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本试验以鸡新城疫强毒株,采用大剂量连续强化免疫的方法免疫产卵母鸡,获得了含有高效价抗新城疫抗体的鸡卵。在室温条件下,用硫酸葡聚糖钠沉淀的方法,从免疫鸡卵黄液内提取出高效价的、比较纯净的IgG。以异硫氰酸荧光素标记提纯的卵黄IgG所制成的荧光抗体,对人工感染的鸡胚、鸡只和细胞培养物染色检查的结果表明,卵黄荧光抗体具有特异性强、制备方法简便、成本低廉、保存期长而不改变染色性能等优点。因此,本试验所研创的荧光抗体制备法具有广泛的应用和推广价值。 相似文献
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VP28蛋白鸡源抗WSSV卵黄抗体的制备及性能分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研制鸡源抗对虾白斑综合征病毒（WSSV）卵黄抗体（IgY）,利用WSSV毒株及其衣壳蛋白VP28制备成2种不同的疫苗,并分别免疫接种健康蛋鸡群,使鸡群产生不同的IgY,经病毒中和试验证实,2种IgY均有明显的抗WSSV效果,其中WSSV粗提液1∶1000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY对南美白对虾的保护率为61.7%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为48.3%;而WSSV粗提液1∶10000倍稀释时,WSSV灭活苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为85.0%,重组VP28疫苗免疫蛋鸡产生的IgY保护率为75.0%. 相似文献
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抗大肠杆菌O157鸡卵黄抗体的酶联免疫吸附试验 总被引：1，自引：0，他引：1
以灭活大肠杆菌(E.coli)O157为抗原免疫产蛋鸡获得抗E.coliO157卵黄抗体(IgY),建立了该抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。并研究了包被温度和时间及不同卵黄前处理方法对ELISA检测的影响,所获得的最佳检测条件为:以浓度为108~109/mL的灭活E.coliO157为抗原进行包被,4℃包被19h,水稀释法对卵黄进行前处理,然后检测其中的IgY效价。该方法简便可靠,适于对大肠杆菌特异性抗体IgY的动态检测和批量检测。 相似文献
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犬瘟热高免卵黄抗体的制备及防治试验 总被引：1，自引：0，他引：1
用鸡胚成纤维细胞培养犬瘟热病毒制备油乳剂灭活苗,多次免疫蛋鸡制备卵黄抗体。经临床治疗试验证实卵黄抗体可有效治疗犬瘟热早期感染,治愈率达85．7％。为生产异源动物抗体提供参考。 相似文献
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制备重组猪三十九肽胆囊收缩素(GST-CCK39),以其为抗原免疫28周龄的蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价卵黄抗体,并用免疫琼脂扩散试验、ELISA、Dot-ELISA检测其效价及特异性。结果表明,免疫琼脂扩散测得特异性抗体效价达1∶16以上,ELISA效价达1∶12 800以上;Dot-ELISA显示所获得卵黄抗体具有较强的特异性;高效价,特异性的卵黄抗体可维持50 d以上。表明用重组蛋白GST-CCK39免疫蛋鸡后能获得效价高、特异性强的卵黄抗体。 相似文献
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卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulin of yolk,IgY)是鸟类、爬行动物和两栖类动物体内的主要抗体,与哺乳动物IgG功能类似,一般从被抗原免疫的母鸡卵黄中提取。与IgG相比,IgY具有许多突出的优点,在制备针对多种抗原的多克隆抗体、免疫检测、人类和动物疾病的预防治疗等方面均得到广泛应用。对IgY在免疫检测方面的应用进展进行了综述。 相似文献
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《延边大学农学学报》2019,(4)
近年来,抗生素残留与耐药性问题在畜牧养殖中日益凸显,寻找有效的抗生素替代物成为当前研究的热点。鸡卵黄抗体(IgY)具有化学性质稳定、产量高、成本低、特异性强且无任何毒副作用的优势,并且能给多种胃肠道、非肠道疾病提供有效的被动免疫保护,是一种极具潜力的抗生素替代品。基于此,该文就IgY的理化特性、作用机理、在动物疾病防治中的应用现状以及通过包被来提高口服IgY利用效果的研究加以阐述,以期为IgY产品升级和开发更加高效的复合型IgY制剂提供思路。 相似文献
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采用ＤＮＡ重组技术和蚀斑技术获得融合基因的重组病毒，制备了鸡生长抑制因子（ＳＳ）免疫原，与鸡传染性ＩＢＤ、ＮＤ免疫原共同高免健康产蛋鸡，使其卵黄中产生高效价的抗鸡ＳＳ、ＩＢＤ、ＮＤ抗体，利用含高效价的卵黄制成鸡抗病促生长剂。实验结果表明，该制剂对人工感染的ＩＢＤ鸡治愈率为９７．５％，预防保护率９８．４％；对流行区自然感染的ＩＢＤ鸡治愈率９６％，预防保护率９７％。对健康肉仔鸡应用，可使其育成出栏时间提前３天，每只平均比对照增重１３５．７ｇ；饲料转化率提高８．３７％。 相似文献
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《江苏农业科学》2017,(10)
采用甲醛灭活的仔豪猪腹泻大肠杆菌为抗原,免疫健康140日龄桃源蛋鸡,刺激机体反应生成血清抗体和卵黄抗体,并采用平板凝集试验检测抗体效价,研究获得含有高效价血清和高免蛋的最佳条件。结果表明,双翼下静脉注射10~(12)CFU/mL大肠杆菌悬浮液的最佳免疫剂量为1 mL/次。在大肠杆菌悬液中添加等量的完全福氏佐剂对免疫应答加强的程度最高。强化免疫程序能大大加强产蛋母鸡的免疫应答强度,其中初免后,每周强化免疫1次,连续4次,效果最好。无菌检测及动物安全性试验表明,制备的卵黄抗体安全可靠。制备的卵黄抗体效价和血清抗体效价变化幅度小、稳定性好、持续时间久,为临床上防治仔豪猪腹泻大肠杆菌病提供了新的手段。 相似文献
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从发病的暗纹东方纯体内分离、鉴定了一株致病性嗜水气单胞菌,测定其毒力,命名为NT-1.以NT-1为抗原,免疫28周龄的罗曼蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价的卵黄抗体.微量凝集试验、ELISA检测其效价及特异性:不同浓度卵黄抗体的粗提液与NT-1菌液混合注射ICR小鼠,检测特异性卵黄抗体的抑菌效果.结果表明,微量凝集试验测得的特异性抗体效价达1:16以上,ELISA效价达1:12 800以上;高效价、特异性的卵黄抗体可维持90 d,特异性卵黄抗体EUSA效价达1: 640时对感染NT-1的ICR小鼠的保护率达到了100%. 相似文献
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【目的】探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)3种不同抗原制备的卵黄抗体对PEDV的中和能力,为抗猪流行性腹泻卵黄抗体的制备提供新的方法和理论基础。【方法】根据PEDV S糖蛋白基因设计引物扩增PEDVS534基因(636~789位氨基酸)和PEDV COE基因(499~638位氨基酸),并构建原核表达质粒pET32a-PEDV S534和pET32a-COE,分别转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达。以原核表达的PEDV S534蛋白、COE蛋白以及PEDV灭活病毒为抗原,分别免疫产蛋鸡并制备卵黄抗体,通过病毒中和试验评价各卵黄抗体的中和效力。【结果】成功表达了PEDV S534蛋白和COE蛋白,Western-Blotting分析显示,2种蛋白均具有很好的免疫原性;制备的3种特异性卵黄抗体均具有一定的病毒中和能力,PEDV S534蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶12,COE蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶25,而PEDV灭活病毒的卵黄抗体中和效价达到1∶120。【结论】PEDV灭活病毒的中和能力最强,其次为COE蛋白特异性卵黄抗体,PEDV S534卵黄抗体的中和能力较弱。 相似文献
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应用蔗糖密度梯度离心法纯化贝氏隐孢子虫卵囊,冰浴超声波破碎、反复冻融卵囊,低温离心获得贝氏隐孢子虫卵囊蛋白质抗原.免疫产蛋鸡,6次免疫后获得高免特异性卵黄抗体IgY.制备辣根过氧化物酶(HRP)标记免抗鸡IgG,其最佳工作浓度为1:4 000～1:6 000,贝氏隐孢子虫卵囊抗原包被浓度8.15 mg·L-1,4℃包被过夜(≥10 h);1×106mg·L-1 BSA-PBST稀释卵黄,建立了检测抗贝氏隐孢子虫特异性卵黄抗体的间接ELISA方法. 相似文献
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以灭活嗜水气单胞菌(AS 1.927菌株)为抗原免疫蛋鸡,采用水稀释法粗提蛋黄液IgY和硫酸铵法纯化粗提物中IgY,研究其在上清液中的抗体提取率及其体外抑菌效果.研究表明,pH 5.0、10×水稀释法粗提后上清液中IgY抗体提取率为78.34%,33%(v/v)饱和硫酸铵法纯化后上清液中抗体提取率为64.1%,SDS-PAGE电泳显示纯化后的IgY纯度较高.pH 5.0、10×水稀释法粗提后的特异性IgY浓度达1.0 mg/mL时,嗜水气单胞菌在18 h内无生长.结果提示,用水稀释法和硫酸铵法提取蛋黄中的抗嗜水气单胞菌特异性IgY,具有简便、快捷、高效的特点,所制备的IgY活性较高,可用于嗜水气单胞菌感染引起的水生动物疾病预防和控制. 相似文献
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[目的]探索一种新的制备鸡传染性法氏囊病高免血清的方法。[方法]采用IBDV灭活苗对27日龄SPF鸡作基础免疫,活疫苗作3次加强免疫,四免后21 d采血制备高免血清。[结果]试验结果表明随着免疫次数的增加,试验鸡IBD中和抗体滴度逐步增加,一免和二免后中和抗体分别为12 log2和13 log2,三免和四免后中和抗体达到最高值15 log2。[结论]采用该方法免疫SPF鸡,有效保护了法氏囊不受损伤,3次免疫即可获得高效价的IBDV抗血清。 相似文献