cows) to nearly 100% (978-996 cows) would already have become infected with the virus, if the number of cows showing clinical signs of FMD at the time of diagnosis were 10 or 50, respectively. At the time of diagnosis, the simulated number of infectious cattle varied substantially from 82-472 to 476-537 cows, depending on adequate contact rate and whether the diagnosis was made when 10 or 50 animals were showing clinical signs, respectively. The simulated number of infectious cows increased rapidly during the first few days after diagnosis. In the scenario where at least 10 cows showing clinical signs was necessary before a clinical diagnosis was made, each day after diagnosis, the number of infectious animals increased by nearly 100 to more than 200 cases per day up to day 5, assuming 0.57-9.0 animal-to-animal contacts per hour, respectively. Results obtained when it was assumed that at least 50 clinical cases were present at the time of diagnosis showed smaller relative increases because nearly one-half of the herd was projected to be infected at the time of diagnosis. From these results, it is clear that once an individual in a herd becomes infected with FMDV, herd infectivity is not static, rather it accelerates as would be expected as long as there are sufficient susceptible animals to sustain the increasing transmission rate, after which time the rate at which new infections occurs will diminish. Results indicate that biosecurity strategies aimed at minimizing both intraherd and interherd contact will be critical in minimizing the spread of FMD before the initial diagnosis is made. In addition, simulations suggest that very early clinical diagnosis of FMD and effective isolation or depopulation and disposal will be critical in limiting the number of infectious animals capable of transmitting the virus to other herds and thus in timely control of an epidemic. Early diagnosis will rely on early virus detection from animals in the preclinical phase of infection, rather than waiting for clinical signs to manifest in sufficient numbers to be noticed and to warrant investigation. 相似文献
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猪口蹄疫免疫防御是控制猪口蹄疫疫情的重要手段,免疫水平指标通常用免疫抗体水平判定。对于其细胞免疫水平检测尚缺乏成熟可靠的技术,本试验利用市售ELISpot试剂盒建立猪口蹄疫特异γ干扰素检测方法,刺激物分别采用疫苗全病毒颗粒（O/Mya98/XJ/2010）、口蹄疫病毒T细胞表位多肽池,以植物血凝素（PHA）为阳性对照,对细胞浓度、刺激物浓度、孵育时间等进行优化。优化条件为：外周血PBMC新鲜提取或冻存细胞成活率90%以上,最佳细胞数为2×105个/孔,最佳反应时间是16 h,病毒粒子146 S含量为100 ng/mL,多肽最佳浓度10 μg/mL,PHA的最佳浓度是20 μg/mL。ELISpot技术检测口蹄疫病毒感染猪γ干扰素方法的建立,为口蹄疫免疫力评价及口蹄疫疫苗免疫效果评估及进一步研究其与疫苗保护力（PD50）的相关性奠定基础。 相似文献
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本研究通过神经瘤细胞（NA）培养CVS-11株狂犬病病毒,并测定不同批次的病毒毒价,为优化狂犬病疫苗的生产工艺提供数据支持,具有实际意义。病毒培养和检测结果表明,第1次和第2次收获的病毒液病毒含量较高,在107.0FFU/0.1 mL以上,毒力为106.4～107.0LD50/0.03 mL;而第3次收获的病毒含量则较低,只有106.0FFU/0.1 mL左右,毒力为105.0～105.3LD50/0.03 mL。第1次和第2次收获的病毒液可用于制备狂犬疫苗,第3次收获的病毒液因毒价较低不适于制备狂犬疫苗。 相似文献
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脂质体包被鸡IL-18可增强新城疫活疫苗的免疫效果 总被引：1，自引：0，他引：1
首次将重组鸡白细胞介素18(mChIL-18)用脂质体包被,将不同浓度的mChIL-18脂质体联合新城疫疫苗对鸡群进行免疫,观察其对新城疫疫苗的免疫增强作用。1日龄SPF鸡分为6组,分别为空白对照组、单纯疫苗组、新城疫疫苗+0.2mL mChIL-18组、新城疫疫苗+0.1mL mChIL-18组、新城疫疫苗+0.3mL mChIL-18组和新城疫疫苗+空载体对照组。所有免疫组鸡于7日龄免疫,免疫后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用血凝抑制试验和流式细胞仪来检测免疫鸡的HI抗体水平及CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化情况。并于最后一次采血后,对各组试验鸡应用F48E9标准强毒进行攻击(100ELD50.只-1)。结果表明mChIL-18脂质体的最佳剂量为0.2mL.只-1,其不仅能够显著增强机体的细胞免疫和体液免疫,而且还可以明显提高新城疫疫苗的保护率。 相似文献